悉生生物學(xué)

悉生生物學(xué)是研究悉生生物以及由悉生生物造成的悉生態(tài)的生物學(xué)分支學(xué)科。凡在某一生物體中沒有任何可檢出的其他生物，或者除少數(shù)棲息其中的已知生物外，不能再檢出其他生物的，稱為悉生生物。前者即所謂無(wú)菌生物，如培養(yǎng)的無(wú)菌藻類、在無(wú)菌條件下培育的不帶細(xì)菌或任何其他生物的小鼠等。如果將細(xì)菌如大腸桿菌，或其他生物如痢疾變形蟲，引入上述的無(wú)菌小鼠體內(nèi)，使小鼠和體內(nèi)的大腸桿菌或痢疾變形蟲共同生活，此時(shí)小鼠和大腸桿菌或和痢疾變形蟲之間的關(guān)系，無(wú)論是互利的或有害的，均形成一種悉生態(tài)，而小鼠、大腸桿菌和痢疾變形蟲也均屬悉生生物，即除這三種生物外，再無(wú)可檢出的其他生物參加這一悉生態(tài)。高等動(dòng)物體內(nèi)，包括人體內(nèi)，總棲息一些細(xì)菌和其他微生物。這些微生物群和寄主的關(guān)系以及它們彼此的關(guān)系十分錯(cuò)綜復(fù)雜。用這樣的動(dòng)物做生物學(xué)研究，例如，研究動(dòng)物的消化機(jī)能，或研究某一種細(xì)菌或寄生蟲對(duì)動(dòng)物的影響等，不能排除存在于動(dòng)物體內(nèi)微生物群的干擾，因而所得結(jié)論只能是有條件的。只有使用悉生動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，才能得到準(zhǔn)確結(jié)論。例如，枯草桿菌對(duì)普通的雞無(wú)致病性，但對(duì)無(wú)菌的雞則能引起心臟損傷，甚至死亡；痢疾變形蟲能引起普通豚鼠阿米巴痢疾，但對(duì)無(wú)菌豚鼠卻無(wú)致病性；將痢疾變形蟲和枯草桿菌或產(chǎn)氣莢膜桿菌同時(shí)輸給無(wú)菌豚鼠，就可引起豚鼠發(fā)病。由此可見，痢疾變形蟲對(duì)豚鼠本無(wú)致病性，只有在某些其他微生物作用下才有致病性。動(dòng)物體內(nèi)的共棲生物對(duì)動(dòng)物的代謝、生長(zhǎng)發(fā)育起什么作用？寄主和它們?nèi)绾尉S持平衡以達(dá)到共存的關(guān)系？這些都是需要利用悉生生物學(xué)的手段育成無(wú)菌動(dòng)物，再利用無(wú)菌動(dòng)物制造悉生態(tài)來(lái)進(jìn)行研究的。

悉生生物學(xué)中研究最多的是無(wú)菌生物。細(xì)菌、藻類和原生動(dòng)物等的單種純凈培養(yǎng)都是無(wú)菌生物。培育無(wú)菌的高等植物和各種多細(xì)胞動(dòng)物的研究也都在進(jìn)行并取得成果。無(wú)菌脊椎動(dòng)物在悉生生物學(xué)研究中占據(jù)重要的地位。

發(fā)展簡(jiǎn)況

1885年，法國(guó)微生物學(xué)家L.巴斯德提出動(dòng)物的生存離不開腸道細(xì)菌的存在。這一意見在生物學(xué)界引起了爭(zhēng)論。1895年，柏林大學(xué)的G.H.F.納托爾和H.蒂爾費(fèi)爾特把剖腹生豚鼠放在無(wú)菌的玻璃罩內(nèi)飼養(yǎng)，喂滅菌牛奶，第八天處死豚鼠后檢查，腸道內(nèi)不存在細(xì)菌。無(wú)菌豚鼠是可以生存的，但必須喂以純動(dòng)物來(lái)源的飼料。1899年M.肖特利烏斯培育了無(wú)菌雞，但僅活了17天，失敗的原因是飼料營(yíng)養(yǎng)不足。1912年，M.科恩迪經(jīng)一再改進(jìn)飼料，終于培養(yǎng)成功無(wú)菌雞。1932年G.格利姆斯泰特培養(yǎng)無(wú)菌豚鼠獲得成功，隨著無(wú)菌操作和飼養(yǎng)技術(shù)的日趨完善，20世紀(jì)40年代，前后培育成功無(wú)菌的猴、大鼠、家兔、小鼠和狗。60年代獲得無(wú)菌豬、羊和牛。1971年培育成功無(wú)菌馬。

無(wú)菌脊椎動(dòng)物的培育

飼養(yǎng)無(wú)菌動(dòng)物的環(huán)境必須是絕對(duì)沒有微生物以及其他可能感染動(dòng)物的生物。根據(jù)這個(gè)要求，美國(guó)J.A.賴尼瑟在1943年用金屬材料制成能耐受高壓蒸氣滅菌的隔離器，隔離器上有玻璃觀察窗和操作橡皮手套，他用這種隔離器飼養(yǎng)出了無(wú)菌雞。1946年日本宮川為隔離器增設(shè)遙控的精密的機(jī)械手。1959年P(guān).C.特雷克斯勒使用無(wú)毒塑料薄膜制成無(wú)菌隔離器的主體部分。這種隔離器制造工藝較為簡(jiǎn)單，易于觀察操作，造價(jià)僅為金屬制的幾十分之一，滅菌簡(jiǎn)便。輸入無(wú)菌隔離器的空氣要經(jīng)過(guò)0.3微米的濾除率達(dá)99.97%以上的高效濾過(guò)器。排氣口亦同樣裝有高效濾過(guò)器，以免空氣逆流時(shí)帶入細(xì)菌。飼料、飲水和墊料都要經(jīng)過(guò)真空高壓或鈷60照射滅菌后輸入器內(nèi)。

培育無(wú)菌卵生動(dòng)物，如禽類，要從微生物傳染病最少的健康動(dòng)物群中，選擇未被糞便污染的受過(guò)精的蛋，并將蛋的表面徹底滅菌后送入無(wú)菌隔離器內(nèi)孵化育雛。

培育胎生動(dòng)物如哺乳類，要用無(wú)菌的剖腹產(chǎn)手術(shù)，將已成熟的胎兒從無(wú)菌的子宮內(nèi)取出，通過(guò)滅菌液浸泡槽輸入無(wú)菌隔離器內(nèi)，用人工配制的初乳飼喂。人工乳的營(yíng)養(yǎng)成份和飼喂技術(shù)，是無(wú)菌動(dòng)物飼養(yǎng)成功的關(guān)鍵。離乳后喂給滅菌的飼料和飲水。

對(duì)無(wú)菌動(dòng)物要定期檢查，以確保無(wú)菌狀態(tài)。一般每?jī)芍軝z查一次，發(fā)現(xiàn)污染立即淘汰。

無(wú)菌脊椎動(dòng)物雖然不帶各種細(xì)菌，但不能排除極少數(shù)能通過(guò)母體胎盤垂直感染胎兒的微生物，如病毒和弓形蟲等。

無(wú)菌脊椎動(dòng)物的特性

因?yàn)闊o(wú)微生物的刺激，其淋巴系統(tǒng)發(fā)育不全，體液和細(xì)胞防御系統(tǒng)不如常態(tài)動(dòng)物；淋巴漿細(xì)胞少，脾較小，白細(xì)胞缺乏和吞噬反應(yīng)差，血清內(nèi)殺菌活性差，球蛋白含量低，很少含有抗細(xì)菌的凝集素，因而無(wú)菌動(dòng)物易于感染疾病。但是當(dāng)無(wú)菌動(dòng)物受了抗原刺激后即可具有與通常動(dòng)物同樣的免疫效應(yīng)。

嚙齒類和兔類無(wú)菌動(dòng)物的小腸壁薄盲腸比通常動(dòng)物擴(kuò)大4～10倍，可達(dá)體重的30%。膨大的盲腸和大腸內(nèi)的容物含水量較多，成棕色液體，糞軟而無(wú)定型，易下??；排尿量較大。

無(wú)菌脊椎動(dòng)物的應(yīng)用

傳染病研究控制無(wú)菌動(dòng)物從未接觸微生物，當(dāng)試以特異感染因子——致病菌等，?？色@得一致的感受性，產(chǎn)生較純的特異的抗血清，有助于傳染病病因?qū)W研究。在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（小鼠、狗等）和家禽、家畜繁育、飼養(yǎng)中，為了控制傳染病，可應(yīng)用無(wú)菌動(dòng)物或喂給一種或多種非致病細(xì)菌的無(wú)菌動(dòng)物（悉生動(dòng)物）做為建群的種子動(dòng)物。

正常菌群與其宿主的相互關(guān)系研究

把一種或多種由動(dòng)物體分離出的真菌、細(xì)菌、病毒等接種給無(wú)菌動(dòng)物即可探索它們與宿主之間共生、寄生、拮抗、變異等相互關(guān)系，并進(jìn)行有關(guān)生理學(xué)、生物化學(xué)、細(xì)胞學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)以及臨床治療、腫瘤、免疫、代謝、營(yíng)養(yǎng)等方面研究。

展　望

悉生生物學(xué)的研究發(fā)展較快而廣。醫(yī)學(xué)研究需要無(wú)病毒和無(wú)抗原動(dòng)物模型，以及悉生猿猴的培育；畜牧業(yè)發(fā)展悉生牛、馬、羊、豬以排除各種病原體；悉生植物已應(yīng)用在生物固氮基因的重組，促使更多農(nóng)作物帶有固氮菌，并對(duì)菌根和根際微生物以及農(nóng)藥和殺蟲劑的無(wú)害化的研究。悉生生物亦應(yīng)用在微生態(tài)的研究中，為防治人、畜和植物的生態(tài)病以求達(dá)到健康長(zhǎng)壽和增產(chǎn)。