2.1.3.1　培養(yǎng)

分別將待測菌株和對照菌株接種于牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基(NA)平板和試管斜面上,以25℃培養(yǎng)2 d后觀察。

2.1.3.2　形態(tài)學觀察

觀察細菌的形態(tài),包括菌體的形狀、芽孢位置及鞭毛著生情況、類脂顆粒的有無,以及伴孢晶體染色、抗酸染色和芽孢染色,采用孔雀石綠染色法,鞭毛采用西薩節(jié)-基爾(Cessres-Gill)染色法,其余特征觀察均按參考文獻[59-60]。

2.1.3.3　生理生化性狀測定

(1)生理生化反應(yīng)

卵磷脂酶、明膠的液化、不同溫度下的生長試驗、接觸酶試驗、V.P.試驗及p H變化、產(chǎn)生吲哚試驗、淀粉水解試驗、從糖類(D-葡萄糖、D-乳糖、D-木糖、D-甘露醇)產(chǎn)酸和產(chǎn)氣試驗、硝酸鹽還原試驗,觀察p H值為5.7的條件下生長情況,以及耐鹽性(7%NaCl)[59-60]。

(2)分解有機磷農(nóng)藥特性測定

把查彼克培養(yǎng)基中的K 2 HPO 4成分去掉,加入25μg/mL的三唑磷,然后在含有三唑磷的平板上劃線接種多粘芽孢桿菌B-FS01,以正常查彼克培養(yǎng)基作為對照,觀察生長情況和拮抗活性。

(3)生物固氮活性測定

把查彼克培養(yǎng)基中的NaNO 3成分去掉,制成不含氮源的查氏平板。為了確保培養(yǎng)基中無氮源成分,在配制培養(yǎng)基時用瓊脂糖代替瓊脂,用雙蒸水代替蒸餾水,在平板上劃線接種B-FS01,以正常查彼克培養(yǎng)基作為對照,觀察生長情況和拮抗活性。