實(shí)訓(xùn)十二　馬鈴薯脫毒快繁技術(shù)

一、實(shí)訓(xùn)目的

學(xué)習(xí)和掌握馬鈴薯的脫毒與快繁技術(shù)。

二、實(shí)訓(xùn)條件及用具

材料：馬鈴薯。

用具：超凈工作臺(tái)、高壓滅菌鍋、天平、量筒、燒杯、鑷子、剪刀等。

試劑：MS培養(yǎng)基+0.1mg/L～0.2mg/LIAA+0.1mg/L～0.2mg/L6-BA+3%蔗糖+0.05mg/LGA₃；75%酒精、0.1%多菌靈、0.1%升汞、10%次氯酸鈉等。

三、實(shí)訓(xùn)步驟

（一）優(yōu)良母株選擇

選擇適宜當(dāng)?shù)卦耘嗟母弋a(chǎn)優(yōu)質(zhì)、生長健壯的馬鈴薯品種植株為母株，取枝條，剪去葉片后切成數(shù)段，每段帶有一個(gè)腋芽，含頂芽2～3節(jié)。

（二）材料消毒

剪好的莖段經(jīng)流水沖洗數(shù)分鐘，用濾紙吸干表面水分后于75%酒精浸泡10小時(shí)，再用0.1%多菌靈浸泡10分鐘，再用0.1%升汞溶液消毒10分鐘，無菌水沖洗5次。

（三）莖尖切割

將消毒好的莖放在解剖鏡下，無菌剝?nèi)ロ斞亢鸵秆可陷^大的幼葉，切取0.3～0.5mm含1～2個(gè)葉原基的莖尖組織，接種在培養(yǎng)基上。

（四）莖尖培養(yǎng)

培養(yǎng)基：MS培養(yǎng)基+0.1mg/L～0.2mg/LIAA+0.1mg/L～0.2mg/L 6-BA+3%蔗糖+0.05mg/LGA₃，pH5.6～6.0。

培養(yǎng)條件：溫度25℃～28℃，光照1500～2000lx，光照每天14小時(shí)。

（五）莖尖苗的初級(jí)快繁

當(dāng)薯苗長至3～6cm時(shí)，將小植株切段進(jìn)行短枝扦插，除頂芽一般帶1～2片展開葉片外，其余的切段都是具一節(jié)一葉的短枝。切段直插于培養(yǎng)瓶內(nèi)無植物生長物質(zhì)的MS培養(yǎng)基中，條件同莖尖培養(yǎng)。2～3天內(nèi)，切段基部即產(chǎn)生不定根，30天左右長成具有6～8片展開葉試管苗。

（六）脫毒鑒定

莖尖培養(yǎng)產(chǎn)生的試管苗，經(jīng)嚴(yán)格檢測(cè)后，才能確認(rèn)為脫毒苗。

確認(rèn)脫毒苗是否帶毒及其種類常用的方法有：指示植物鑒定法、電子顯微鏡鑒定法、血清學(xué)檢測(cè)法等。

四、完成實(shí)訓(xùn)報(bào)告