一、熒光的基本知識(shí)

1.熒光　某些化學(xué)物質(zhì)能從外界吸收能量而進(jìn)入激發(fā)態(tài)，當(dāng)其從激發(fā)態(tài)再回復(fù)到基態(tài)時(shí)，過(guò)剩的能量以電磁輻射的形式釋放（即發(fā)射熒光）。引起發(fā)熒光的能量種類很多，如光能、化學(xué)能等，由光激發(fā)所引起的發(fā)光稱為光致熒光。熒光發(fā)射的特點(diǎn)是產(chǎn)生熒光的物質(zhì)在接受激發(fā)光能后即刻發(fā)光，而一旦停止供能，發(fā)光（熒光）現(xiàn)象也隨之消失。

2.熒光效率　熒光物質(zhì)吸收光能后不會(huì)將全部光能都轉(zhuǎn)變成熒光，部分以其他形式釋放。熒光分子將吸收的光能轉(zhuǎn)變成熒光的百分率稱熒光效率。

熒光效率=發(fā)射熒光的光量子數(shù)（熒光強(qiáng)度）/吸收光的光量子數(shù)（激發(fā)光強(qiáng)度）

3.熒光淬滅　熒光物質(zhì)在受到激發(fā)光較長(zhǎng)時(shí)間的照射或在某些理化因素（如紫外線照射、高溫、苯胺、碘、硝基苯等）作用后會(huì)減弱甚至消退，稱為熒光淬滅。因此熒光物質(zhì)的保存應(yīng)注意避光（特別是紫外光）和避免與其他化合物的接觸。

4.熒光物質(zhì)　許多物質(zhì)都可產(chǎn)生熒光現(xiàn)象，但并非都可用作為熒光色素。只有那些能產(chǎn)生明顯熒光的有機(jī)化合物才能作為熒光色素。

常用的熒光色素有：異硫氰酸熒光素（FITC，呈黃綠色熒光）、四乙基羅丹明（RB200，呈橘紅色熒光）、四甲基異硫氰酸羅丹明（TRITC，呈橙紅色熒光）、藻紅蛋白（PE，呈紅色熒光）。

被某些酶作用后也可產(chǎn)生熒光的物質(zhì)，如4-甲基傘酮和對(duì)羥基苯乙酸。另外鑭系稀土元素銪（Eu³⁺）、鋱（Tb³⁺）、鈰（Ce³⁺）等的螯合物經(jīng)激發(fā)后也可發(fā)射特征性熒光。