第二節(jié)　腎穿刺標本的處理

一、理想的腎穿刺標本

理想的腎穿刺標本應該包括腎皮質(zhì)、皮髓交界、少部分髓質(zhì)，但應以皮質(zhì)為主，同時還要保證有足夠的腎小球數(shù)目，光鏡標本至少要包含10個以上腎小球，否則其意義會大打折扣。腎穿刺時，要求病理醫(yī)師或技術(shù)員在場，對所穿出的腎臟標本進行初步的現(xiàn)場處理，要在普通低倍光鏡或解剖顯微鏡下粗略估計一下腎小球的大概數(shù)目，要保證有足夠的腎小球，一般穿刺2條（見圖3-2）。穿出的腎組織以＞12mm為宜（多數(shù)穿刺針的槽為20mm），但寧淺勿深（即半槽可能好于全槽）。腎小球在解剖顯微鏡下呈模糊的小紅點，在低倍鏡下為紅色斑點狀。放入固定液內(nèi)，因比重大，應沉到瓶底，而脂肪則浮起。

圖3-2　低倍鏡下的腎小球

二、現(xiàn)場處理（即刻處理）

如何對所切割下來的腎臟組織進行分配，應視具體情況具體分析，既不能千篇一律，也不能沒有原則。一般講，熒光有3～5個腎小球、電鏡1～2個腎小球，光鏡越多越好，但最好不能少于10個，而且盡量包含皮髓交界處的腎組織和少量髓質(zhì)。據(jù)統(tǒng)計，標本含5個腎小球時，診斷準確率為65%，而含15個腎小球時，則提高到95%。如果穿刺次數(shù)較多或患者腎功能不好不能多次穿刺時，可不留熒光標本，而改用石蠟切片做免疫熒光。所使用的組織鑷，一旦接觸到固定液，一定要用鹽水沖洗一下才能連續(xù)使用。常見切割方法見表3-2。

表3-2　幾種標本的切割方法

注：免疫熒光電鏡光鏡

（一）光鏡標本的處理

以10%的福爾馬林（甲醛）緩沖溶液固定。方法是用洗凈的玻璃安瓶（如青霉素安瓶）倒入3ml固定液，室溫或4℃保存。如免疫熒光無球或因設備所限不做免疫熒光，也可用此標本做免疫組化，但抗原破壞嚴重。由于它的pH為中性，不會產(chǎn)生福爾馬林色素，組織在此固定液中長時間放置也不會使組織變硬，同時福爾馬林具有穿透力強、固定均勻、可以保存組織內(nèi)的脂類物質(zhì)，使組織很少收縮，增加柔韌性，有利于切片。標本的固定時間要超過4小時（見表3-3）。

表3-3　三鏡檢查的標本固定和保存方法

（二）免疫熒光標本的處理

濕鹽水紗布保存。方法是將3～4層的紗布置于安瓶的瓶底，倒入少許鹽水，浸透紗布，然后將安瓶倒置，控凈瓶底多余鹽水即可。如果鹽水太多，腎組織浸在其中容易造成自溶，如果鹽水太少組織干涸，影響抗原性。標本可在4℃時短時間保存或冰凍下較長時間保存。但最好在24小時內(nèi)完成。

（三）電鏡標本的處理

以2%～3%的戊二醛溶液固定。方法是用洗凈的青霉素安瓶倒入3ml固定液，室溫或4℃保存。