第二節(jié)　免疫治療

免疫治療（immunotherapy）是針對(duì)異常的免疫狀態(tài)，應(yīng)用免疫制劑、免疫調(diào)節(jié)藥物或其他措施來(lái)調(diào)節(jié)或重建免疫功能，以達(dá)到治療疾病的目的。

一、特異性主動(dòng)免疫治療

利用抗原性疫苗對(duì)機(jī)體進(jìn)行免疫接種，誘導(dǎo)其產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答或免疫耐受，達(dá)到治療疾病的目的。如:

腫瘤疫苗:經(jīng)加工、處理的腫瘤抗原肽制備的疫苗。

治療病毒感染性疾病的疫苗:篩選出可有效誘導(dǎo)抗病毒免疫應(yīng)答但不引起免疫損傷的抗原表位（A IDS、HBV的治療性疫苗）。

治療自身免疫病的疫苗:誘導(dǎo)免疫耐受。

二、特異性被動(dòng)免疫治療

直接向機(jī)體輸注特異性免疫效應(yīng)物質(zhì)（抗體或激活的淋巴細(xì)胞），使機(jī)體立即獲得某種特定的免疫力，達(dá)到治療目的。

抗體:破抗——破傷風(fēng)；抗CD3、CD4——防治急性移植排斥反應(yīng)。

人免疫球蛋白:胎盤(pán)、血漿丙種球蛋白，傳染病恢復(fù)期病人的血清。

激活的淋巴細(xì)胞:如LAK，多用于腫瘤治療。

三、非特異性免疫治療

采用非特異性免疫調(diào)節(jié)劑來(lái)調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能失衡的狀況，以達(dá)到治療或輔助治療的目的。

1.免疫增強(qiáng)劑:微生物及其產(chǎn)物（BCG）、植物多糖、中草藥（人參、黃芪）、細(xì)胞因子（IFN、GM-CSF、IL-2等）、化學(xué)藥物（左旋咪唑）。

2.免疫抑制劑:常用于防治器官移植、自身免疫病、過(guò)敏性疾病等。如:

腎上腺皮質(zhì)激素:抗炎、免疫抑制。治療:炎癥、超敏反應(yīng)、排異。

環(huán)磷酰胺:抑制T細(xì)胞及B細(xì)胞增殖分化。治療:自身免疫病、排異、腫瘤。

環(huán)孢霉素A（CsA）:阻斷IL2轉(zhuǎn)錄抑制T細(xì)胞活化。治療:排異、自身免疫病。

FK-506:同CsA，但作用強(qiáng)10～100倍。治療:排異。

雷帕霉素:選擇性抑制T細(xì)胞。治療:排異。

【理解與思考】

1.請(qǐng)你形象地說(shuō)明增強(qiáng)機(jī)體的免疫力途徑。

2.如果你面對(duì)一位被瘋狗咬傷的病人或癌癥病人，你會(huì)選用什么治療方法？你能用通俗的語(yǔ)言向病人說(shuō)明治療機(jī)理嗎？

【課外拓展】

1.疫苗接種前有哪些準(zhǔn)備？

2.疫苗接種的途徑有哪些？

3.制訂免疫程序的依據(jù)是什么？

【課程實(shí)驗(yàn)與研究】

1.結(jié)合所學(xué)的知識(shí)，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一種方案，說(shuō)明疫苗注射后已經(jīng)起到保護(hù)作用。

2.你認(rèn)為“胃病疫苗”、“乳腺癌疫苗”的研制成功可能嗎？如果可行，請(qǐng)寫(xiě)出研制路線(xiàn)圖。

3.《Nature》發(fā)表文章，認(rèn)為“刺激新抗原或可創(chuàng)造有效癌癥疫苗”，請(qǐng)利用所學(xué)的免疫學(xué)知識(shí)，闡明其機(jī)理。

【課程研討】

1.預(yù)防治療傳染病的措施有哪些？

2.目前，治療腫瘤的方法有哪些？

3.哪些食品能增強(qiáng)免疫功能？

4.你認(rèn)為“胃病疫苗”、“乳腺癌疫苗”的研制成功可能嗎？如果可行，請(qǐng)寫(xiě)出研制路線(xiàn)圖。

5.查閱資料，請(qǐng)你分析艾滋病疫苗的研發(fā)前景。

【課后思考】

1.何謂人工主動(dòng)免疫和人工被動(dòng)免疫？?jī)烧哂泻螀^(qū)別？

2.免疫治療的措施有哪些？比較其特點(diǎn)。

【課外閱讀】

Science:“通用型”流感疫苗有望問(wèn)世

據(jù)2009年2月27日的《科學(xué)》雜志報(bào)道，美國(guó)斯克利普斯研究所（TSRI）的Damian Ek-iert及其同事披露了有關(guān)如何將一個(gè)人類(lèi)的抗體與某一關(guān)鍵性流感蛋白結(jié)合的細(xì)節(jié)，該結(jié)合能夠幫助人們研發(fā)針對(duì)季節(jié)性和大規(guī)模流行性感冒病毒的廣譜疫苗。

這種叫做CR6261的抗體會(huì)與流感病毒血凝素蛋白的一個(gè)高度保守（即其結(jié)構(gòu)在許多不同的流感病毒株中都非常相似）的區(qū)域結(jié)合。這一發(fā)現(xiàn)對(duì)那些希望設(shè)計(jì)一種較為“通用型”的流感疫苗的研究人員來(lái)說(shuō)是一個(gè)好消息，因?yàn)樵撏ㄓ眯鸵呙缈梢灾泻投喾N流感病毒株并減弱新的流感大流行所造成的影響。

目前，人們對(duì)流感病毒的設(shè)計(jì)需要每年都進(jìn)行猜測(cè)，以決定在流行季節(jié)中哪種病毒株將會(huì)流行。Ekiert及其同僚對(duì)與CR6261結(jié)合的造成1918年致命性流感的病毒的血凝素蛋白的晶體結(jié)構(gòu)以及該抗體與最近在亞洲造成禽流感暴發(fā)有關(guān)的病毒株的血凝素蛋白結(jié)合的晶體結(jié)構(gòu)進(jìn)行了檢測(cè)。在這兩種情況下，該抗體似乎都阻止了血凝素發(fā)生使病毒與一個(gè)健康細(xì)胞融合所需要的那些變化。

（資料來(lái)源:Science，DOI:10.1126/science.1171491，Dam ianC.Ekiert，IanA.W ilson）

瘧疾疫苗即將進(jìn)入最終階段試驗(yàn)

在研究表明一種候選瘧疾疫苗將肯尼亞和坦桑尼亞的嬰幼兒瘧疾風(fēng)險(xiǎn)降低一半之后，7個(gè)非洲國(guó)家的1.6萬(wàn)名兒童即將在明年早些時(shí)候參與該疫苗的最終階段試驗(yàn)。

下一步的試驗(yàn)將擴(kuò)展到布基納法索、加蓬、加納、馬拉維和莫桑比克。試驗(yàn)定于2009年3月開(kāi)始。

來(lái)自?xún)蓚€(gè)東非臨床試驗(yàn)的結(jié)果12月8日發(fā)表在了《新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志》（NEJM）上，這兩個(gè)試驗(yàn)使用的疫苗目前被稱(chēng)為RTS，S。

“這些結(jié)果促進(jìn)了一種前景，即疫苗有能力保護(hù)非洲的嬰幼兒不受瘧疾感染?！痹撗芯康淖髡咧?、肯尼亞醫(yī)學(xué)研究所設(shè)在Kilifi的地理醫(yī)學(xué)研究中心的A llyOlotu說(shuō)。

其中一項(xiàng)試驗(yàn)證明了該疫苗——它能在這種憑借血液傳播寄生蟲(chóng)到達(dá)肝臟之前制止它們——可以納入非洲國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的兒童免疫規(guī)劃中，而不會(huì)影響其他疫苗的有效性或破壞它自身的有效性。

第二項(xiàng)試驗(yàn)證實(shí)了這種疫苗對(duì)嬰兒的安全和有效性，并發(fā)現(xiàn)它能降低瘧疾的感染率一半（53%）。

Olotu說(shuō)，接下來(lái)的試驗(yàn)的參與者是6—12周的新生兒以及5—17個(gè)月的嬰兒，這些試驗(yàn)將提供關(guān)于該疫苗的有效性和安全性的更多信息。

坦桑尼亞Ifakara衛(wèi)生研究所的Salim Abdulla說(shuō)，在肯尼亞和坦桑尼亞進(jìn)行的最新試驗(yàn)證實(shí)了早先在岡比亞成年人以及莫桑比克的學(xué)齡前兒童身上進(jìn)行的更小規(guī)模的試驗(yàn)，在這些試驗(yàn)中疫苗提供了18個(gè)月到4年的保護(hù)。

然而，Abdulla說(shuō)，目前沒(méi)有在非洲生產(chǎn)這種疫苗的計(jì)劃，而且沒(méi)有關(guān)于它的可能成本的信息。他告訴本網(wǎng)站，科學(xué)家正在和非政府組織以及衛(wèi)生發(fā)展機(jī)構(gòu)協(xié)商開(kāi)展一個(gè)社會(huì)營(yíng)銷(xiāo)運(yùn)動(dòng)，從而迅速擴(kuò)大該疫苗在世界衛(wèi)生組織以及其他免疫接種項(xiàng)目中的應(yīng)用。

“這些發(fā)現(xiàn)為我們打算在非洲的11個(gè)地點(diǎn)進(jìn)行的III期臨床試驗(yàn)建立了強(qiáng)有力的基礎(chǔ)?！盇bdulla說(shuō)。他在坦桑尼亞的坦噶醫(yī)學(xué)研究中心參與了這些試驗(yàn)。

（資料來(lái)源:新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志（NEJM），359，2521（2008），PhilipBejon，LorenzvonSei-dlein；新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志（NEJM），359，2533（2008），SalimAbdulla，MarcelTanner）

接種天花疫苗或可預(yù)防艾滋病

隨著天花在全球消失，天花疫苗已經(jīng)在全球停止接種，但美國(guó)科學(xué)家最新研究發(fā)現(xiàn)，接種天花疫苗可能有效預(yù)防艾滋病傳播。如果這一研究成果得到證實(shí)，將使艾滋病防治工作進(jìn)入一個(gè)新的階段。

這一研究是由美國(guó)加利福尼亞大學(xué)洛杉磯分校以及喬治·梅森大學(xué)的研究人員共同完成的。研究人員對(duì)曾經(jīng)接種天花疫苗和沒(méi)有接種天花疫苗的人進(jìn)行了分析對(duì)比。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，接種天花疫苗的人要比沒(méi)有接種天花疫苗的人更能有效抵御艾滋病病毒侵襲，后者感染艾滋病病毒的幾率要比前者高5倍。

負(fù)責(zé)這項(xiàng)研究的喬治·梅森大學(xué)科學(xué)家雷蒙德·魏因施泰因說(shuō)，關(guān)于目前艾滋病蔓延的解釋有多種，其中包括戰(zhàn)爭(zhēng)、重復(fù)使用沒(méi)有消毒的針頭等。此次的研究卻在一定程度上證明，停種天花疫苗與艾滋病蔓延之間可能存在關(guān)系。

（資料來(lái)源:BMC免疫學(xué)（BMC Immunology），2010（5））

樹(shù)突狀細(xì)胞瘤苗制備及應(yīng)用的研究進(jìn)展

近年來(lái)，腫瘤的免疫治療備受關(guān)注，其已成為繼腫瘤手術(shù)治療、放療、化療后第四種治療方法。而樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）是機(jī)體內(nèi)功能最強(qiáng)的抗原遞呈細(xì)胞（APC），也是唯一能夠激活初始免疫應(yīng)答的APC，在對(duì)腫瘤產(chǎn)生主動(dòng)免疫上起著重要的作用。它攝取、加工腫瘤抗原，通過(guò)M HC-Ⅱ遞呈，進(jìn)而激活初始T細(xì)胞，使機(jī)體對(duì)腫瘤產(chǎn)生主動(dòng)免疫。因此，DC瘤苗的制備與應(yīng)用成為了腫瘤免疫治療的研究熱點(diǎn)。目前，瘤苗研究最主要的工作是在體外培養(yǎng)擴(kuò)增DC，利用抗原或抗原多肽沖擊致敏，然后將致敏的DC回輸或免疫接種至荷瘤宿主體內(nèi)進(jìn)行免疫治療。國(guó)內(nèi)針對(duì)各種腫瘤的DC瘤苗應(yīng)用多數(shù)還處于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)階段，但在國(guó)外已有不少開(kāi)展了臨床實(shí)驗(yàn)甚至用于臨床治療，如腎癌、轉(zhuǎn)移性黑色素瘤，以及惡性膠質(zhì)瘤等腫瘤的免疫治療。

現(xiàn)將近年來(lái)的相關(guān)研究綜述如下:

一、DC的體外擴(kuò)增

體內(nèi)DC數(shù)量很少，僅占外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs）的1%以下，并且在腫瘤發(fā)生以及進(jìn)行化療后外周血中DC明顯減少，因此，必須對(duì)DC進(jìn)行體外擴(kuò)增，才能滿(mǎn)足科研以及臨床的需要。

DC主要來(lái)源于骨髓的CD₃^＋₄造血干細(xì)胞和外周血單核細(xì)胞。從外周血單核細(xì)胞獲取DC時(shí)，可采用白細(xì)胞單采術(shù)直接獲取PBMCs，也可以在抽取外周血后用Ficoll分離法獲取PBM Cs，將獲取的PBM Cs洗滌后在37℃、5% CO₂中溫育2小時(shí)，去除非吸附的細(xì)胞，吸附的細(xì)胞用RPM I-1640培養(yǎng)，并加入粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF），3～5天即可獲得DC。另外還有來(lái)源于骨髓的DC:用紅細(xì)胞裂解液去除紅細(xì)胞，單克隆抗體和補(bǔ)體的混合劑去除淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞，然后在含有GM-CSF的RPM I-1640中培養(yǎng)，3天后去除懸浮細(xì)胞，繼續(xù)培養(yǎng)7天，即可獲得DC。

在培養(yǎng)時(shí)可在培養(yǎng)基中加入促進(jìn)DC成熟的因子，目前認(rèn)為可促進(jìn)DC成熟的因子包括CD₄₀分子的配基化（sCD40L）、Flt3配體（FL）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等。同時(shí)，DC體外培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)基中可以加胎牛血清（FCS）、混合人（AB型）血清或自身血清，也可以使用無(wú)血清培養(yǎng)液培養(yǎng)。目前，臨床應(yīng)用傾向于無(wú)血清培養(yǎng)DC，原因有:①FCS含有異種蛋白，容易過(guò)敏；②混合人（AB型）血清培養(yǎng)基中血清中復(fù)雜的蛋白和抗原成分可能封閉DC表面抗原結(jié)合位點(diǎn)，影響DC抗原遞呈功能，而且血清蛋白酶會(huì)改變DC攝取的肽類(lèi)抗原的抗原；③患者自體血清中可能含抑制因素，如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和IL-10等，影響DC分化和成熟。無(wú)血清培養(yǎng)則克服了上述缺點(diǎn)，是DC介導(dǎo)免疫治療應(yīng)用于臨床的前提。

二、目前致敏DC的主要方法

1.抗原肽刺激DC

抗原肽是目前廣泛應(yīng)用的DC致敏物，例如碳酸桿酶II（CA-II）在惡性黑色素瘤、食管癌、腎癌以及肺癌的腫瘤血管內(nèi)皮表達(dá)，在正常血管內(nèi)皮不表達(dá)，用其致敏DC回輸?shù)襟w內(nèi)取得了較好的抗腫瘤和預(yù)防腫瘤效果。應(yīng)用抗原肽可以避免免疫反應(yīng)對(duì)正常組織的損傷，但目前絕大多數(shù)腫瘤的抗原肽未明確，而且腫瘤細(xì)胞容易通過(guò)變異逃避此種免疫作用，因而限制了其應(yīng)用范圍。

2.腫瘤細(xì)胞提取物致敏DC

采用超聲破碎和反復(fù)凍融的方法獲得腫瘤細(xì)胞提取物，方法簡(jiǎn)單，不需要了解腫瘤抗原肽的表位。但是，腫瘤細(xì)胞蛋白提取物中包含的機(jī)體自身的正常抗原免疫機(jī)體后可能誘發(fā)自身免疫性疾病。有報(bào)道認(rèn)為該種方法比腫瘤特異性抗原能夠更有效地激活機(jī)體免疫。

3.腫瘤細(xì)胞直接融合DC

從患者腫瘤組織獲得單細(xì)胞懸液，與培養(yǎng)成熟的DC等體積、等密度混合，然后在一定的電脈沖下使二者融合。篩選獲得融合且有活力的細(xì)胞，擴(kuò)增后回輸給人體，可以有效地控制腫瘤的發(fā)展，使患者的病情長(zhǎng)期穩(wěn)定。因?yàn)槿诤系姆椒ǐ@得的腫瘤抗原更全面，所以認(rèn)為該方法致敏DC能有效地避免腫瘤的免疫逃逸，比其他致敏方法更有效。

4.基因修飾DC

將腫瘤細(xì)胞DNA負(fù)載DC，可以使DC內(nèi)源性表達(dá)腫瘤抗原，通過(guò)M HC-Ⅰ遞呈進(jìn)而使機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)。具體方法有兩種:一是病毒載體法，常用的病毒載體有腺病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒和痘病毒等；二是脂質(zhì)體、電穿孔等非病毒載體法。目前，病毒載體法較后者成熟。用腫瘤細(xì)胞DNA負(fù)載DC已有臨床應(yīng)用的報(bào)道，并取得了抗腫瘤療效。另外，可用PCR法在體外擴(kuò)增、純化腫瘤相關(guān)抗原（TAA）的mRNA，利用脂質(zhì)體或電穿孔導(dǎo)入DC后，回輸?shù)胶闪鲶w內(nèi)，也可獲得抗腫瘤的療效。而且RNA半衰期短，不會(huì)整合到DC基因中，臨床應(yīng)用起來(lái)安全性更高。近年來(lái)，有學(xué)者將細(xì)胞因子基因轉(zhuǎn)染DC，如IL-1、IL-7、TNF-α等基因，認(rèn)為亦可誘發(fā)免疫反應(yīng)，增強(qiáng)腫瘤特異性細(xì)胞T淋巴細(xì)胞反應(yīng)。而且有研究表明，TAA基因和細(xì)胞因子基因共同轉(zhuǎn)染DC，可以提高DC抗腫瘤的臨床效果。

三、致敏的DC回輸至荷瘤宿主體內(nèi)進(jìn)行免疫治療

DC疫苗用于免疫治療不僅要求細(xì)胞表達(dá)高水平的M HC和共刺激因子，而且要求細(xì)胞能夠遷徙到淋巴結(jié)與T細(xì)胞相互作用，因此DC必須采取有效的方式回輸?shù)胶闪鏊拗黧w內(nèi)。文獻(xiàn)報(bào)道的DC疫苗用法有皮內(nèi)注射、皮下注射、靜脈注射、腹腔注射、淋巴結(jié)內(nèi)注射和腫瘤內(nèi)注射，其中以靜脈途徑居多。也有通過(guò)足背淋巴管回輸DC的報(bào)道。

靜脈途徑雖然有利于DC分布，但容易被肝臟清除。新近的臨床研究認(rèn)為與靜脈注射比較，皮下注射能夠引起更為強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)，而且免疫反應(yīng)的強(qiáng)弱與注射的頻率沒(méi)有相關(guān)性，同時(shí)，還有研究通過(guò)監(jiān)測(cè)血尿常規(guī)、心肝腎功能等提示DC疫苗不會(huì)引起毒副作用，只有少數(shù)患者注射局部可發(fā)生遲發(fā)性超敏反應(yīng)。

四、展望

DC特有的生物學(xué)特性使其成為了當(dāng)今腫瘤生物治療領(lǐng)域備受關(guān)注的焦點(diǎn)之一。當(dāng)前，在眾多動(dòng)物試驗(yàn)成功的基礎(chǔ)上，DC瘤苗的研制及在臨床中的應(yīng)用逐步發(fā)展，并取得了一定進(jìn)展，但是仍有許多問(wèn)題有待進(jìn)一步研究解決。第一，DC體外無(wú)血清培養(yǎng)是其應(yīng)用于臨床的前提，但是目前DC的無(wú)血清培養(yǎng)還不成熟，在無(wú)血清培養(yǎng)過(guò)程中需加入多種刺激因子促進(jìn)DC增殖和成熟，然而這些因子尚需進(jìn)一步明確。第二，何種方法致敏DC能更有效地激發(fā)機(jī)體抗腫瘤的免疫反應(yīng)還不明確。第三，DC回輸?shù)淖顑?yōu)方法以及接種DC的數(shù)量、途徑、次數(shù)及間隔時(shí)間的確定等臨床應(yīng)用方面不成熟，尚需大量臨床觀察與嘗試。

雖然DC介導(dǎo)的腫瘤免疫治療尚存在很多問(wèn)題有待進(jìn)一步研究與明確，但現(xiàn)有的研究表明DC瘤苗在腫瘤的治療及預(yù)防方面具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。

（資料來(lái)源:李健，樹(shù)突狀細(xì)胞瘤苗制備及應(yīng)用的研究進(jìn)展［J］.華中醫(yī)學(xué)雜志，2008，（32）1；71-72）