城市生活污水的生物處理及檢測(cè)_生物工藝學(xué)實(shí)驗(yàn)指

實(shí)驗(yàn)四　城市生活污水的生物處理及COD/BOD檢測(cè)

一、背景知識(shí)

（一）城市生活污水簡(jiǎn)介

生活污水（Domestic sewage）是指城市里的機(jī)關(guān)、學(xué)校和居民在日常生活中產(chǎn)生的廢水，包括廁所糞尿、洗衣洗澡水、廚房等家庭排水以及商業(yè)、醫(yī)院和游樂場(chǎng)所的排水等。人類生活過程中產(chǎn)生的污水，是水體的主要污染源之一。主要是糞便和洗滌污水。城市每人每日排出的生活污水量為150～400L，每人污水的排放量與生活水平、生活習(xí)慣和生活區(qū)域密切相關(guān)。生活污水中含有大量有機(jī)物污染，如纖維素、淀粉、糖類、脂肪和蛋白質(zhì)等；生物污染，如病原菌、病毒、寄生蟲和蟲卵等；無機(jī)物污染，如氯化物、硫酸鹽、磷酸鹽、碳酸氫鹽、鈉、鉀、鈣和鎂等。由于生活污水中含有較高的氮、硫和磷等元素，排放到水體中會(huì)造成富營養(yǎng)化，造成水體二次污染。生活污水在厭氧微生物的作用下，易生成惡臭物質(zhì)，對(duì)空氣環(huán)境產(chǎn)生不良影響。隨著人民生活水平的提高和環(huán)保意識(shí)的加強(qiáng)，對(duì)生活污水處理的需求也與日俱增，對(duì)污水處理的技術(shù)需求也日益急迫，利用微生物對(duì)污水中的污染物進(jìn)行無害化降解甚至資源化利用，前景廣闊。

（二）城市生活污水的危害

城市污水來源廣泛，不同來源的污水存在不同的潛在危害，主要包括：

1.水體和土壤污染

有機(jī)物進(jìn)入水體后，通過微生物的生物化學(xué)作用而分解為簡(jiǎn)單的無機(jī)物質(zhì)（二氧化碳和水），在分解過程中需要消耗水中的溶解氧，在缺氧條件下污染物就發(fā)生腐敗分解、惡化水質(zhì)。水體中需氧有機(jī)物越多，耗氧也越多，水質(zhì)也越差，水體污染越嚴(yán)重。污水中的氮、磷等物質(zhì)還會(huì)造成水體的富營養(yǎng)化污染，水生生態(tài)系統(tǒng)的富營養(yǎng)化通過兩種途徑發(fā)生：一種是含植物無機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)的化學(xué)污染物直接向水體排放；另一種是通過分解者對(duì)化學(xué)污染物的作為而使得有機(jī)物增加。酸、堿污染，破壞水體中pH緩沖作用，消滅或抑制原生態(tài)環(huán)境中微生物的生長，妨礙水體自凈，還可腐蝕橋梁、船舶、漁具等。酸與堿同時(shí)進(jìn)入同一水體，中和之后可產(chǎn)生某些鹽類，又形成了水體的新污染物，并影響水的硬度。無機(jī)鹽的增加可改變水體滲透壓，影響淡水生物的正常生長。在鹽堿化地區(qū)，地表水和地下水中的鹽將進(jìn)一步危害土壤質(zhì)量。污染水的排放和自流同時(shí)會(huì)造成土壤的污染，進(jìn)而影響農(nóng)作物產(chǎn)品的質(zhì)量，甚至造成農(nóng)作物污染。

2.空氣污染

惡臭是一種普遍的污染危害，它也發(fā)生于污染水體中。人能嗅到的惡臭多達(dá)四千多種，危害大的有幾十種。惡臭的危害主要體現(xiàn)在：妨礙正常呼吸功能，使消化功能減退；精神煩躁不安，工作效率降低，判斷力、記憶力降低；長期在惡臭環(huán)境中工作和生活會(huì)造成嗅覺障礙，損傷中樞神經(jīng)、大腦皮層的興奮和調(diào)節(jié)功能；某些水產(chǎn)品染上了惡臭無法食用、出售；惡臭水體不能游泳、養(yǎng)魚、飲用，破壞了水的用途和價(jià)值；惡臭中的硫化氫和甲醛等揮發(fā)性物質(zhì)還會(huì)造成對(duì)人體的直接毒害。

3.病原物及有毒物污染

病原物污染源主要來自城市生活污水、醫(yī)院污水、垃圾及地面徑流等。病原微生物的主要特點(diǎn)是：數(shù)量大，分布廣，存活時(shí)間較長，繁殖速度快，易產(chǎn)生抗性，難以消滅。傳統(tǒng)的二級(jí)生化污水處理及加氯消毒后，某些病原微生物、病毒仍能大量存活。此類污染物還可通過多種途徑進(jìn)入人體，引起個(gè)體的疾病和群體傳播。包括重金屬和有機(jī)物等有毒物質(zhì)污染種類繁多，其共同特點(diǎn)是對(duì)生物有機(jī)體的毒性危害。

（三）城市生活污水主要處理工藝

隨著人們生活水平的提高，生活污水排放越來越嚴(yán)重，也相應(yīng)地衍生出了各種針對(duì)性的處理工藝，并不斷改進(jìn)和完善。主要包括：

1.化學(xué)強(qiáng)化生物除磷污水處理工藝

我國的主要河流和湖泊受磷污染，富營養(yǎng)化嚴(yán)重，中華人民共和國環(huán)保部為控制和減低磷污染，對(duì)磷排放制定了比較嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)。本工藝以除去污水中有機(jī)污染物和各種形態(tài)的磷為主，將化學(xué)除磷和生物除磷一體化進(jìn)行，通過厭氧消化生物系統(tǒng)中活性污泥產(chǎn)生揮發(fā)性有機(jī)酸，作為聚磷菌生長的營養(yǎng)物，使聚磷菌在活性污泥中選擇性增殖，并將其回流到生物系統(tǒng)中，使生物污水處理系統(tǒng)保持在高效除磷狀態(tài)，同時(shí)污泥在厭氧條件下產(chǎn)生的磷釋放，通過化學(xué)除磷消除。

2.循環(huán)間歇曝氣污水處理工藝

循環(huán)間歇曝氣工藝具有高負(fù)荷氧化溝處理效率高的優(yōu)點(diǎn)，又能充分利用序批式活性污泥污水處理工藝出水好的特點(diǎn)，保證了系統(tǒng)出水除去有機(jī)污染物的國家污水排放一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的要求。在投資和運(yùn)行費(fèi)用上比通常以除去有機(jī)污染物為主的二級(jí)生物污水處理系統(tǒng)降低30%左右，適合環(huán)保資金投入相對(duì)較少地區(qū)的污水處理工藝要求。

3.旋轉(zhuǎn)接觸氧化污水處理工藝

在生物轉(zhuǎn)盤技術(shù)基礎(chǔ)上，結(jié)合生物接觸氧化技術(shù)優(yōu)勢(shì)發(fā)展起來的新一代好氧生物膜處理技術(shù)。該工藝技術(shù)和成套設(shè)備整個(gè)污水處理系統(tǒng)中的轉(zhuǎn)軸是唯一的轉(zhuǎn)動(dòng)部分，便于機(jī)械人員維修。系統(tǒng)生物量可根據(jù)有機(jī)負(fù)荷量而自動(dòng)補(bǔ)償。當(dāng)污水中的有機(jī)物增加時(shí)，附在轉(zhuǎn)盤上的微生物隨之增加，反之，隨之減少。由于生物系統(tǒng)中生長的微生物種類多，能夠高效處理各種難降解工業(yè)污水。該污水處理系統(tǒng)的工作效果不容易受到流量和負(fù)荷的突然變化和停電的影響，運(yùn)行費(fèi)用低，占地面積小。

4.連續(xù)循環(huán)曝氣系統(tǒng)工藝（Continuous Cycle Aeration System，CCAS工藝）

該工藝是一種連續(xù)進(jìn)水式SBR（Sequencing Batch Reactor，序批式處理法）曝氣系統(tǒng)，是在SBR的基礎(chǔ)上改進(jìn)而成。SBR工藝由于人工操作管理太煩瑣、監(jiān)測(cè)手段落后及曝氣器易堵塞等問題而難以在大型污水處理廠中推廣應(yīng)用，曾被普遍認(rèn)為適用于小規(guī)模污水處理廠。隨著自動(dòng)控制技術(shù)和監(jiān)測(cè)技術(shù)的飛速發(fā)展，新型不堵塞的微孔曝氣器研制成功，為廣泛采用間歇式處理法創(chuàng)造了條件，隨著技術(shù)的革新和進(jìn)步，目前CCAS已成為最先進(jìn)的電腦控制的生物除磷、脫氮處理工藝。該種處理工藝都有微生物的參與。微生物是一個(gè)具有多功能的化學(xué)反應(yīng)的群體，能夠完成各種各樣的化學(xué)反應(yīng)，對(duì)于污水中難降解的污染物具有聯(lián)合降解的群體優(yōu)勢(shì)，所以，微生物對(duì)污水的凈化具有巨大的潛力。微生物分解有機(jī)物的能力是驚人的?？梢哉f，凡自然界中存在的有機(jī)物，幾乎都能被微生物所分解。

化學(xué)需氧量（COD）反映了水中受還原性物質(zhì)污染的程度，這些還原性物質(zhì)包括有機(jī)物、亞硝酸鹽、亞鐵鹽、硫化物等，是水中有機(jī)物相對(duì)含量的指標(biāo)之一。生活污水與工業(yè)廢水含有大量有機(jī)物，這些有機(jī)物在水體中分解時(shí)要消耗大量溶解氧，從而破壞水體中氧的平衡，使水質(zhì)惡化。生化需氧量（BOD）是屬于利用水中有機(jī)物在一定條件下所消耗的氧，用來表示水體中有機(jī)物的含量的一個(gè)重要指標(biāo)。

二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

1.掌握COD/BOD測(cè)定的基本原理。

2.學(xué)會(huì)COD/BOD測(cè)定的流程和方法。

三、實(shí)驗(yàn)原理

城市生活污水具備微生物生長繁殖的條件和營養(yǎng)物質(zhì)，因而微生物能從污水中獲取養(yǎng)分，同時(shí)利用和降解有害物質(zhì)，從而使污水得到凈化。微生物在污水凈化和治理中得到廣泛應(yīng)用，具有效率高、成本低、處理徹底等優(yōu)勢(shì)。

生化需氧量（Biochemical Oxygen Demand，BOD），又稱生化耗氧量（5日化學(xué)需氧量），是一種環(huán)境監(jiān)測(cè)指標(biāo)，主要用于監(jiān)測(cè)水體中有機(jī)物的污染狀況。表示水中有機(jī)物等需氧污染物質(zhì)含量的一個(gè)綜合指示。BOD是指在規(guī)定的條件下，微生物分解水中的某些可氧化的物質(zhì)，特別是分解有機(jī)物的生物化學(xué)過程消耗的溶解氧，如果水中的溶解氧不足以供給微生物的需要，水體就處于污染狀態(tài)。通常情況下是指水樣充滿完全密閉的溶解氧瓶中，在20℃的暗處培養(yǎng)5d，分別測(cè)定培養(yǎng)前后水樣中溶解氧的質(zhì)量濃度，由培養(yǎng)前后溶解氧的質(zhì)量濃度之差，計(jì)算每升樣品消耗的溶解氧量，以BOD5形式表示。其單位用ppm或mg/L表示。其值越高，說明水中有機(jī)污染物質(zhì)越多，污染也越嚴(yán)重。

化學(xué)需氧量（COD）是在一定的條件下，采用一定的強(qiáng)氧化劑處理水樣時(shí)所消耗的氧化劑的量，是表示水中還原性物質(zhì)多少的一個(gè)指標(biāo)。水中的還原性物質(zhì)有各種有機(jī)物、亞硝酸鹽、硫化物、亞鐵鹽等，這些是造成水體污染的主要成分。COD包括可生化和不可生化有機(jī)物，還有可還原性無機(jī)物氧化所需的氧，BOD/COD的數(shù)值小于1。

COD和BOD是評(píng)價(jià)水污染程度和排放標(biāo)準(zhǔn)的重要指標(biāo)。

四、實(shí)驗(yàn)材料

1.材料及試劑

活性污泥（或復(fù)合菌群）、模擬生活污水（或環(huán)境中生活污水）、葡萄糖、可溶性淀粉、蛋白胨、酵母膏、KH2PO4、mgSO4、FeSO4·7H2O、Na2CO3、Na3PO4、（NH4）2SO4、尿素。

2.儀器及器皿

生化恒溫培養(yǎng)箱、水浴恒溫振蕩器、BOD測(cè)定儀、COD多參數(shù)測(cè)定儀、燒杯、分析天平、紫外分光光度計(jì)等。

五、實(shí)驗(yàn)方法與步驟

（一）實(shí)驗(yàn)步驟

1.復(fù)合微生物菌群的擴(kuò)大培養(yǎng)

在微生物處理污水前，應(yīng)對(duì)復(fù)合微生物菌群進(jìn)行活化和擴(kuò)大培養(yǎng)，促進(jìn)其生長繁殖，提高其活性和濃度，從而能夠更好地應(yīng)用于污水處理。

亦可直接將活性污泥加入模擬生活污水（或環(huán)境中生活污水）進(jìn)行生化處理。

2.生活污水的生化處理

配制模擬生活污水，加入微生物反應(yīng)器內(nèi)并加入一定量的菌懸液（或活性污泥），攪拌通氣，觀察微生物的運(yùn)行效果，并測(cè)定不同時(shí)間段的COD/BOD值，記錄變化數(shù)據(jù)。

3.校園湖水水樣COD/BOD的測(cè)定

在校園各水域取樣，測(cè)量各水樣的COD/BOD，并比較各取水點(diǎn)的水質(zhì)情況。

（二）實(shí)驗(yàn)方法

1.模擬生活污水的配制

按照表2-4-1的配比配制生活污水。配制完成后需要實(shí)測(cè)其水質(zhì)參數(shù)。實(shí)際配置是按照理論各物質(zhì)量的10倍處理，試驗(yàn)用每份2L。將所配溶液均分為5份。

表2-4-1　模擬城市生活污水各組分配比

2.復(fù)合微生物菌群的擴(kuò)大培養(yǎng)

配制擴(kuò)大培養(yǎng)基：蛋白胨5.0173g，酵母膏4.9987g，去離子水1L。取1個(gè)250mL的錐形瓶，加入擴(kuò)大培養(yǎng)基200mL，調(diào)節(jié)pH 6～8，用滴管吸取一滴微生物母液，放入錐形瓶中，攪拌均勻后放入水浴恒溫振蕩器中25℃培養(yǎng)1d，即可作為接種菌懸液。

3.化學(xué)需氧量（COD）的測(cè)定

COD是指在一定條件下，用強(qiáng)氧化劑處理水樣時(shí)所消耗氧化劑的量，用氧的mg/L表示。COD反映了水中受還原性物質(zhì)污染的程度。這些還原性物質(zhì)包括有機(jī)物、亞硝酸鹽、亞鐵鹽和硫化物等。COD是水中有機(jī)物相對(duì)含量的指標(biāo)之一。COD利用重鉻酸鉀法進(jìn)行測(cè)定。

（1）原理

在水樣中加入已知量的重鉻酸鉀溶液，在強(qiáng)酸介質(zhì)下，以銀鹽作催化劑，用試亞鐵靈作指示劑，用硫酸亞鐵銨溶液滴定水樣中未被還原的重鉻酸鉀由消耗的硫酸亞鐵銨的量換算成消耗氧的質(zhì)量濃度。

在酸性重鉻酸鉀條件下，芳烴及吡啶難以被氧化，其氧化率較低。在硫酸銀催化作用下，直鏈脂肪族化合物可有效地被氧化。

（2）干擾及消除

氯離子能被重鉻酸鹽氧化，并且能與硫酸銀作用產(chǎn)生沉淀，影響測(cè)定結(jié)果，故在回流前向水樣中加入硫酸汞，使成為絡(luò)合物以消除干擾.

（3）儀器

回流裝置：帶250mL錐形瓶的全玻璃回流裝置，包括磨口錐形瓶、冷凝管、電爐或電熱板和橡膠管。

50mL酸式滴定管。

（4）試劑

重鉻酸鉀溶液（1/6K2Cr2O7＝0.25mol/L）：稱取預(yù)先在105℃烘干2h的基準(zhǔn)或優(yōu)級(jí)純重鉻酸鉀12.258g，溶于水中，移入1000mL的容量瓶中稀釋至1000mL。

試亞鐵靈指示液：稱取1.485g鄰菲啰啉（C12H8N2·H2O），0.695g硫酸亞鐵溶于水中，稀釋至100mL，貯于棕色瓶中。

硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液［（NH4）2Fe（SO4）2·6H2O≈0.1mol/L］：稱取39.5g硫酸亞鐵銨溶于水中，邊攪拌邊緩慢加入20mL濃硫酸，冷卻后移入1000mL的容量瓶中，稀釋至標(biāo)線，搖勻。用前，用重鉻酸鉀標(biāo)定。標(biāo)定方法為：準(zhǔn)確吸取10mL重鉻酸鉀標(biāo)液于250mL錐形瓶中，加水稀釋至100mL左右，緩慢加入30mL濃硫酸，混勻。冷卻后，加入3滴試亞鐵靈指示液，用硫酸亞鐵銨溶液滴定，溶液顏色由黃色經(jīng)藍(lán)綠至紅褐色即為終點(diǎn)。記錄下硫酸亞鐵銨溶液的消耗量（mL）。

硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度的計(jì)算：

式中：V—滴定時(shí)消耗的硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量，mL；

　硫酸—硫酸銀：于500mL濃硫酸中加入5g硫酸銀，放置1～2d使溶解；

　硫酸汞：結(jié)晶或粉末。

（5）測(cè)定步驟

取20mL混勻水樣置回流錐形瓶中→加入約0.4g硫酸汞→準(zhǔn)確加入10.00mL重鉻酸鉀標(biāo)液和小玻璃珠→再緩慢加入30mL硫酸—硫酸銀溶液→搖勻，連接冷凝管，加熱沸騰回流2h→冷卻后，從冷凝管加入90mL蒸餾水→取下錐形瓶，加入3滴試亞鐵靈指示液，用硫酸亞鐵銨標(biāo)液滴定由黃色經(jīng)藍(lán)綠色至紅褐色為終點(diǎn)。記錄硫酸亞鐵銨標(biāo)液的用量。計(jì)算公式如下：

式中：V0—取樣的體積，mL；

　C—硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度，mol/L；

　V1—滴定空白時(shí)消耗硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的量，mL；

　V2—滴定水樣時(shí)消耗硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的量，mL；

　8000—1/4O2的摩爾質(zhì)量以mg/L為單位的換算值，g/mol。

（6）微生物COD的去除率計(jì)算

微生物COD的去除率是指污水加入微生物后，一定時(shí)間以后，微生物降低COD值與加入微生物后COD的比值。

注意：加入H2SO4-Ag2SO4前，一定要加玻璃珠，以免引起暴沸。

COD的結(jié)果要保留三位有效數(shù)字。

對(duì)未經(jīng)稀釋的水樣COD大于700時(shí)，要進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。

用鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液檢查試劑的質(zhì)量和操作水平，由于每克鄰苯二甲酸氫鉀的理論COD值為1.176g，所以溶解0.4251g干燥過的鄰苯二甲酸氫鉀（HOOCC6H4COOK）于重蒸餾水中，轉(zhuǎn)入1000mL容量瓶中，稀釋至標(biāo)線，使之成為500mg/L CODCr標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4.五日生化需氧量（BOD5）的測(cè)定

生活污水與工業(yè)廢水含有大量有機(jī)物，這些有機(jī)物在水體中分解時(shí)要消耗大量溶解氧，從而破壞水體中氧的平衡，使水質(zhì)惡化。生化需氧量（Biochemical Oxygen Demand after 5days，BOD5）是在規(guī)定條件下，水中有機(jī)物和無機(jī)物在生物氧化作用下所消耗的溶解氧（以質(zhì)量濃度表示）的量，用來表示水體中有機(jī)物的含量的一個(gè)重要指標(biāo)。BOD5的經(jīng)典測(cè)定方法是稀釋接種法。

（1）方法原理

將水樣注滿培養(yǎng)瓶，塞好后應(yīng)不透氣，將瓶置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)5d，分別測(cè)定樣品培養(yǎng)前后的溶解氧，兩者之差可算出每升水消耗掉氧的質(zhì)量，即BOD5值，以氧的mg/L表示。

在測(cè)定BOD5的同時(shí)，需用葡糖糖和谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液完成驗(yàn)證試驗(yàn)。

本方法適用于測(cè)定BOD5范圍在2mg/L＜CBOD5＜6000mg/L，當(dāng)大于6000mg/L時(shí)，會(huì)因稀釋帶來誤差，有必要對(duì)測(cè)定結(jié)果作慎重說明。

（2）儀器

恒溫培養(yǎng)箱；5～20L細(xì)口玻璃瓶；1000～2000mL量筒；玻璃棒；溶解氧瓶（碘量瓶），250～300mL。

（3）試劑

磷酸鹽緩沖溶液：將8.5g磷酸二氫鉀（KH2PO4），21.75g磷酸氫二鉀（K2HPO4），33.4g七水合磷酸氫二鈉（Na2HPO4·7H2O）和1.7g氯化銨（NH4Cl）溶于水中，稀釋至1000mL，此溶液pH值為7.2。

硫酸鎂溶液：將22.5g七水合硫酸鎂（mgSO4·7H2O）溶于水中，稀釋至1000mL。

氯化鈣溶液：將27.5g無水氯化鈣溶于水中，稀釋至1000mL。

氯化鐵溶液：將0.25g六水合氯化鐵（FeCl3·6H2O）溶于水，稀釋至1000mL。

鹽酸溶液（0.5mol/L）：將40mL濃鹽酸溶于水，稀釋至1000mL。

氫氧化鈉溶液（0.5mol/L）：將20g氫氧化鈉溶于水，稀至1000mL。

葡萄糖-谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：將葡萄糖和谷氨酸在103℃干燥1h后，各稱取150mg溶于水中，移入1000mL容量瓶中稀釋至標(biāo)線，臨用前配制。

稀釋水：在5～20L玻璃瓶中裝入一定量的水，控制水溫在20℃左右，用曝氣機(jī)曝氣2～8h，使稀釋水中的溶解氧接近飽和。瓶口蓋兩層紗布，置于20℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置數(shù)小時(shí)，使水中溶解氧含量達(dá)到8mg/L左右。臨用前向每升水中加入氯化鈣、硫酸鎂、氯化鐵、磷酸緩沖液各1mL，混勻。

（4）接種液可選用以下幾種

①一般生活污水，放置一晝夜，取上清液。

②表層土壤水，取100g花園或植物生長土壤，加1L水，靜置10min，取上清液。

③污水廠出水。

④含有城市污水的河水或湖水。

（5）接種稀釋水

每升稀釋水中接種的加入量：生活污水1～10mL；表層土壤水20～30mL；河水或湖水10～100mL。接種稀釋水pH值為7.2，配制后應(yīng)立即使用。

（6）水樣的測(cè)定

①不經(jīng)稀釋的水樣的測(cè)定。

將混勻水樣轉(zhuǎn)移入兩個(gè)溶解氧瓶中（轉(zhuǎn)移中不要出現(xiàn)氣泡），溢出少許，加塞，瓶內(nèi)不應(yīng)留氣泡。

其中一瓶隨即測(cè)定溶解氧，另一瓶口水封后放入培養(yǎng)箱，在（20±1）℃下培養(yǎng)5d。

5d后，測(cè)定溶解氧。

②經(jīng)稀釋水樣的測(cè)定。

一般稀釋法：

按選定的稀釋比例，在1000mL量筒內(nèi)引入部分稀釋水；

加入需要量的混勻水樣，再引入稀釋水（或接種稀釋水）至800mL；

用帶膠板的玻璃棒上下攪勻。攪拌時(shí)膠板不要露出水面，防止產(chǎn)生氣泡；

將水樣裝入兩個(gè)溶解氧瓶內(nèi)，測(cè)定當(dāng)天溶解氧和培養(yǎng)5d后的溶解氧。

稀釋水同樣培養(yǎng)作空白實(shí)驗(yàn)，測(cè)定5d前后的溶解氧。

（7）結(jié)果計(jì)算

被測(cè)定溶液若滿足以下條件，則能獲得可靠的測(cè)定結(jié)果。培養(yǎng)5d后，剩余DO≥1mg/L；消耗DO≥1mg/L。若不能滿足以上條件，一般應(yīng)舍掉該組結(jié)果。

5日生化需氧量（BOD5）以每升消耗氧的毫克數(shù)表示，由下式算出：

式中：C1—在初始計(jì)時(shí)一種試驗(yàn)水樣的溶解氧濃度，mg/L；

　C2—培養(yǎng)5d時(shí)同一種水樣的溶解氧濃度，mg/L；

　C3—在初始計(jì)時(shí)時(shí)空白溶液的溶解氧，mg/L；

　C4—培養(yǎng)5d時(shí)空白溶液的溶解氧，mg/L；

　Ve—制備該試驗(yàn)水樣用去的樣品體積，mL；

　Vt—該試驗(yàn)水樣的總體積，mL。

若有幾種稀釋比所得數(shù)據(jù)皆符合“培養(yǎng)5d后，剩余DO≥1mg/L，消耗DO≥1mg/L”的條件，則幾種稀釋比所得結(jié)果皆有效，以其平均值表示檢測(cè)結(jié)果。

（8）微生物BOD的去除率

微生物BOD的去除率是指污水加入微生物一定時(shí)間以后，微生物降低BOD值與加入微生物后BOD的比值。

注意：

水樣pH值應(yīng)在6.5～7.5，若超出可用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH近于7。

水樣在采集和保存及操作過程中不要出現(xiàn)氣泡。

水樣稀釋倍數(shù)超過100時(shí)，要預(yù)先在容量瓶中用蒸餾水稀釋，再取適量進(jìn)行稀釋培養(yǎng)。

檢查稀釋水和接種液的質(zhì)量和化驗(yàn)人員的水平，可將20mL葡萄糖-谷氨酸標(biāo)液用稀釋水稀至1000mL，按BOD的步驟操作，測(cè)得的值應(yīng)在180～230mg/L，否則，應(yīng)找出原因所在。

在培養(yǎng)過程中注意及時(shí)添加封口水。

六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

1.污水生化處理期間，每天觀察現(xiàn)象、做好記錄。

2.由COD和BOD的測(cè)量學(xué)會(huì)分析水質(zhì)的不同品質(zhì)和對(duì)生活污水的處理程度進(jìn)行表征。