第四節(jié)　血液凝固調(diào)節(jié)系統(tǒng)

血液凝固系統(tǒng)受到若干因素的調(diào)節(jié)，即凝血控制論。包括對(duì)凝血各階段的限制和對(duì)纖維蛋白的降解，分別為抗血液凝固系統(tǒng)和纖維蛋白溶解系統(tǒng)。

一、抗血液凝固系統(tǒng)

生理狀態(tài)下，抗血液凝固機(jī)制包括細(xì)胞和體液兩方面的因素。細(xì)胞因素是指單核－巨噬細(xì)胞系統(tǒng)、肝細(xì)胞對(duì)促凝物質(zhì)及活化凝血因子的消除作用以及血管內(nèi)皮細(xì)胞的抗凝作用。然而，目前認(rèn)為這些細(xì)胞因素的抗凝作用遠(yuǎn)不如體液的抗凝蛋白作用強(qiáng)，且沒有很好的檢測(cè)方法來判斷。因此，本節(jié)主要闡述體液抗凝蛋白的特性與作用。

（一）蛋白C系統(tǒng)　1976年瑞典的Stenflo從吸附過牛血漿的枸櫞酸鋇上洗脫下一些蛋白質(zhì)，通過DEAE-Sephadex柱層析，在第三蛋白峰中分離出一種蛋白質(zhì)，命名為蛋白C（protein C，PC）。PC是一種依賴維生素K的蛋白質(zhì)，具有抗凝作用。后來發(fā)現(xiàn)蛋白C系統(tǒng)除PC外，還包括蛋白S（protein S，PS）、血栓調(diào)節(jié)蛋白（thrombomodulin，TM）和內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體（endothelial protein C receptor，EPCR）。原先將PC抑制物（protein C inhibitor，PCI）歸于蛋白C系統(tǒng)，是因?yàn)镻CI調(diào)節(jié)PC（包括活化蛋白C）的作用，后發(fā)現(xiàn)實(shí)質(zhì)上PCI 就是纖溶酶原活化抑制物-3（plasminogen activator inhibitor-3，PAI-3），具有廣譜的蛋白酶抑制作用，現(xiàn)在已不再歸為蛋白C系統(tǒng)的成員。

1.蛋白C系統(tǒng)的特性

（1）PC：人類 PC 基因位于 2 號(hào)染色體，其蛋白質(zhì)在肝細(xì)胞合成，為維生素K依賴性糖蛋白，由二條多肽鏈組成。分子量為62 kd，重鏈為 40 kd，輕鏈為22 kd，PC結(jié)構(gòu)模式見圖7-6-1所示。正常人血漿PC含量為2～6 mg/L，半壽期為 10 小時(shí)。男女無差異，有隨年齡增加現(xiàn)象。先天性缺乏 PC 可發(fā)生致死性的“暴發(fā)性紫癜（purpura fulminans）”。

（2）PS：1977 年美國(guó)的 Discipio 在Seattle 成功分離出這種蛋白質(zhì)，并命名為PS。它是一種單鏈糖蛋白，共有 635個(gè)氨基酸組成，分子量 64 kd，其基因位于第 3 號(hào)染色體上。PS 也是由肝細(xì)胞合成的依賴維生素 K 的蛋白質(zhì)，血漿中含量 25 mg／L，男性較女性高 10%～15%，也有隨年齡增長(zhǎng)現(xiàn)象。PS 為活化PC的輔因子，缺乏 PS，也易發(fā)生血栓形成。

（3）TM：1982 年由 Esmon 在兔肺中分離獲得。人類 TM 基因位于第 20號(hào)染色體，編碼575個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)。TM 是分子量為105 kd的單鏈糖蛋白血漿中含量 20μg／L。已知 TM 存在于除腦血管外的所有血管內(nèi)皮細(xì)胞中，淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞、成骨細(xì)胞、血小板、原始巨核細(xì)胞及循環(huán)單核細(xì)胞中也有發(fā)現(xiàn)。

TM與凝血酶結(jié)合后大大加速PC的活化。

（4）EPCR：1994 年由 Fukudome 等首先分離鑒定出 EPCR。EPCR 是貫穿于內(nèi)皮細(xì)胞表面的單鏈糖蛋白，分子量為 46 kD，成熟 EPCR 由 221 個(gè)氨基酸殘基組成。人類 EPCR 基因位于第 20 號(hào)染色體。血漿含量為 133 ng／L。 EPCR可結(jié)合 PC 以及活化PC，調(diào)節(jié)PC活化和活化PC的功能。

2.蛋白C系統(tǒng)的抗凝作用　PC必須轉(zhuǎn)變成具有絲氨酸蛋白酶活性的形式，即活化的PC（activated protein C， APC）才能發(fā)揮其抗凝作用。凝血酶是 PC唯一的生理性活化劑，而凝血酶對(duì) PC 的激活過程相當(dāng)緩慢且受鈣離子的抑制。TM可大大加速凝血酶對(duì)PC的激活。首先內(nèi)皮細(xì)胞表面表達(dá)EPCR，與蛋白C結(jié)合，結(jié)合于EPCR的蛋白C可被TM 與凝血酶復(fù)合物激活。APC 與PC一樣都與EPCR具有極強(qiáng)的親和力。與 EPCR結(jié)合的APC失去其抗凝活性?；罨牡鞍?C必須與膜表面反應(yīng)才能發(fā)揮其抗凝作用，而高親和性膜反應(yīng)需要 PS 的存在。PS在血漿中以游離形式以及與補(bǔ)體 4b 結(jié)合蛋白（C4bp）結(jié)合的兩種形式存在，而只有游離的PS才能作為APC的輔因子參與抗凝機(jī)制。圖7-6-2顯示PC如何活化及APC的作用。APC的作用靶之一是抑制位于血小板膜表面的因子Va。結(jié)合在血小板膜表面的因子Va起著因子Xa受體的作用，由它們構(gòu)成的凝血酶原復(fù)合物可迅速使凝血酶原轉(zhuǎn)變成凝血酶。因子 Va 對(duì) APC 的抑制作用特別敏感，特別是在因子 Va 的水平非常低的情況下。因此，APC實(shí)際具有阻止凝血酶原復(fù)合物集中的作用。APC的另一作用靶是因子 VIIIa，因子 VIIIa 與因子 Va 同屬于凝血蛋白輔因子，它們?cè)谀俨挤磻?yīng)中的作用極為相似。APC 對(duì)因子 VIIIa 的滅活導(dǎo)致因子 Xa 生成減少，進(jìn)而影響凝血酶的生成。雖然，現(xiàn)在也有人認(rèn)為PS可直接抑制因子 Xa的活性，而具有獨(dú)立而完整的抗血液凝固作用。但比較肯定的是游離PS參與APC的滅活因子Va 和VIIIa 的作用。另外，APC可抑制因子Xa與血小板膜磷脂的結(jié)合；激活纖溶系統(tǒng)；　增強(qiáng)AT-III與凝血酶的結(jié)合。

3.蛋白C系統(tǒng)作用的調(diào)節(jié)　APC 可以被α2 抗纖溶酶、α1 抗胰蛋白酶、α2 巨球蛋自和 3 型纖溶酶原激活抑制物所滅活。若上述物質(zhì)缺乏，尤其是3型纖溶酶原激活抑制物的缺乏，可導(dǎo)致因子 Va 和 VIIIa 的聯(lián)合缺乏，引起嚴(yán)重出血。相反，若蛋白 C 系統(tǒng)的成分有缺乏，則會(huì)引起嚴(yán)重的動(dòng)靜脈系統(tǒng)血栓形成。而另一種情況，當(dāng)因子 V 或因子VIII 基因突變，導(dǎo)致 APC 切割點(diǎn)氨基酸突變而使 APC 發(fā)生抵抗，也同樣可導(dǎo)致血栓形成。

（二）肝素—抗凝血酶途徑　血漿中含有一組結(jié)構(gòu)上相對(duì)應(yīng)而功能上不同的蛋白抑制物，包括抗凝血酶（AT）、肝素輔因子II（HC II）、纖溶酶抑制物、纖溶酶原活化抑制物、抗胰蛋白酶、抗糜蛋白酶及C1抑制物等，通稱為絲氨酸蛋白酶抑制物（serine protease inhibitors， Serpins），構(gòu)成了所謂的Serpins 超級(jí)家族，其中AT是絕大多數(shù)凝血蛋白酶的抑制物，血漿AT缺陷與血栓形成性疾病的相關(guān)性表明，它在調(diào)節(jié)體內(nèi)止血方面起著至關(guān)重要的作用。肝素是眾所周知的高效抗凝物，它的抗凝活性歸因于其加速AT對(duì)凝血蛋白酶的滅活作用。人類AT主要由肝細(xì)胞合成，經(jīng)修飾加工去掉32個(gè)氨基酸的信號(hào)肽后，成為可分泌的蛋白質(zhì)，含有432個(gè)氨基酸殘基，分子量為58 kd，其基因位于1號(hào)染色體。除肝臟以外，其他臟器如肺、脾、腎、心、腸、腦等也有合成AT-III的能力，血管內(nèi)皮細(xì)胞、巨核細(xì)胞也是AT的合成場(chǎng)所。血漿AT是單鏈α-糖蛋白，由4個(gè)氨基葡萄糖堿基單位組成，碳水化合物含有占9%，基本組成成分有N-乙酰氨基葡糖、甘露糖、半乳糖和唾液酸，按克分子1 : 1 : 0.6 : 1比例組成。血漿AT-III 濃度約為125 mg/L。肝素是一種混雜的氨基葡聚糖，廣泛分布于哺乳動(dòng)物的各種器官，如肝、肺、心、腎和腸。肝素的主要成分有糖醛酸（L-艾杜糖醛酸和D-葡糖醛酸）和氨基己糖（D-氨基葡糖或D-半乳糖胺）并由這兩類成分構(gòu)成碳水化合物的骨架。肝素與AT-III的親和性是其抗凝活性的關(guān)鍵因素，親和性愈高抗凝活性顯示越強(qiáng)。在肝素的存在下，AT抑制凝血酶、因子Xa、XIa、IXa以及其它絲氨酸蛋白酶。由肝素促進(jìn)的AT-凝血酶和AT-FXa滅活反應(yīng)是肝素的主導(dǎo)抗凝機(jī)制。AT對(duì)絲氨酸蛋白酶的滅活作用涉及絲氨酸蛋白酶活性位與AT反應(yīng)位之間形成1 : 1克分子結(jié)合的復(fù)合物凝血酶與AT形成復(fù)合物TAT在體內(nèi)半壽期只有5分鐘，通過肝細(xì)胞處理從血循環(huán)中被清除。AT缺乏是發(fā)生靜脈血栓和肺栓塞的常見原因之一，但與動(dòng)脈血栓形成關(guān)系不大。目前對(duì)先天性AT-III缺乏的分子機(jī)制研究報(bào)道很多，獲得性AT缺乏一般因合成障礙（如肝受損）或消耗過度（DIC、膿毒血癥、深靜脈血栓、急性早幼粒細(xì)胞白血病等）所致。

（三）組織因子途徑抑制物　組織因子途徑抑制物（tissue factor pathway inhibitor，TFPI）是一種與脂蛋白結(jié)合的生理性絲氨酸蛋白酶抑制物。早在 1957 年就有人發(fā)現(xiàn)類似抑制物在調(diào)節(jié)TF-VIIa參與的凝血作用，但直到20世紀(jì)90年代才被正式命名和確定?，F(xiàn)在認(rèn)為其在生理性抗凝血蛋白作用中占相當(dāng)重要的比重，并且直接參與了血液凝固的全過程。TFPI是一單鏈糖蛋白，成熟分子包含有276個(gè)氨基酸殘基。血漿含量是54～142μg／L，其基因表達(dá)在人類2號(hào)染色體，其分子量不完全相同，大多在 36 kd～43 kd 之間，也有少量高分子形式，除血漿中存在TFPI之外，血小板α顆粒和溶酶體顆粒中也有TFPI的存在，當(dāng)血小板活化后釋放入血漿。

TFPI 是主要的血凝調(diào)節(jié)物，它可以直接抑制活化的因子X（Xa），并以依賴Xa 的形式在Ca2⁺ 存在條件下抑制 TF-VIIa復(fù)合物。其作用機(jī)制可能為TFPI首先結(jié)合于FXa的活性中心形成TFPI-FXa，然后在Ca2⁺ 的存在下，與TF/FVIIa復(fù)合物形成多元復(fù)合物，從而抑制外源性凝血途徑。TFPI 抑制譜不很廣，除抑制 Xa 及 TF-VIIa 外，還能抑制胰蛋白酶，對(duì)纖溶酶及糜蛋白酶也有輕微抑制，但不抑制凝血酶、APC、t-PA等。

（四）其他凝血抑制物　除以上PC系統(tǒng)、肝素-AT-III、TFPI 途徑等主要的血液凝固調(diào)節(jié)蛋白之外，人體內(nèi)還存在一些其他生理性血液凝固調(diào)節(jié)蛋白。

1.蛋白 Z 和蛋白 Z 依賴的蛋白酶抑制物　20 世紀(jì) 90 年代前后，又發(fā)現(xiàn)了兩個(gè)新的血液凝固調(diào)節(jié)蛋白，即蛋白Z（protein Z，PZ）和蛋白 z 依賴的蛋白酶抑制物（protein Z-dependent protease inhibitor，ZPI）。并發(fā)現(xiàn)PZ和ZPI 的缺陷可導(dǎo)致血栓形成，但PZ和ZPI 對(duì)血液凝固的調(diào)節(jié)都是既廣泛又有限的。

PZ也是一種維生素K依賴的糖蛋白，由肝細(xì)胞合成分泌后進(jìn)人循環(huán)血液中。分子量為62 kd，其基因定位于13號(hào)染色體，血中濃度為0.6～5.7mg／L。華法令可使PZ水平下降到正常時(shí)的15%以下；DIC、肝病、骨髓纖維化以及新生兒的PZ水平都是很低的。而凝血酶可以與PZ結(jié)合也可以將PZ裂解ZPI是一種絲氨酸蛋白酶，分子量為72 kd，由肝細(xì)胞合成分泌。由423個(gè)氨基酸殘基組成，與別的氨基酸蛋白酶存在25%～35%的相同構(gòu)型，ZPI在血液凝固或血栓形成時(shí)會(huì)大量消耗。PZ與PZI主要滅活因子 Xa，并需要 Ca 和磷脂的存在。作為絲氨酸蛋白酶的ZPI，現(xiàn)在只知能與Xa和XIa結(jié)合并滅活之，卻與血液中存在的其他絲氨酸蛋白酶不一樣，不具備明顯抑制FII a、FVIIa、FIXa、FXIIa、KK、APC、t-PA、u-PA和纖溶酶等的作用。

2.表面結(jié)合抑制物　表面結(jié)合抑制物包括幾種結(jié)構(gòu)不同的血漿蛋白抑制物，它們共同的作用是干擾凝血因子的表面結(jié)合反應(yīng)。

（1）磷脂酶 A2:　1980 年 Verhey 等發(fā)現(xiàn)，磷脂酶 A2結(jié)合于磷脂表層并水解磷脂成分，從而改變磷脂所具有的酶促反應(yīng)表面的性質(zhì)，影響多成分酶原復(fù)合物的形式。

（2）狼瘡抗凝物（lupus anticoagulant，LA）：1980 年 Thiagarajan 等報(bào)道，狼瘡抗凝物是獲得性免疫球蛋白，可與血小板促凝磷脂表面結(jié)合。體外研究發(fā)現(xiàn)，它抑制多成分酶復(fù)合物如凝血酶原酶的形成。

（3）維生素 K 依賴性凝血蛋白活化片段：1984 年 Forman 等觀察到，凝血酶原和因子 X 激活時(shí)所釋放的含谷氨酸活化肽片段，具有抑制外源凝血過程中因子X活化的作用。1985 年 Govers-Riem-Slag 等注意到，他還抑制因子Xa 對(duì)凝血酶原的激活作用。1986 年 Naworth 等發(fā)現(xiàn)，由因子 Xa 釋放的含谷氨酸殘基的活化肽也抑制由磷脂表面介導(dǎo)的反應(yīng)。

（4）血管抗凝物（vascular anticoagulant，VA）：1985年Reutel-ingsperger等報(bào)道一種血漿成分，稱為血管抗凝物。它與帶陰性電荷的磷脂具有非常高的親和性，但需要鈣離子的存在。血管抗凝物干擾凝血因子與磷脂表面結(jié)合反應(yīng)。

二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)

纖維蛋白溶解系統(tǒng)（fibrinolytic system）簡(jiǎn)稱纖溶系統(tǒng)，是指纖溶酶原被特異牲激活物轉(zhuǎn)化為纖溶酶（plasmin， PL），纖溶酶降解纖維蛋白的過程。這一系統(tǒng)的主要功能是將沉積在血管內(nèi)外的纖維蛋白溶解而保持血管暢通，防止血栓形成或使已形成的血栓溶解，血流復(fù)通。它與血液凝固系統(tǒng)存在著既矛盾又統(tǒng)一的動(dòng)態(tài)平衡關(guān)系。纖溶系統(tǒng)異常表現(xiàn)為纖溶活性增高引起的出血以及活性減低而引起的血栓形成。近年來，隨著研究工作的不斷深入，分子生物學(xué)及基因工程等新技術(shù)的廣泛應(yīng)用，對(duì)纖溶系統(tǒng)的某些成分已進(jìn)行了制備，并廣泛應(yīng)用于臨床，為治療血管閉塞性疾病，開辟了新的有效途徑。因此，了解該系統(tǒng)既具有重要的理論意義又具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。

（一）纖溶系統(tǒng)的組分及其功能　參與纖溶系統(tǒng)的酶都?xì)w類于絲氨酸蛋白酶。這些酶在血液中可通過二級(jí)或三級(jí)酶促反應(yīng)活化，從而迅速地激活纖溶酶原，形成的纖溶酶最終降解纖維蛋白。同時(shí)纖溶酶原的活化過程和活性受到血液中相應(yīng)抑制物的嚴(yán)格負(fù)調(diào)節(jié)控制，這些抑制物絕大多數(shù)是屬于絲氨酸蛋白酶抑制物家族成員，它們起源于共同的祖先。纖溶系統(tǒng)主要成員有十余種，本節(jié)重點(diǎn)闡述與纖溶酶促反應(yīng)相關(guān)的蛋白質(zhì)特性與作用。

1.纖溶酶原（plasminogen，PLG）　人類PLG 是一種單鏈糖蛋白，由790個(gè)氨基酸組成，其基因定位于第6號(hào)染色體，由肝臟分泌入血，血中濃度為1.5～2 μmol／L，半壽期為2.2天。因其含糖的量和種類不同，在分離時(shí)可得到兩種 PLG，即谷-PLG（Glu-plasminogen）和賴-PLG（Lys-plasminogen），這兩種PLG的分子量和生物學(xué)活性無顯著差異。PLG的空間三維構(gòu)型對(duì)本身的活化過程有重大影響，完整的PLG分子緊密纏繞呈球狀，PLG激活物的作用位點(diǎn)被隱蔽在分子內(nèi)部，當(dāng)PLG丟失了谷1-賴76多肽片段之后，立即由球狀變成松散結(jié)構(gòu)的鏈狀。當(dāng)PLG上的精560-纈561之間的肽鍵被 PLG 激活物水解后便形成由二硫鍵相連的活化的雙鏈纖溶酶，其酶中心位于輕鏈（B鏈），含241個(gè)氨基酸，從N末端到560位氨基酸組成了重鏈（A鏈）。輕鏈?zhǔn)墙z氨酸活性中心具有特殊的空間結(jié)構(gòu)，該結(jié)構(gòu)對(duì)由纈-苯丙-賴三肽組成的化學(xué)結(jié)構(gòu)具有很高的親和力。當(dāng)血液凝固時(shí)，PLG大量吸附于纖維蛋白網(wǎng)上，在組織型纖溶酶原激活物和尿激酶型纖溶酶原激活物的作用下，激活成纖溶酶，使纖維蛋白溶解。

除了對(duì)纖維蛋白（原）作用之外，纖溶酶還能水解纖維結(jié)合蛋白（fibronectin，F(xiàn)N）、凝血酶敏感蛋白（thrombospondin，TSP）、層素（laminin）、多種凝血因子以及某些膠原蛋白，提示PL可以參與結(jié)締組織的破壞。

2.組織纖溶酶原激活物（tissue plasminogen activator，t-PA）　t-PA屬絲氨酸蛋白酶，其基因位于8 號(hào)染色體，主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞合成和釋放，單核細(xì)胞、巨核細(xì)胞及間皮細(xì)胞也產(chǎn)生一定量的t-PA，正常血漿中t-PA濃度為0.l nmol／L。其在內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)合成時(shí)含562個(gè)氨基酸，經(jīng)過修飾后分泌到血液的t-PA含530個(gè)氨基酸殘基，分子量為68kd，含糖基。t-PA的完整分子為單鏈，被PL切割后在Arg275-Ile276處肽鍵斷裂，轉(zhuǎn)化成由二硫鍵相連的雙鏈t-PA。t-PA輕鏈含有絲氨酸酶家族典型的活性中心，其活性中心由組322、門冬374和絲478所組成。其重鏈分出4個(gè)功能區(qū)域，每個(gè)功能區(qū)域由一個(gè)或幾個(gè)外顯子表達(dá)。缺少重鏈的t-PA對(duì)纖維蛋白的親的力很低。應(yīng)用分子生物學(xué)將重鏈的四個(gè)功能區(qū)域通過排列組合方式分別除去后，證明t-PA對(duì)纖維蛋白的親和力依賴于F區(qū)域（finger domain）和K2區(qū)域（kringle domain）的存在。研究發(fā)現(xiàn)K2區(qū)域與纖維蛋白t-PA激活纖溶酶原密切相關(guān)。單鏈和雙鏈t-PA均能與纖溶激活抑制物（PAI-1）結(jié)合，PAI-1與t-PA之間的結(jié)合位點(diǎn)在t-PA輕鏈的賴296到天冬304之間，該位點(diǎn)與t-PA的纖溶酶原的結(jié)合部位無關(guān)。

3.尿激酶型纖溶酶原激活物（urokinase plasminogen activator，u-PA）　u-PA因人們最初從尿液中提純而得名。腎小管部分上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、單核細(xì)胞、纖維母細(xì)胞以及一些腫瘤細(xì)胞株均能合成和分泌 u-PA。細(xì)胞內(nèi)合成時(shí)為431個(gè)氨基酸的多肽，成熟分泌時(shí)為411個(gè)氨基酸的單鏈糖蛋白，分子量為54kd，其血中濃度約為2～7μg／L，半壽期約為8分鐘。其基因位于10號(hào)染色體。u-PA有兩種類型，未活化的單鏈尿激酶常稱為scu-PA（single chain urokinogen type p1asminogen activator，scu-PA），已活化的雙鏈尿激酶稱為tcu-PA（two chains urokinogen type plasminogen activator，tcu-PA）。scu-PA整個(gè)結(jié)構(gòu)分為四個(gè)區(qū)，先后為①上皮生長(zhǎng)因子區(qū)；②環(huán)狀結(jié)構(gòu)區(qū)；③連接區(qū)；④絲氨酸蛋白酶區(qū)，此為scu-PA酶作用活性中心。tcu-PA 是由 scu-PA 裂解而成，稱為高分子量雙鏈尿激酶（high molecular weight two chains urokinase，HMT tcu-UK），含重鏈和輕鏈兩條肽鏈，重鏈可被纖溶酶進(jìn)一步水解，丟失部分多肽片段，分子量變?yōu)?3 kd，稱為低分子量雙鏈尿激酶（low molecular weight two chains urokinase，LMWtcu-UK）。兩種u-PA均可以直接激活PLG，不需纖維蛋白作為輔因子，但scu-PA對(duì)纖溶系統(tǒng)的激活較tcu-PA 為弱。各種不同形式的尿激酶按其體外激活谷-PLG的速度來排列為HMW-tcu-PA＞LMW-tcu-PA＞scu-PA。

4.纖溶酶（plasmin，PL）　PL是由PLG經(jīng)纖溶酶原激活物作用裂解后所產(chǎn)生的。單鏈PLG在t-PA或u-PA的作用下，其精氨酸560-纈氨酸561之間的肽鍵斷裂，形成雙鏈PL，一條為重鏈（分子量為60kd），另一條為輕鏈（分子量為25kd），活性中心位于輕鏈部分。PL是一種活性較強(qiáng)的絲氨酸蛋白酶，主要作用有：①降解纖維蛋白原和纖維蛋白；②水解各種凝血因子（Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ）；③分解血漿蛋白和補(bǔ)體；④將單鏈t-PA、u-PA轉(zhuǎn)變?yōu)殡p鏈t-PA、u-PA；⑤將谷-PLG轉(zhuǎn)變?yōu)橘?PLG；⑥降解GPIb、GPⅡb/IIIa；⑦激活轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子，降解纖維連接蛋白、TSP等各種基質(zhì)蛋白質(zhì)。

5.纖溶抑制物

（1）纖溶酶原激活抑制物-1（plasminogen activator inhibitor type I，PAI-1）：血漿中的 PAI-1 主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌，是一種單鏈糖蛋白，含379個(gè)氨基酸，分子量為52 kd，其基因位于7號(hào)染色體。正常人血漿PAI-1濃度為 5～85 μg/L。血液中纖溶活性調(diào)節(jié)主要取決于內(nèi)皮細(xì)胞分泌t-PA/PAI-1 的相對(duì)比例。血小板的α-顆粒中富含PAI-1，全血PAI-1的3/4儲(chǔ)存在血小板中，當(dāng)血小板活化釋放時(shí)，PAI-1被釋放到血液中，抑制纖溶酶原激活物的活性，另外，單核細(xì)胞、纖維母細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和一些惡性腫瘤細(xì)胞也能合成分泌PAI-1。 PAI-1主要是與 u-PA 或 t-PA 結(jié)合形成不穩(wěn)定的復(fù)合物，使它們失去活性，其次也可抑制凝血酶、FXa、FXIIa、激肽釋放酶和APC的活性。

（2）纖溶酶原激活抑制物-2（plasminogen activator inhibitor type II，PAI-2）：PAI-2 是首先從人體胎盤組織中提取分離出來的一種蛋白質(zhì)，含 415個(gè)氨基酸，分子量為46 kd，其基因位于18號(hào)染色體。正常人群中，PAI-2的血漿濃度極低，在5μg／L以下，一般只在女子妊娠期間才升高。體外實(shí)驗(yàn)表明，PAI-2只能滅活己活化的t-PA和UK，而對(duì)單鏈t-PA和scu-PA（pro-UK）的抑制作用極微弱。根據(jù)其生化特性，一般認(rèn)為PAI-2是尿激酶的主要抑制物。

（3）纖溶酶原激活抑制物-3（plasminogen activator inhibitor type III，PAI-3）：即蛋白C抑制物（protein C inhibitor ，PCI）：PCI是由肝臟合成釋放的一種廣譜的絲氨酸蛋白酶抑制物，分子量為57 kd，血中濃度較高，主要抑制活化蛋白C和雙鏈尿激酶。PCI另一特點(diǎn)是它的抑制活性受到肝素的調(diào)節(jié)。在肝素存在的條件下，PCI抑制活化蛋白C和雙鏈尿激酶的速度提高近200倍，對(duì)t-PA的抑制速度提高近250倍，PCI滅活絲氨酸酶的方式是形成1 : 1復(fù)合物。復(fù)合物形成后，使蛋白酶失活。

（4）α2-抗纖溶酶（α2-antiplasmin，α2-AP）：α2-AP是由肝臟合成分泌的一種單鏈糖蛋白，含 452 個(gè)氨基酸，分子量為 67 kd。正常人血漿中濃度為 1 μmol／L。α2-AP以兩種形式存在于血循環(huán)中，一種能與PL結(jié)合，約占總α2-AP的70%，另一種為非纖溶酶結(jié)合型，無抑制功能。α2-AP的主要功能是抑制PL、凝血因子（FXa、FXa、FXIIa）、胰蛋白酶、激肽釋放酶等以絲氨酸為活性中心的蛋白酶。其發(fā)揮作用的機(jī)制為：①與 PL以1 : 1的比例形成復(fù)合物；②FXIIa使α2-AP以共價(jià)鍵與纖維蛋白結(jié)合，減弱纖維蛋白對(duì)PL作用敏感性。

（5）α2-巨球蛋白（α2-macrogloglobulin，α2-MG）：α2-MG 是由兩個(gè)完全相同的亞基組成的大分子糖蛋白，每個(gè)亞基含有1451個(gè)氨基酸，總分子量為725 kd。α2-MG 主要由肝和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，正常血漿中濃度為2～5μmol/L。α2-MG 可以分別與 PL、t-PA、UK、激肽釋放酶結(jié)合。這些復(fù)合物形成后，絲氨酸蛋白酶活性中心并沒受到破壞，但由于α2-MG的分子巨大，所產(chǎn)生的空間位阻效應(yīng)使這些酶不能與其相應(yīng)的底物結(jié)合，從而產(chǎn)生抑制效應(yīng)。

（6）其他抑制物：① C1-抑制物（C1-inhibitor），為分子量 105 kd 的單鏈糖蛋白，可分別抑制FXIIa、XIa、激肽釋放酶和纖溶酶。② 富含組氨酸糖蛋白（histidine rich-glycoprotein ，HRGP），是為一種分子量75 kd的糖蛋白，可通過與纖維蛋白競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合纖溶酶原，使纖溶酶原在纖維蛋白的結(jié)合量減少，從而抑制了過度纖溶。③ 蛋白酶連接抑制素-I（ protease　nexin I，　PNI），為一種結(jié)合在細(xì)胞表面的糖蛋白，亦屬于Serpin家族成員。在體外實(shí)驗(yàn)中，它亦能抑制 tcu-PA和 t-PA，并能微弱地抑制纖溶酶和胰蛋白酶。因此，它亦是一種廣譜的絲氨酸蛋白酶抑制物。另外，肝素能提高PNI的抑制活性。

（二）纖維蛋白（原）降解機(jī)制　纖維蛋白溶解過程是一系列蛋白酶催化的連鎖反應(yīng)，主要分為二個(gè)階段，即PLG 在其激活物的作用下轉(zhuǎn)變成 PL 和 PL 水解纖維蛋白（原）及其他蛋白質(zhì)的過程。

1.纖溶酶原激活途徑

（1）內(nèi)激活途徑：是指通過內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的有關(guān)因子裂解 PLG 形成 PL的途徑。FXII 經(jīng)接觸活化成為FXIIa，后者使前激肽釋放酶轉(zhuǎn)變?yōu)榧る尼尫琶?，激肽釋放酶能激活PLG為PL，此是繼發(fā)性纖溶的理論基礎(chǔ)。

（2）外激活途徑：主要是指 t-PA 和u-PA 使 PLG 轉(zhuǎn)變?yōu)?PL 的過程。此是原發(fā)性纖溶的理論基礎(chǔ)。（3）外源性激活途徑：即由外界進(jìn)入體內(nèi)的藥物，如鏈激酶（streptokinase，SK）和尿激酶（urokinase，UK）、重組 t-PA 注入體內(nèi)，使 PLG 轉(zhuǎn)變成PL，此是溶栓治療的理論基礎(chǔ)。

2.纖維蛋白〔原〕降解機(jī)制及降解產(chǎn)物

（1）纖維蛋白原的降解：纖溶酶作用于纖維蛋白原，其酶切點(diǎn)是賴-精之間的肽鍵，整個(gè)纖維蛋白原含有362個(gè)賴-精肽鍵，其中50個(gè)先后被纖溶酶水解切斷。首先，纖溶酶水解釋放出兩條多肽，即Bβ1～42和Aα鏈上裂解下來分子量為42.3 kd的一種極附屬物（碎片A、B、C、H），這兩種多肽可作為早期纖溶標(biāo)志物，留下的片段稱為X片段（fragment X，分子量250 kd）。X片段繼續(xù)被纖溶酶作用，裂解為D片段（分子量100 kd）及Y片段（fragment Y），Y片段再進(jìn)一步被裂解為 D 和 E 片段（分子量為 50 kd），故纖維蛋白原在纖溶酶的作用下產(chǎn)生降解產(chǎn)物是由 X、Y、D、E、Bβ1～42 和極附屬物 A、B、C、H 碎片組成，統(tǒng)稱為纖維蛋白原降解產(chǎn)物（FgDP）。

（2）可溶性纖維蛋白的降解：纖維蛋白原在凝血酶的作用下，分別從 Aα鏈及Bβ鏈裂解下纖維蛋白肽A（fibrin peptide A，F(xiàn)PA）（Aα1-16）和纖維蛋白肽B（f1brin peptide B，F(xiàn)PB）（Bβ1-14），形成纖維蛋白I和II（可溶性纖維蛋白單體）。纖維蛋白I在纖溶酶的作用下，先從其Bβ鏈上裂解出小肽Bβ1-42，再?gòu)钠銩α鏈裂解出A、B、C、H極附屬物，最終形成X’、Y’、D和E’。在纖溶酶的作用下纖維蛋白II中Bβ鏈被裂解釋放出肽Bβ15-42，然后又從Aα鏈裂解出A、B、C、H極附屬物，最終也降解出X’、Y’、D 和E’碎片。

（3）交聯(lián)纖維蛋白的降解：纖維蛋白I和II可自行發(fā)生聚合，經(jīng)因子XIIIa作用而形成交聯(lián)的纖維蛋白。后者在纖溶酶的作用下，形成X’，Y’，D，E’碎片外，還生成D-二聚體和γ-二聚體、Aα鏈的附屬物（碎片A、B、C、H）、復(fù)合物1（DD/E），復(fù)合物 2（DY/YD）和復(fù)合物 3（YY/DD）等。這些產(chǎn)物統(tǒng)稱為纖維蛋白降解產(chǎn)物（fibrin degradation products，F(xiàn)bDP）。

（三）纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物的作用纖維蛋白原降解產(chǎn)物（FgDP）和纖維蛋白降解產(chǎn)物（FbDP）統(tǒng)稱為纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物（FDP），均具有抗血液凝固的作用。

（1）碎片X（X’）因與可溶性纖維蛋白單體結(jié)構(gòu)相似，故可與纖維蛋白單體競(jìng)爭(zhēng)凝血酶，并可與其形成復(fù)合物，以阻止FM的交聯(lián)。

（2）碎片Y（Y’）和D可抑制纖維蛋白單體的聚合和不溶性纖維蛋白的形成。

（3）碎片E（E’）競(jìng)爭(zhēng)凝血酶而發(fā)揮抗凝作用。

（4）極附屬物A、B、C、H可延長(zhǎng)APTT及凝血時(shí)間。

（5）所有的碎片均可抑制血小板聚集和釋放反應(yīng)。