第二節(jié)　溶液顏色檢查

一、概念

溶液顏色及其與規(guī)定顏色的差異能在一定程度上反映藥物的純度，將藥物溶液的顏色與規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)比色液相比較，或在規(guī)定的波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度，以檢查其顏色。

二、目測(cè)比色法

1.技術(shù)依據(jù)及原理

即將供試品溶液與各色調(diào)標(biāo)準(zhǔn)比色液進(jìn)行比較，以判定結(jié)果。

2.注意事項(xiàng)

所用納氏比色管均應(yīng)潔凈、干燥，洗滌時(shí)不能用刷子，應(yīng)用鉻酸洗液浸泡，然后沖洗，避免表面粗糙。

檢查時(shí)光線應(yīng)明亮。

如果供試品管中的顏色與對(duì)照管中的溶液顏色接近時(shí)，應(yīng)將比色管互換位置后再行觀察。

3.材料、儀器、試劑的準(zhǔn)備及基本要求

（1）納氏比色管用25ml納氏比色管并具有10ml刻度標(biāo)線，要求玻璃質(zhì)量較好，色澤、刻度標(biāo)線一致。

（2）白色背景要求不反光，一般用白紙或白布。

（3）重鉻酸鉀用基準(zhǔn)試劑，硫酸銅及氯化鈷均為分析純?cè)噭?/p>

（4）比色用重鉻酸鉀溶液。取重鉻酸鉀，研細(xì)后，在120℃干燥至恒重，精密稱取0.400g，置500ml量瓶中，加適量水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。每1ml溶液含0.800mg的重鉻酸鉀。

（5）比色用硫酸銅溶液。取硫酸銅約32.5g，加適量的鹽酸溶液（1→40），使溶解成500ml，精密量取10ml，置碘瓶中，加水50ml、醋酸4ml與碘化鉀2g，用硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液2ml，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失。每1ml的硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于24.97mgCUSO₄·5H₂O，根據(jù)上述測(cè)定結(jié)果，在剩余的原溶液中加適量的鹽酸溶液（1→40），使每1ml溶液中含62.4mg的CUSO₄·5H₂O，即得。

（6）比色用氯化鈷溶液。取氯化鈷約32.5g，加適量的鹽酸溶液（1→40），使溶解成500ml，精密量取2ml，置錐形瓶中，加水200ml，搖勻，加氨試液至溶液由淺紅色轉(zhuǎn)變至綠色后，加醋酸—醋酸鈉緩沖溶液（pH6.0）10ml，加熱至60℃，再加二甲酚橙指示液5滴，用乙二胺四醋酸二鈉滴定液（0.05mol/L）滴定至溶液顯黃色。每1ml乙二胺四醋酸二鈉滴定液（0.05mol/L）相當(dāng)于11.90mg的COCl₂·6H₂O，根據(jù)上述測(cè)定結(jié)果，在剩余的原溶液中加適量的鹽酸溶液（1→40），使每1ml溶液中含59.5mg的COCl₂·6H₂O，即得。

（7）各種色調(diào)標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備，按下表量取比色用重鉻酸鉀溶液、比色用硫酸銅溶液、比色用氯化鈷溶液與水，搖勻，即得。

表3-1　比色標(biāo)準(zhǔn)貯備液配制成分表

（8）各種色調(diào)色號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液的制備。按下表量取各該色調(diào)標(biāo)準(zhǔn)貯備液與水，搖勻，即得。

表3-2　標(biāo)準(zhǔn)比色液色調(diào)色號(hào)配制表

4.檢驗(yàn)步驟

除另有規(guī)定外，取各該藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解，置于25ml的鈉氏比色管中，加水稀釋至10ml。另取規(guī)定色調(diào)和色號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)比色液10ml，置另一鈉氏比色管中，兩管同置白色背景上，自上向下透視；或同置白色背景前，平視觀察；比較時(shí)可在自然光下進(jìn)行，以漫射光為光源，供試品管呈現(xiàn)的顏色不能比對(duì)照管深。

5.記錄與計(jì)算

應(yīng)記錄試驗(yàn)日期、供試品溶液的制備方法、標(biāo)準(zhǔn)比色液的色調(diào)色號(hào)，比較結(jié)果。

6.結(jié)果判定

供試品溶液如顯色，與規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)比色液比較，顏色相似或更淺，即判為符合規(guī)定；如更深，則判不符合規(guī)定。

三、分光光度法

1.技術(shù)依據(jù)及原理

分光光度法是通過(guò)被測(cè)物質(zhì)在紫外光區(qū)或可見光區(qū)的特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度定性或定量分析被測(cè)物質(zhì)的一種方法，主要用于藥品的鑒別、檢查和含量測(cè)定。

2.注意事項(xiàng)

濾過(guò)是指在規(guī)定“濾過(guò)”而無(wú)進(jìn)一步說(shuō)明時(shí)，使液體通過(guò)適當(dāng)?shù)臑V紙或相應(yīng)的裝置過(guò)濾，直至濾液澄清。

3.儀器

分光光度計(jì)。

4.檢驗(yàn)步驟

除另有規(guī)定外，如供試品為原料藥，稱取該藥品規(guī)定量的細(xì)粉，加水溶解使成10ml（或加水溶解使成規(guī)定量的體積），必要時(shí)濾過(guò)，濾液照分光光度法于規(guī)定波長(zhǎng)測(cè)定吸收度。

如供試品為片劑，取該片劑，研細(xì)稱取相當(dāng)于該藥品規(guī)定量的細(xì)粉，加水溶解使其成規(guī)定量的體積，振搖或用超聲波處理使溶解，濾過(guò)，取濾液照分光光度法于規(guī)定波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度。

如供試品為注射液或液體制劑，量取該藥品適量，加水或注射劑所用的溶劑稀釋成規(guī)定的濃度（供試品的濃度與規(guī)定相同時(shí)，可直接測(cè)定），照分光光度法，以水或以注射劑所用的溶劑為空白，于規(guī)定波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度。

5.記錄與計(jì)算

應(yīng)記錄試驗(yàn)日期、儀器型號(hào)與測(cè)定波長(zhǎng)、供試液的制備方法、測(cè)得的吸收度。

6.結(jié)果判定

按規(guī)定溶劑與濃度配制成的供試液進(jìn)行測(cè)定，如吸收度小于或等于規(guī)定值，判為符合規(guī)定；大于規(guī)定值時(shí)，則判為不符合規(guī)定。