四、實驗室診斷

1．病原分離鑒定

（1）病毒的分離鑒定。以無菌方法取患病動物的肝、脾、腎等內(nèi)臟器官，剪碎、研磨或搗碎，用Hank’s液或生理鹽水或p H7．2PRS液制成1∶10的勻漿，加入青霉素和鏈霉素，每毫升含量為800～1 000 IU（或μg），凍融3次，離心后取上清液，使其通過細菌濾過除菌，取上濾液接種于敏感細胞或敏感動物，如果細胞出現(xiàn)細胞病變效應(yīng)或動物出現(xiàn)與自然發(fā)病時間相同的癥狀時即可證明病毒分離成功。要鑒定為何種病毒，需用電鏡觀察和特種試驗，鑒定其核酸類型和生物學(xué)特性，對常見病毒最好用血清學(xué)實驗進行快速鑒定。

（2）病原菌的分離鑒定將瀕死動物在無菌環(huán)境下用無菌水洗凈并用紫外線照射，徹底清除體表雜菌后，以無菌方法從病灶深層的器官或組織內(nèi)部取樣接種到適宜的培養(yǎng)基，經(jīng)28～30℃培養(yǎng)24～48h，取單個菌落純化后用于致病性試驗和細菌鑒定試驗。通過致病性試驗，接種動物如果出現(xiàn)與自然發(fā)病相似的癥狀，并且從人工感染發(fā)病的動物體上分離得到與接種菌相同的菌種，即可驗證此菌種為該病的病原菌。再根據(jù)細菌形態(tài)特征和生理生化特性或血清學(xué)實驗，對其進行鑒定。

2．免疫學(xué)技術(shù)檢測

如血清中和試驗、免疫熒光、酶聯(lián)免疫檢測等技術(shù)可供選用。

3．分子生物學(xué)診斷

（1）核酸探針檢測。目前已有IHHNY、HPV等病毒的核酸探針雜交技術(shù)檢測法可供檢測。

（2）PCR儀檢測。PCR儀檢測技術(shù)已被世界動物衛(wèi)生組織推薦為對蝦病毒病的診斷方法之一，對蝦的白斑綜合癥等病毒性疾病以及其他已建立了PCR診斷技術(shù)的水生動物的疾病可用此方法進行診斷。