一、目的要求

利用已掌握的植物病原菌接種發(fā)病方法，測定病原菌的致病力分化，明確植物病原菌通常存在致病力差異或分化現(xiàn)象。

二、材料和用具

（一）實(shí)驗材料

同一品種的玉米幼苗，4~6葉齡；5個不同地域來源的玉米小斑病菌（Bipolaris maydis）菌株。

（二）實(shí)驗用具

培養(yǎng)皿、玻璃棒、顯微鏡、標(biāo)簽紙、簽字筆、計數(shù)器、噴壺、若干三角瓶（裝有滅菌水）等。

三、內(nèi)容和方法

（一）實(shí)驗原理

多數(shù)情況下，病原菌是一個復(fù)雜多變的群體，它不完全是均質(zhì)的，其種群結(jié)構(gòu)具有可變性。 不同地理來源的玉米小斑病菌可能存在基因水平的差異，進(jìn)而對同一品種寄主具有強(qiáng)弱分明的致病力差異。

（二）實(shí)驗方法

1.孢子懸浮液制備

將培養(yǎng)好的玉米小斑病菌從培養(yǎng)基表面洗脫下來，進(jìn)行鏡檢，稀釋至濃度為1×106個/m L。

2.接種

將制備好的孢子懸浮液裝入噴壺里，均勻地噴灑在玉米葉片表面，不同的小斑病菌寫上標(biāo)簽，注明病菌標(biāo)號、接種時間等。

3.觀察發(fā)病情況

接種后，將各處理玉米幼苗罩于大塑料袋中，恒溫保濕，36~48h后觀察并記錄玉米苗的發(fā)病情況，得出哪些地域來源的小斑病菌致病力較強(qiáng)，哪些較弱。

（三）注意事項

1.接種時，孢子濃度要適宜，濃度太高發(fā)病迅速，短時間內(nèi)都發(fā)病比較嚴(yán)重，可能無法判斷玉米幼苗的感病程度；濃度太低，可能接種后不發(fā)病，也會產(chǎn)生很大的誤差。

2.剛接種病原菌時，需要保濕培養(yǎng)一段時間，保持足夠的溫度和濕度更有利于病原菌的侵染致病。

四、實(shí)驗學(xué)時

6學(xué)時。

五、作業(yè)與思考題

1.每人提交實(shí)驗報告1份，分析討論病原菌的致病性。

2.比較病原菌生理分化、致病力差異兩組概念的異同。