常用儀器的基本使用方法和注意事項(xiàng)_基因探秘

8.3.1　電子天平

電子天平屬于精密、貴重儀器，用于稱量試劑的質(zhì)量。應(yīng)置于室內(nèi)干燥的平臺(tái)或工作臺(tái)上，并處于水平狀態(tài)。在使用時(shí)應(yīng)注意：

（1）使用天平前應(yīng)仔細(xì)閱讀使用說(shuō)明書，熟悉天平的主要構(gòu)件和操作面板，并根據(jù)所稱量物品的質(zhì)量和精度要求選擇適當(dāng)?shù)碾娮犹炱?。?shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的分析天平量程是200 g（精度0.001 g），120 g（精度0.0001 g）。使用時(shí)，所稱質(zhì)量（使用玻璃容器稱取時(shí)，應(yīng)包括容器質(zhì)量在內(nèi)）嚴(yán)禁超過(guò)量程，否則有可能損壞天平！

（2）天平使用前需要調(diào)水平，調(diào)節(jié)方式為：轉(zhuǎn)動(dòng)兩個(gè)前支架直到氣泡位于正中。

（3）對(duì)稱量來(lái)說(shuō)，只需使用電源開關(guān)鍵和去皮（Tare）鍵外，一般不要隨意按動(dòng)其他鍵。

（4）稱量固體試劑時(shí)，應(yīng)選用合適大小的稱量紙，去皮（Tare）后再用藥匙取適量試劑（寧少勿多?。┹p輕撒在稱量紙上（切不可用力過(guò)猛，更不能用試劑瓶直接傾倒！），操作時(shí)應(yīng)小心，避免藥品撒到儀器或桌面上（可以把稱量紙邊緣折成盤狀）。在臨近稱量值時(shí)，要輕輕抖落，以免多加。

（5）在稱量強(qiáng)吸水性物質(zhì)、腐蝕性物質(zhì)（如三氯乙酸、氫氧化鈉固體）時(shí)，不能使用稱量紙，而要用玻璃器皿（如錐形瓶、培養(yǎng)皿、稱量瓶等）。此時(shí)，應(yīng)注意包括容器在內(nèi)的總質(zhì)量不得超過(guò)天平的量程。還應(yīng)注意：稱量過(guò)程要盡可能快。防止試劑吸水造成的稱量誤差。

（6）稱量液態(tài)物質(zhì)時(shí)，要用玻璃器皿（如錐形瓶、培養(yǎng)皿、稱量瓶等）。要用滴管或移液槍將所稱取的液體加入稱量容器，嚴(yán)禁用試劑瓶直接傾倒。此時(shí)，應(yīng)注意包括容器在內(nèi)的總質(zhì)量不得超過(guò)天平的量程。

（7）依次稱取多種試劑時(shí)，應(yīng)稱量一種，打開一瓶，并在稱量后立即蓋上瓶蓋，然后再稱取另一種試劑。切忌同時(shí)打開多個(gè)試劑瓶，用后將瓶蓋“張冠李戴”。

（8）天平使用完畢后，要盡快清理干凈。清理時(shí)，應(yīng)用毛刷輕輕刷除遺留的藥品粉末，以防腐蝕。離開時(shí)關(guān)閉電源，拉上玻璃拉門。

8.3.2　移液槍（微量移液器）

微量移液器是一種在一定容量范圍內(nèi)可隨意調(diào)節(jié)的精密取液裝置（俗稱移液槍），基本原理是依靠裝置內(nèi)由調(diào)節(jié)輪控制螺桿上下移動(dòng)，推動(dòng)按鈕帶動(dòng)推動(dòng)桿使活塞向下移動(dòng)，排除活塞腔內(nèi)的氣體。松手后，活塞在復(fù)位彈簧的作用下恢復(fù)原位，從而完成一次吸液過(guò)程。移液槍屬于精密儀器，應(yīng)嚴(yán)格按照要求小心使用和放置，嚴(yán)禁猛烈碰撞或摔擊等。在使用時(shí)，也要注意正確吸液、排液和放置，以做到準(zhǔn)確吸量和不損壞移液槍。

（1）實(shí)驗(yàn)室配有1000 μL、200 μL、20 μL、10 μL和2.5 μL五個(gè)量程（即最大取樣體積）的常用移液槍（如圖8-1所示），使用前應(yīng)注意查看槍的量程值（如圖8-2所示），根據(jù)需要量取的體積選用適當(dāng)?shù)囊埔簶?。并裝配相應(yīng)大小的槍頭（吸液嘴）（如圖8-3所示）。對(duì)單道移液器裝配槍頭時(shí)，應(yīng)將移液端垂直插入吸頭，左右微微轉(zhuǎn)動(dòng)，上緊即可（如圖8-4所示）；對(duì)多道移液器裝配槍頭時(shí)，應(yīng)將移液器的第一道對(duì)準(zhǔn)第一個(gè)吸頭，傾斜插入，前后稍許搖動(dòng)上緊，吸頭插入后略超過(guò)O形環(huán)即可，并可以看到連接部分形成清晰的密封圈。嚴(yán)禁用移液器反復(fù)撞擊吸頭來(lái)上緊槍頭，這樣會(huì)導(dǎo)致移液器部件因強(qiáng)烈撞擊而松散，嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致調(diào)節(jié)刻度的旋鈕卡 住。

圖8-1　實(shí)驗(yàn)室使用的不同量程移液槍

圖8-2　移液槍的結(jié)構(gòu)

圖8-3　不同量程移液槍適配的槍頭

圖8-4　移液器端正確插入吸頭

（2）使用時(shí)，移液前，應(yīng)使移液器、槍頭和液體處于相同溫度（如滅菌后的槍頭需冷卻后使用）。還應(yīng)檢查移液槍是否有漏液現(xiàn)象。檢查方法是：吸液后豎直停留1～3秒，觀察吸頭內(nèi)液面是否下降。漏液的原因大致有：①槍頭不匹配，應(yīng)更換槍頭；②彈簧活塞不正常，應(yīng)交教師處理；③如果是易揮發(fā)性液體（許多有機(jī)溶劑都如此），則可能是飽和蒸汽壓的問(wèn)題。可以先吸放幾次液體，然后再移 液。

（3）吸量前，應(yīng)首先轉(zhuǎn)動(dòng)調(diào)節(jié)刻度旋鈕，調(diào)節(jié)顯示刻度至所需吸量體積。調(diào)節(jié)時(shí)，必須注意：①嚴(yán)禁單次取樣超過(guò)儀器量程（使顯示取樣體積超出量程），否則會(huì)損壞移液槍；②從大體積調(diào)節(jié)到小體積時(shí)，逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)刻度即可；③從小體積調(diào)節(jié)至大體積時(shí)，可先順時(shí)針調(diào)至超過(guò)設(shè)定體積的刻度，再回調(diào)至設(shè)定體積，這樣可以排出多余空氣，保證最佳的精確度（如圖8-5所示）。

圖8-5　轉(zhuǎn)動(dòng)調(diào)節(jié)刻度旋鈕

（4）吸量時(shí)，應(yīng)右手持槍，拇指位于移液槍吸/排液按鈕處，其余四指握住移液槍，注意槍的方向（如圖8-6所示）。吸取液體時(shí)，移液器應(yīng)保持豎直狀態(tài)。一般采取“前進(jìn)移液法”：用拇指將按鈕按下至一擋，然后將槍頭插入液面下2～3mm，緩慢松開按鈕回原點(diǎn)以吸取液體，完成吸液，否則液體進(jìn)入吸頭過(guò)快會(huì)導(dǎo)致液體倒吸入移液器內(nèi)部，使吸入體積減少，還有可能損壞儀器。排液時(shí)，將槍頭對(duì)準(zhǔn)所用容器，貼壁并保持一定角度，將按鈕按至第一停點(diǎn)，稍停1秒后繼續(xù)按按鈕至二擋，將剩余液體全部壓出，完成排液。然后緩慢松開按鈕。在用于轉(zhuǎn)移高黏性液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體時(shí)，還可以采用“反向移液法”。就是先吸入多于設(shè)置量程的液體，轉(zhuǎn)移液體時(shí)不用吹出殘余的液體。先按下按鈕至二擋，慢慢松開按鈕至原點(diǎn)。接著將按鈕按至第一停點(diǎn)排出設(shè)置好量程的液體，繼續(xù)保持按住按鈕位于一擋（千萬(wàn)別再往下按），取下有殘留液體的槍頭，棄之。無(wú)論采用哪種方法，在吸液和排液時(shí)，均要保持移液槍垂直，并慢吸慢放。在吸液之前，可以先吸放幾次液體以潤(rùn)濕吸液嘴（尤其是要吸取黏稠或密度與水不同的液體時(shí)）。

圖8-6　移液槍吸/排液按鈕

（5）移液槍使用后，應(yīng)規(guī)范放置。即：將移液器量程調(diào)至最大值，且將移液器垂直放置在移液器架上，但要小心別掉下來(lái)。當(dāng)移液器吸嘴中有液體時(shí)切勿將移液器水平或倒置放置，以免液體流入活塞室腐蝕移液器活塞彈簧。

移液槍使用中常見錯(cuò)誤與規(guī)范操作的比較如表8-1所示。

表8-1　移液槍使用中常見錯(cuò)誤與規(guī)范操作的比較

8.3.3　離心機(jī)

離心機(jī)是用于分離的必備儀器。屬于精密儀器。儀器應(yīng)置于室內(nèi)干燥的平臺(tái)或工作臺(tái)上，并處于水平狀態(tài)，在電源線路中安裝插座和漏電保護(hù)開關(guān)，并安裝接地。使用時(shí)必須按照操作規(guī)程進(jìn)行，否者極易損壞儀器，同時(shí)，還會(huì)造成人身傷害。

（1）選擇合適轉(zhuǎn)子 離心機(jī)按照轉(zhuǎn)速可分為低速（最高轉(zhuǎn)速4000 rpm）、高速（最高轉(zhuǎn)速12000～20000 rpm）和超速離心機(jī)（轉(zhuǎn)速30000 rpm以上）。離心機(jī)的主要部件包括電機(jī)、主軸、轉(zhuǎn)子、內(nèi)蓋和外蓋。高速和超速離心機(jī)在使用時(shí)需要選擇合適的轉(zhuǎn)子。轉(zhuǎn)子按照離心時(shí)的運(yùn)行角度可分為角度頭、水平轉(zhuǎn)子等；按照裝載容器可分為提籃式、單管式和排管式。單管式往往采用角度頭轉(zhuǎn)子，提籃式和排管式往往采用水平轉(zhuǎn)子。在使用時(shí)，如果使用離心管，一般應(yīng)選用單管式轉(zhuǎn)子。在選擇轉(zhuǎn)子時(shí)，應(yīng)特別注意轉(zhuǎn)子允許的最大離心力（g）、最大轉(zhuǎn)速等指標(biāo)。

（2）檢查儀器和離心管（或其他容器） 在離心開始前，必須認(rèn)真檢查儀器和離心管（或其他容器）是否正常。檢查內(nèi)容包括：儀器部件是否齊全、電路部分是否正常工作、顯示面板是否正常顯示、轉(zhuǎn)子和倉(cāng)體是否干燥、離心管是否完整無(wú)裂痕、不泄漏等。如果電路不正常，可能造成儀器損壞和人員傷害，后果非常嚴(yán)重！如果離心管或其他容器在離心過(guò)程中破裂，可能造成儀器損壞和人員傷害，后果非常嚴(yán)重！

（3）離心管的平衡 在使用時(shí)，必須在托盤天平上認(rèn)真對(duì)離心管進(jìn)行平衡，不得用目測(cè)液體多少代替平衡。如果離心機(jī)配有套管，應(yīng)該將套管和裝有待離心溶液的離心管一起平衡，平衡后不得隨意更換套管。如確有必要更換套管或離心管，必須重新平衡。平衡后的離心管應(yīng)注意對(duì)稱裝入離心機(jī)。如果離心管不平衡，可能造成儀器損壞和人員傷害，后果非常嚴(yán)重！

（4）安裝內(nèi)蓋 高速和超速離心機(jī)一般都配有內(nèi)蓋。全部離心管裝入后，必須在轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)軸上安裝內(nèi)蓋并旋緊。旋緊時(shí)，不能過(guò)度用力，或螺口不對(duì)齊，否則可能會(huì)損傷轉(zhuǎn)子和機(jī)蓋。如果不安裝內(nèi)蓋或沒有旋緊內(nèi)蓋，可能造成儀器損壞和人員傷害，后果非常嚴(yán)重！

（5）蓋上外蓋 中高端的高速離心機(jī)的外蓋一般帶有自鎖裝置。在不通電的情況下是打不開的。低端的臺(tái)式離心機(jī)一般帶有手動(dòng)鎖，需要按動(dòng)按鈕打開。但鎖上時(shí)，只要將外蓋按下即可，不要過(guò)分用力。

（6）開機(jī) 離心機(jī)接通電源之前，必須將離心機(jī)的轉(zhuǎn)速設(shè)置為0。開機(jī)后，按照說(shuō)明書的要求設(shè)定轉(zhuǎn)速、離心時(shí)間、溫度要求等參數(shù)，然后逐漸升高轉(zhuǎn)速，不可直接將轉(zhuǎn)速提高到所需轉(zhuǎn)速（不同離心機(jī)、不同轉(zhuǎn)速、不同轉(zhuǎn)子的提速時(shí)間不同）。對(duì)于全自動(dòng)離心機(jī)，則不需要手動(dòng)調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速。

（7）離心結(jié)束 離心結(jié)束后必須等離心機(jī)完全停止轉(zhuǎn)動(dòng)后方可打開外蓋（全自動(dòng)離心機(jī)自帶安全設(shè)置，在停止轉(zhuǎn)動(dòng)前無(wú)法打開外蓋）。然后打開內(nèi)蓋，緩緩取出離心管（切忌振蕩?。?。

（8）關(guān)機(jī) 對(duì)低溫離心機(jī)，如果其他人員在短時(shí)間內(nèi)還需要使用離心機(jī)，不必關(guān)閉電源，以防止制冷設(shè)備反復(fù)啟動(dòng)。全部人員使用完畢后，應(yīng)關(guān)閉離心機(jī)。關(guān)機(jī)前，必須將轉(zhuǎn)速設(shè)置為0（全自動(dòng)離心機(jī)可不做此項(xiàng)設(shè)置）。必須認(rèn)真清理離心機(jī)。如有腐蝕性化學(xué)品（強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、汞離子溶液、銅和其他金屬離子、氯化物、濃鹽和苯酚等）污染了艙體、轉(zhuǎn)子、套管等部件時(shí)，必須在教師的指導(dǎo)下認(rèn)真清理。如果在離心時(shí)使用了制冷程序，不宜馬上關(guān)閉離心機(jī)蓋，必須等其干燥之后再關(guān)閉，以免產(chǎn)生冷凝水銹蝕儀器。

（9）其他注意事項(xiàng)

最大轉(zhuǎn)速下，離心的物質(zhì)密度不能超過(guò)1.2 g/mL。

使用過(guò)有機(jī)溶劑（苯酚、氯仿等）的離心管應(yīng)注意其是否老化。

在裝轉(zhuǎn)子前，清潔馬達(dá)選軸和轉(zhuǎn)子插孔，對(duì)轉(zhuǎn)子密封圈、馬達(dá)轉(zhuǎn)軸經(jīng)常使用潤(rùn)滑油。

8.3.4　超凈工作臺(tái)

超凈工作臺(tái)是無(wú)菌操作的專用設(shè)備。禁止挪作他用。

（1）按鍵ON/OFF為儀器總開關(guān)，一般位于儀器右側(cè)下部。使用前30分鐘，按下按鍵使其在“ON”的位置，然后打開操作面板上的“照明/殺菌”開關(guān)和風(fēng)機(jī)組開關(guān)，同時(shí)開啟紫外燈和風(fēng)機(jī)組，30分鐘后關(guān)閉紫外燈。注意：紫外燈開啟時(shí)，應(yīng)遠(yuǎn)離超凈工作臺(tái)，切勿進(jìn)行操作或直視紫外燈，否則會(huì)對(duì)皮膚和眼睛造成嚴(yán)重傷害！

（2）關(guān)閉紫外燈后，用75%酒精棉花擦拭，將紫外燈表面和工作臺(tái)內(nèi)表面擦干凈，保證其滅菌效率。但不能用酒精等有機(jī)溶劑擦拭有機(jī)玻璃擋 板。

（3）工作臺(tái)面上禁止存放不必要的物品，以保持工作區(qū)的潔凈氣流不受干擾。

（4）禁止在工作臺(tái)面上記錄書寫，工作時(shí)應(yīng)盡量避免做明顯擾動(dòng)氣流的動(dòng)作。

（5）當(dāng)需要調(diào)節(jié)風(fēng)機(jī)風(fēng)速時(shí)，用工作臺(tái)操作面板上的輕觸型開關(guān)進(jìn)行調(diào)節(jié)。風(fēng)機(jī)調(diào)速指示由屏幕數(shù)字顯示。

（5）使用完畢后應(yīng)及時(shí)按OFF關(guān)機(jī)，延長(zhǎng)過(guò)濾網(wǎng)使用壽命。還應(yīng)該在教師指導(dǎo)下定期清理過(guò)濾網(wǎng)，以保證滅菌效 率。

8.3.5　LDZX型立式壓力蒸汽滅菌器

壓力蒸汽滅菌器（如圖8-7所示）是對(duì)小工具、器皿、培養(yǎng)基濕熱滅菌的專用儀器，不可挪作他用。儀器應(yīng)置于室內(nèi)干燥的平臺(tái)或工作臺(tái)上，并處于水平狀態(tài)，在電源線路中安裝插座和漏電保護(hù)開關(guān)，并安裝接地。立式壓力蒸汽滅菌器屬于大功率用電器，必須使用單獨(dú)插座，不可使用拖線板。使用前應(yīng)認(rèn)真檢查滅菌器的電路是否正常、鍋蓋上的安全閥和放氣閥是否正常、下部的放水閥門等是否正常、鍋內(nèi)水位是否合適。水太少時(shí)，高壓鍋干燒，可能發(fā)生爆炸等嚴(yán)重后果。水太多時(shí)，可能引起倒灌。

圖8-7　LDZX型立式壓力蒸汽滅菌器外觀

（1）開蓋　開蓋前必須確認(rèn)壓力表指針歸零，滅菌器內(nèi)無(wú)壓力。開蓋時(shí)，逆時(shí)針方向?qū)⑺膫€(gè)緊固螺桿旋松放下，提起蓋把手，使鍋蓋向上翻開，開啟鍋蓋。

（2）通電　將控制面板上的電源開關(guān)按至ON處，控制面板上的電源燈（紅燈）亮，顯示電源已正常輸入本機(jī)。水位燈滅，滅菌器內(nèi)屬于斷水狀態(tài)，壓力表指針歸向零位。

（3）加水　將蒸餾水直接注入滅菌器內(nèi)，同時(shí)觀察控制面板上的水位燈，水位燈滅時(shí)，應(yīng)繼續(xù)添加，至水位燈亮（每次使用前均需補(bǔ)充上述水位）。當(dāng)加水過(guò)多溢至內(nèi)膽中時(shí)，應(yīng)開啟下排水閥放掉內(nèi)膽中多余的水。本型號(hào)需水量約為8 L。

（4）堆放　將包扎好的待滅菌物品，依次堆放在滅菌筐內(nèi)。堆放時(shí)不能太滿，還必須注意各包之間留有空隙，并留出安全閥和排氣孔空隙，嚴(yán)禁堵塞安全閥和排氣閥出氣孔，否則可能造成安全閥氣孔堵塞，造成鍋體爆炸事故。如對(duì)液體（如培養(yǎng)基、緩沖液等）進(jìn)行滅菌時(shí)，必須注意液體體積不得超過(guò)容器的一半；如容器有密封功能（如磨口瓶、具有塑膠墊圈的離心管等）時(shí)，應(yīng)注意蓋子與瓶口或管口之間必須留出間隙，不可封死。否則，可能會(huì)造成容器炸裂！

（5）密封　將鍋蓋的缺口對(duì)準(zhǔn)四個(gè)螺桿放下，將螺桿全部嵌入鍋蓋缺口，順時(shí)針方向?qū)⑺膫€(gè)緊固螺桿擰緊，擰緊時(shí)對(duì)角同時(shí)進(jìn)行，加力使之充分密合。

（6）溫度與時(shí)間設(shè)定　將溫度旋鈕向左轉(zhuǎn)調(diào)至所需滅菌溫度位置即可，溫度控制器采用壓控開關(guān)，精確溫度選擇應(yīng)對(duì)照壓力表指針位置進(jìn)行溫度旋鈕選位矯正。本滅菌器溫度選擇范圍為116 ℃～127 ℃；將定時(shí)器旋鈕向右轉(zhuǎn)調(diào)至所需的滅菌時(shí)間位置即可，定時(shí)器采用倒計(jì)時(shí)方式，當(dāng)鍋內(nèi)達(dá)到所選擇的滅菌溫度后，定時(shí)器才開始工作，計(jì)算所需要的滅菌時(shí)間。本滅菌器時(shí)間的選擇范圍為0～60分鐘（如圖8-8所示）。

圖8-8　LDZX型立式壓力蒸汽滅菌器控制面板

（7）滅菌　溫度時(shí)間設(shè)定完畢，控制面板上的工作燈亮，滅菌器正常加熱升溫（升壓）。當(dāng)滅菌室內(nèi)達(dá)到設(shè)定溫度時(shí)，工作燈會(huì)間斷，進(jìn)入滅菌倒計(jì)時(shí)。注意：如在滅菌過(guò)程中安全閥跳起應(yīng)立即關(guān)閉電源！

（8）關(guān)機(jī)　滅菌完成，自動(dòng)關(guān)閉加熱系統(tǒng)，此時(shí)，應(yīng)將電源開關(guān)按至OFF；關(guān)閉電源。注意：嚴(yán)禁在關(guān)閉電源后馬上打開放氣閥或開啟鍋蓋！

（9）啟蓋　壓力表指針歸零后，先開啟安全閥排放滅菌器內(nèi)余氣，然后沿逆時(shí)針方向?qū)⑺膫€(gè)緊固螺桿旋松放下，提起蓋把手，使鍋蓋向上翻開。注意：必須待壓力表歸零，并開啟安全閥排放滅菌器內(nèi)余氣后方可開蓋，否則開蓋時(shí)蒸汽噴出可能會(huì)造成嚴(yán)重燙傷！

（10）取出滅菌物品　開蓋后，依次取出鍋內(nèi)物品，并有序擺放。不得長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)放在鍋內(nèi)。注意：此時(shí)鍋內(nèi)溫度仍然較高。取物時(shí)應(yīng)佩戴棉布手套，注意防護(hù)，避免燙傷！切忌佩戴乳膠手套或塑料膜手套拿取物品。

（11）其他注意事項(xiàng)

●使用玻璃容器放置滅菌液體時(shí)，應(yīng)選用耐熱的玻璃容器。并用棉塞、錫箔紙、牛皮紙等封閉瓶口，切勿使用未打孔的橡膠或軟木塞。

●切勿將不同類型、不同滅菌要求的物品（如敷料和液體等）一起滅菌。

●對(duì)塑料管等物品進(jìn)行滅菌前，應(yīng)確認(rèn)該種塑料可以進(jìn)行高溫高壓滅菌，否則會(huì)造成塑料器具嚴(yán)重變形，無(wú)法使用。

●若壓力表指針已回復(fù)零位，而蓋不易開啟時(shí)，可將放氣閥置于放氣位置一段時(shí)間，使外界空氣進(jìn)入滅菌器內(nèi)，真空消除后，蓋即可開啟。

●滅菌器必須使用醫(yī)用蒸餾水。

●滅菌器清洗應(yīng)一月一次，清洗時(shí)，將內(nèi)膽取下，用毛刷將附在內(nèi)壁上的水垢刷去，再用干凈布擦拭干凈即可。平時(shí)應(yīng)使滅菌器保持清潔和干燥。如發(fā)現(xiàn)橡膠圈使用日久老化，應(yīng)立即更換。如發(fā)現(xiàn)儀器有任何異常（如壓力指示不正確或不能回復(fù)零位），應(yīng)立即停止使用，馬上檢修。

●如果有的物品滅菌后需要迅速干燥，須打開安全閥或?qū)⑴艢馀潘y向左旋至“開”位置，讓滅菌器內(nèi)的蒸汽迅速排出，使物品殘留水蒸氣快速揮發(fā)。注意：滅菌液體嚴(yán)禁使用此方法！否則可能造成爆炸等嚴(yán)重后果；放氣時(shí)，操作者必須注意防護(hù)，不能使自己處于氣體噴出的位置，否則可能造成燙傷！

●本儀器是全自動(dòng)控制的，但也必須隨時(shí)注意儀器的運(yùn)行情況，不得在滅菌過(guò)程中擅自離開。

8.3.6　干燥箱

干燥箱是對(duì)物品進(jìn)行干燥處理的專用設(shè)備，分為真空干燥箱和干熱干燥箱。注意：干熱干燥箱與生化培養(yǎng)箱外觀相似，但可控溫度范圍相差很大，最高溫度可達(dá)200 ℃，切忌誤用！否則可能引發(fā)火災(zāi)！

（1）在使用前，必須確定待干燥的物品可以使用干燥箱處理。一般來(lái)說(shuō)，只有金屬類、玻璃器皿才能使用干燥箱。注意：嚴(yán)禁將紙張、棉制品、塑料制品、裝有液體的容器等裝入干燥箱處理，否則可能引發(fā)火災(zāi)！

（2）使用時(shí)，接通電源后即可開啟加熱開關(guān)。將干燥箱溫度設(shè)定撥盤撥至所需的工作溫度值即可。對(duì)于數(shù)字化控制的干燥箱，則將溫度“設(shè)定—測(cè)量”開關(guān)置于“設(shè)定”，調(diào)節(jié)溫度設(shè)定旋鈕至所需工作溫度后，將“設(shè)定—測(cè)量”開關(guān)置于“測(cè)量”，此時(shí)箱內(nèi)開始升溫，綠燈亮起。注意：即使是自動(dòng)控制的干燥箱，也必須隨時(shí)注意儀器的運(yùn)行情況，不得在運(yùn)行過(guò)程中擅自離開。以免儀器失靈造成溫度失控，引發(fā)火災(zāi)。

（3）使用完畢后，拿取物品時(shí)應(yīng)佩戴棉質(zhì)手套，切忌佩戴乳膠手套或塑料膜手套拿取物品。以免燙傷。

8.3.7　生化培養(yǎng)箱

生化培養(yǎng)箱是進(jìn)行微生物等進(jìn)行恒溫培養(yǎng)的專用設(shè)備，分為水熱式、電熱式和干熱干燥箱。注意：生化培養(yǎng)箱與干熱干燥箱外觀相似，但可控溫度范圍相差很大，最高溫度不得超過(guò)65 ℃，切忌誤用！否則可能引發(fā)火災(zāi)！

（1）接通電源 打開電源開關(guān)，使開關(guān)處于“通”的位置，設(shè)備即進(jìn)入通電狀態(tài)。此時(shí)即可開始溫度和時(shí)間的設(shè)定操作。

（2）LRH-150生化培養(yǎng)箱的溫度與時(shí)間設(shè)置 按動(dòng)溫度/時(shí)間鍵可進(jìn)行溫度與時(shí)間切換。

●溫度設(shè)定：按一下溫度/時(shí)間鍵，儀表的溫度設(shè)定指示燈亮。按設(shè)定鍵進(jìn)入SV狀態(tài)，設(shè)定顯示窗三個(gè)數(shù)字中有一個(gè)數(shù)閃爍，再按移位鍵（＜）將閃爍數(shù)位移至需設(shè)定位，然后按∨或∧鍵即可改變溫度設(shè)定值至所需溫度（最小值0 ℃），最后按下設(shè)定鍵將設(shè)定值存入單片機(jī)，此時(shí)左顯示窗顯示測(cè)量溫度，右顯示窗口顯示設(shè)定溫 度。

●時(shí)間設(shè)定：按一下溫度/時(shí)間鍵，儀表的時(shí)間設(shè)定指示燈亮。按設(shè)定鍵進(jìn)入TV狀態(tài)，設(shè)定顯示窗三個(gè)數(shù)字中有一個(gè)數(shù)閃爍，再按移位鍵（＜）將閃爍數(shù)位移至需設(shè)定位，然后按∨或∧鍵即可改變時(shí)間設(shè)定值，直到所需時(shí)間（最小值1小時(shí)），最后按下設(shè)定鍵將設(shè)定值存入單片機(jī)，此時(shí)左顯示窗顯示測(cè)量時(shí)間，右顯示窗顯示設(shè)定時(shí)間。

●定時(shí)功能：儀器送電時(shí)，定時(shí)功能開始啟動(dòng)。定時(shí)結(jié)束后，輸出關(guān)閉。加熱器和制冷壓縮機(jī)停止工作，培養(yǎng)箱內(nèi)溫度將逐漸達(dá)到外界環(huán)境溫 度。

●狀態(tài)指示：設(shè)定完成后設(shè)備按設(shè)定好的參數(shù)運(yùn)行。當(dāng)測(cè)量溫度低于設(shè)定溫度時(shí)，設(shè)備進(jìn)入加熱狀態(tài)，加熱指示燈亮。反之，當(dāng)測(cè)量溫度高于設(shè)定溫度時(shí)，制冷指示燈亮，設(shè)備進(jìn)入制冷狀態(tài)。當(dāng)測(cè)量溫度高于設(shè)定溫度4 ℃時(shí)，報(bào)警指示燈亮，蜂鳴器也發(fā)出鳴叫 聲。

●參數(shù)修改：運(yùn)行中若要修改溫度、時(shí)間參數(shù)，再按程序1、2進(jìn)行修改。

●快速設(shè)定：在設(shè)定參數(shù)時(shí)，三個(gè)數(shù)字中有一個(gè)數(shù)閃爍，若按∧鍵則設(shè)定值末位數(shù)加1；若按此鍵不放開，約3秒鐘后，設(shè)定值連續(xù)加1；若按∨鍵，則設(shè)定值減1；若按住該鍵不松開，約3秒鐘后，設(shè)定值連續(xù)減1。

（3）培養(yǎng) 培養(yǎng)過(guò)程中，應(yīng)隨時(shí)保持箱門關(guān)閉，尤其是使用制冷功能時(shí)更應(yīng)如此。培養(yǎng)完畢后，應(yīng)將培養(yǎng)物及時(shí)取出，不得長(zhǎng)時(shí)間放置在培養(yǎng)箱內(nèi)，以免發(fā)生污染。

（4）生化培養(yǎng)箱使用與維護(hù)的其他注意事項(xiàng)

●培養(yǎng)箱在搬運(yùn)中，禁止倒置及大于45度的平放。

●使用中切勿頻繁改變?cè)O(shè)定值，以免壓縮機(jī)頻繁啟動(dòng)造成過(guò)載，影響設(shè)備使用壽命。

●箱內(nèi)不需照明時(shí)，應(yīng)將照明開關(guān)置于“關(guān)”位置，以免影響上層溫度，同時(shí)延長(zhǎng)燈管使用壽命。

●本機(jī)裝有二組保險(xiǎn)絲，運(yùn)行中若發(fā)生故障，請(qǐng)先切斷電源，檢查保險(xiǎn)絲是否完好，再檢查其他部位。

●為了保持設(shè)備的外觀，切勿用腐蝕溶液擦拭外表，箱內(nèi)可用干布擦拭，保持箱內(nèi)清潔。如果發(fā)現(xiàn)箱內(nèi)有污染，應(yīng)及時(shí)清除。但不能用腐蝕性較強(qiáng)的液體（如高濃度84消毒液）清潔。

●當(dāng)設(shè)備不用時(shí)，應(yīng)切斷電源，并保持箱內(nèi)干燥。

●為確保箱內(nèi)溫度均勻，應(yīng)經(jīng)常檢查箱內(nèi)軸流風(fēng)機(jī)是否正常運(yùn)行。實(shí)驗(yàn)時(shí)，箱內(nèi)物品不宜擺放太密且切勿阻擋風(fēng)機(jī)出風(fēng)口，以利于箱內(nèi)氣流循 環(huán)。

●切勿觸摸、碰撞箱內(nèi)感溫探頭，以免造成溫度失控。

●設(shè)備發(fā)生故障，應(yīng)請(qǐng)專業(yè)人員維修或與銷售聯(lián)系，用戶請(qǐng)勿任意拆修。

8.3.8　搖床（恒溫振蕩培養(yǎng)箱）

搖床是對(duì)微生物、細(xì)胞懸浮液等進(jìn)行恒溫振蕩培養(yǎng)的專用設(shè)備。禁止用于其他用途。應(yīng)置于室內(nèi)，并處于水平狀態(tài)，在電源線路中安裝插座和漏電保護(hù)開關(guān)，并安裝接地。

（1）使用前，應(yīng)檢查儀器的電路是否正常、轉(zhuǎn)速設(shè)置是否歸零、是否有異物留在箱體內(nèi)、固定培養(yǎng)瓶或試管的裝置是否完好等。

（2）在放入培養(yǎng)瓶或試管時(shí)，應(yīng)固定好，防止振蕩過(guò)程中脫落。注意：一旦試管或培養(yǎng)瓶脫落或儀器內(nèi)有異物，不但會(huì)造成振蕩培養(yǎng)失敗，而且容易卡住儀器的轉(zhuǎn)動(dòng)部分，導(dǎo)致電機(jī)燒毀，嚴(yán)重時(shí)會(huì)引發(fā)火災(zāi)！

（3）開機(jī)：按側(cè)面電源開關(guān)完成開機(jī)，運(yùn)行鍵指示燈亮開始運(yùn)行。

（4）溫度設(shè)置：按溫度圖標(biāo)，顯示在設(shè)定溫度和實(shí)際溫度之間切換。設(shè)定溫度時(shí)，按設(shè)置鍵（方塊圖標(biāo)），顯示0，用上下箭頭調(diào)到3，再按一次設(shè)置鍵顯示設(shè)置溫度，用上下箭頭調(diào)到合適值，按設(shè)置鍵確認(rèn)。

（5）轉(zhuǎn)速設(shè)置：按轉(zhuǎn)速圖標(biāo)，顯示在設(shè)定轉(zhuǎn)速和實(shí)際轉(zhuǎn)速之間切換。注意：開機(jī)前轉(zhuǎn)速應(yīng)置于“0”的位置。設(shè)定轉(zhuǎn)速時(shí)，按設(shè)置鍵，顯示0，用上下箭頭調(diào)至3，再按一次設(shè)置鍵，按轉(zhuǎn)速圖標(biāo)（環(huán)形箭頭），顯示原先所設(shè)值，按用上下箭頭調(diào)至合適值，按設(shè)置鍵確認(rèn)。

（6）定時(shí)設(shè)置：此項(xiàng)一般不用修改，默認(rèn)設(shè)為機(jī)器長(zhǎng)期運(yùn)行。

（7）模式設(shè)定：當(dāng)設(shè)定溫度與環(huán)境溫度之間的溫差不同時(shí)需要設(shè)定不同控溫模式，具體操作見說(shuō)明書。

（8）關(guān)機(jī)：按運(yùn)行鍵（太陽(yáng)圖標(biāo)）指示燈滅，按側(cè)面總開關(guān)完成關(guān)機(jī)。

（9）其他：搖床轉(zhuǎn)動(dòng)/暫停鍵為斜箭頭圖標(biāo)，用于放樣品時(shí)暫停搖動(dòng)（放好后勿忘恢復(fù)搖動(dòng)）。儀器側(cè)面有照明開關(guān)，方便觀察。如要使用其余功能先閱讀詳細(xì)說(shuō)明書。

8.3.9　水浴鍋和恒溫水浴槽

水浴鍋和恒溫水浴槽是進(jìn)行水浴保溫的專用儀器。應(yīng)置于室內(nèi)干燥的平臺(tái)或工作臺(tái)上，并處于水平狀態(tài)，在電源線路中安裝插座和漏電保護(hù)開關(guān)，并安裝接地。

A.恒溫水浴槽操作如下：

（1）將蒸餾水從工作室上部注入，切記：水位不得低于工作室內(nèi)的隔板。

（2）接通電源，打開電源開關(guān)，指示燈亮，表示電源工作正常。此時(shí)，儀表上排顯示工作室溫度，下排顯示設(shè)定溫度。

（3）溫度設(shè)置：按動(dòng)SET鍵，使上排顯示50，按上下設(shè)定所需溫度，再按SET保存設(shè)定值。

（4）保溫時(shí)間設(shè)置：按SET鍵10秒，出現(xiàn)第二菜單。下排設(shè)定時(shí)間分鐘，測(cè)量溫度達(dá)到設(shè)定的時(shí)間后，下排顯示熄滅輸出功能停止，如果要恢復(fù)設(shè)定控制時(shí)間應(yīng)先關(guān)機(jī)再通電開機(jī)。設(shè)定為0時(shí)儀表取消定時(shí)功能，連續(xù)輸 出。

（5）其他：儀表自整定功能，按下鍵5秒自整定結(jié)束后AT燈滅，得出一組能克服超溫的PID參數(shù)。在自整定過(guò)程中按下鍵5秒后AT燈滅，自整定停止，儀表按原來(lái)的PID參數(shù)進(jìn)行控制。

B.水浴鍋操作如下：

水浴鍋的設(shè)置較為簡(jiǎn)單。接通電源后，儀表顯示工作室溫度。將控制儀表旋鈕或撥碼開關(guān)調(diào)節(jié)到所需要的溫度，工作室內(nèi)開始加熱，控溫儀表上綠燈亮表示通電升溫，紅燈亮表示斷電保溫，紅綠燈交替變化表示進(jìn)入恒溫狀態(tài)，當(dāng)儀器恒溫30分鐘后儀表顯示和設(shè)定溫度基本一致，即可使用。

C.水浴鍋和恒溫水浴槽的操作均應(yīng)注意：

●本儀器外殼必須可靠接地，以防止漏電，保證安全使用。

●水溫達(dá)到所需溫度并恒定后，方可放入待保溫物品，開始計(jì)時(shí)。

●儀器應(yīng)放置在具有良好通風(fēng)條件的室內(nèi)，室內(nèi)相對(duì)濕度不大于85%，其周圍不要放置易燃易爆及腐蝕性物品。

●要經(jīng)常檢查工作室內(nèi)的水位，不能缺水，更不能無(wú)水干燒，以免損壞加熱管。注水不可將水流入或溢入電器控制箱內(nèi)以防發(fā)生危險(xiǎn)，不用時(shí)及時(shí)把水放掉，并將箱內(nèi)擦干凈，保持清潔。

●控制系統(tǒng)沒有專業(yè)設(shè)備和技術(shù)人員不能隨意調(diào)動(dòng)及拆卸機(jī)內(nèi)元器件，以免影響控溫精度，縮短使用壽命。

8.3.10　杭州博日BIOAIR GeneQ基因擴(kuò)增儀TC-24/H（B）

圖8-9　PCR儀外觀

圖8-10　PCR儀結(jié)構(gòu)示意圖

圖8-11　PCR儀鍵盤示意圖

圖8-12　PCR按鍵示意圖

PCR儀（如圖8-9，圖8-10，圖8-11，圖8-12所示）是用于DNA擴(kuò)增的專用儀器。應(yīng)置于室內(nèi)干燥的平臺(tái)或工作臺(tái)上，并處于水平狀態(tài)。禁止挪作他用。操作步驟如下：

（1）開機(jī)前檢查

在插上插頭將儀器通電以前，應(yīng)先確認(rèn)以下內(nèi)容：

●電源是否與儀器要求的電壓相符合；

●確認(rèn)電源線插頭已可靠插入電源插座中；

●電源線接地可靠。

（2）開機(jī)

●打開電源開關(guān)（將開關(guān)撥至“—”的位置），擴(kuò)增儀會(huì)發(fā)出“嘟”“嘟”兩聲，表明電源已接通。

●此時(shí)屏幕將顯示“Self testing……”，儀器將進(jìn)行自檢。自檢需要1～2分鐘，請(qǐng)耐心等候。若自檢沒有發(fā)現(xiàn)問(wèn)題屏幕將出現(xiàn)主界面（如圖8-13所示），以下就可以進(jìn)行PCR擴(kuò)展文件的編輯、查閱、修改和刪除等操作。

圖8-13　PCR儀開機(jī)后的主界面

（3）運(yùn)行PCR程序

●主界面（如圖8-13所示）左上方顯示的是熱蓋設(shè)置狀態(tài)。主界面中間顯示的是博日公司信息、軟件版本號(hào)、模塊類型、默認(rèn)程序、默認(rèn)使用者、控制模式和樣本量等信息。

●按“File”鍵進(jìn)入文件列表界面。

●按“System”鍵進(jìn)入系統(tǒng)參數(shù)設(shè)置界面。

●如果當(dāng)前默認(rèn)文件不帶有密碼，按“Run”進(jìn)入運(yùn)行模式或樣本容量輸入窗口；如果當(dāng)前默認(rèn)文件帶有密碼，按“Run”鍵彈出輸入密碼對(duì)話框。

在本界面中按數(shù)字鍵即可輸入密碼。按“Back”鍵返回主界面。按“Accept”鍵確認(rèn)密碼，進(jìn)入文件運(yùn)行界面或樣本容量輸入窗口。如果密碼輸入錯(cuò)誤，將彈出以下提示對(duì)話框：

如果當(dāng)前Controlmode為Block模式，按“Accept”鍵進(jìn)入文件運(yùn)行界面。如果當(dāng)前Controlmode為Tube模式，按“Accept”鍵彈出樣本容量輸入對(duì)話框。

在本界面中按字符鍵即可根據(jù)實(shí)際情況輸入樣本容量。在Tube模式控溫下，不同的樣本容量將有不同的過(guò)沖溫度及持續(xù)時(shí)間。

按“Back”鍵返回主界面。

按“Run”鍵進(jìn)入文件運(yùn)行界面。

（4）編輯PCR程序

在主界面中按“File”鍵進(jìn)入文件列表界面，如右圖文件列表中有3份文件，當(dāng)閃爍條在User欄閃爍時(shí)，可通過(guò)方向上下鍵選擇用戶，同時(shí)File Name欄會(huì)動(dòng)態(tài)顯示選定的用戶對(duì)應(yīng)的文件；通過(guò)右鍵切換至File Name，此時(shí)，閃爍條在File Name欄閃爍，通過(guò)上下鍵選擇對(duì)應(yīng)用戶的文件。

●按“New File”鍵可編輯一個(gè)新文件。

●按“Delete”鍵將提示“Do you want to delete the file? Please select‘F3’or‘F4’”，按提示信息選擇刪除（Delete）或（Back）。

●按“Back”鍵返回主界面。

●如果文件未設(shè)置密碼，按“Edit”鍵進(jìn)入文件編輯界面；如果文件設(shè)置有密碼，按“Edit”鍵彈出輸入密碼對(duì)話框。

在本界面按數(shù)字鍵直接輸入密碼，按“Back”鍵返回文件列表界面。按“Accept”鍵確認(rèn)密碼，進(jìn)入文件編輯界 面。

●如果文件沒有設(shè)置密碼，按“Run”鍵進(jìn)入文件運(yùn)行界面或樣本容量輸入界面；如果文件設(shè)置有密碼，按“Run”彈出輸入密碼對(duì)話框。在輸入密碼對(duì)話框中輸入正確密碼，按“Back”鍵返回文件列表界面，按“Accept”鍵確認(rèn)密碼，進(jìn)入文件運(yùn)行界面或樣本容量輸入窗 口。

●在文件列表界面按“Run”鍵輸入文件密碼后：

如果當(dāng)前Controlmode為Block模式，按“Accept”進(jìn)入文件運(yùn)行界面；如果當(dāng)前Controlmode為Tube模式，按“Accept”鍵會(huì)彈出樣本容量輸入對(duì)話框：

和主界面相同按數(shù)字鍵，可根據(jù)實(shí)際情況輸入樣本容量，按“Back”鍵返回到文件列表界面；按“Run”進(jìn)入文件運(yùn)行界面。

注意：用戶和文件的右上角顯示“*”，表示此文件為系統(tǒng)默認(rèn)的運(yùn)行文件，默認(rèn)運(yùn)行。文件可在系統(tǒng)參數(shù)設(shè)置界面中修改?！裨诒窘缑婵删庉嬑募墓?jié)和段，文件由節(jié)和段構(gòu)成，段中包含有節(jié)，段內(nèi)的節(jié)可設(shè)置循環(huán)次數(shù)（如圖8-14所示）。按光標(biāo)上下移動(dòng)鍵、光標(biāo)左右移動(dòng)鍵移動(dòng)光標(biāo)，光標(biāo)所在之處文字顏色反白顯示。按字符鍵可改變參數(shù)設(shè)置。按正負(fù)鍵改變正負(fù) 號(hào)。

按“＋Seg.”鍵進(jìn)入節(jié)編輯狀態(tài)。在一節(jié)中，可依次設(shè)置溫度（Temp）、持續(xù)時(shí)間（Time）、升降溫速率（Ramp）、每循環(huán)溫度增量（＋Time）。按“Delete”鍵將立即刪除光標(biāo)所在一節(jié)。按“＋Cycle”鍵記入段編輯狀態(tài)?？梢来卧O(shè)置循環(huán)數(shù)和循環(huán)起始節(jié)。如下圖所示的設(shè)置表示在第一段中從第1節(jié)到第3節(jié)循環(huán)，共循環(huán)10遍。重復(fù)按“＋Cycle”鍵可添加段（最多5個(gè)段），按“Delete”鍵將立即刪除當(dāng)前段。按光標(biāo)上下移動(dòng)鍵可分別進(jìn)入前一段或后一段。按“Save/Run”鍵進(jìn)入文件保存界面。按“Back”鍵退回到文件列表界 面。

特別提醒：① 新編輯的PCR程序請(qǐng)先保存再運(yùn)行，否則文件運(yùn)行結(jié)束后不保存程序文件；

②“Time”設(shè)置為“—：—”時(shí)，將在模塊控溫的同時(shí)自動(dòng)關(guān)閉熱蓋。

圖8-14　文件中節(jié)和段的關(guān)系圖

●在本界面中按字符鍵即可輸入文件名，按確認(rèn)鍵光標(biāo)后移一位。用上下鍵選擇User、File Name、Password或Password confirm。左鍵刪除字符，右鍵移動(dòng)光標(biāo)。按Caps鍵可改變輸入字符的大小寫，在屏幕左上角處有大小寫提示（如下圖中）。

按“Main”鍵退回主界面。按“Save”鍵可保存該文件。文件正常保存后，系統(tǒng)將提示“File have been saved.Please continue another operation”，按確認(rèn)鍵提示條消失。如果文件重名，系統(tǒng)將提示重命名（Rename）或繼續(xù)保存（Save）。如果當(dāng)前Controlmode為Block模式，按“Run”鍵進(jìn)入文件運(yùn)行界面；如果當(dāng)前Controlmode為Tube模式，按“Run”鍵會(huì)彈出樣本容量輸入對(duì)話框。

●和主界面相同，可根據(jù)實(shí)際情況輸入樣本容量。按“Back”鍵返回文件保存界面；按“Run”鍵進(jìn)入文件運(yùn)行界面。

●進(jìn)入文件保存界面，如果未按“Save”鍵，直接按“Run”，系統(tǒng)將提示“Themodifications will be lost after running.Do you still want to run？”按“No”返回文件保存界面。按“Yes”進(jìn)入文件運(yùn)行界面及樣本容量輸入界面（注意：此次修改程序運(yùn)行完成后將不會(huì)保存）。按“Yes”后，如果當(dāng)前Controlmode為Block模式，程序進(jìn)入文件運(yùn)行界面；如果當(dāng)前Controlmode為Tube模式，彈出樣本容量輸入對(duì)話框：

●和主界面相同，可根據(jù)實(shí)際情況輸入樣本容量。按“Back”鍵返回文件保存界面；按“Run”鍵進(jìn)入文件運(yùn)行界面。進(jìn)入文件運(yùn)行界面后，文件正常運(yùn)行時(shí)，Now Running處的“...”會(huì)不斷閃爍。運(yùn)行結(jié)束后，系統(tǒng)將提示“File running is over，Press‘Enter’back to themain interface.”按“Stop”鍵將提示“Do you want to stop running？Please select‘F1’or‘F3’.”，按提示信息選擇停止（Stop）或繼續(xù)（Start）。按“Pause”鍵將提示“Pause state now.Press‘F3’to continue running.”，按提示信息選擇繼續(xù)（Start）。按“View File”鍵可查看已編輯的PCR程序。按“Skip”鍵可直接跳過(guò)目前的溫度段進(jìn)入下一個(gè)溫 度。

8.3.11　電泳儀和瓊脂糖凝膠電泳槽

電泳儀是為電泳槽提供穩(wěn)定、可控直流電源的專用儀器，不得挪作他用。電泳槽可分為垂直和水平兩大類，瓊脂糖凝膠電泳槽屬于水平電泳槽。

瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作為支持介質(zhì)的一種電泳方法，孔徑較大。一般可用于分離相對(duì)分子質(zhì)量較大的樣品，如大分子核酸、病毒等。

瓊脂糖凝膠電泳最高分辨率可區(qū)分相差100 bp的DNA片段，其分辨率雖比聚丙烯酰胺凝膠低，但制備容易，分離范圍廣，尤其適于分離大片段DNA。普通瓊脂糖凝膠分離DNA的范圍為0.2～20 kb，利用脈沖電泳，可分離高達(dá)10～7 bp的DNA片段。

特別提醒：電泳儀和瓊脂糖凝膠電泳槽在使用過(guò)程中有可能受到EB污染，必須在指定位置使用，嚴(yán)禁擅自挪動(dòng)！使用、洗滌時(shí)，必須佩戴乳膠或塑料手套！

進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳的操作前，應(yīng)注意以下事項(xiàng)：

（1）準(zhǔn)備干凈的配膠板和電泳槽　注意：受到污染的配膠板和電泳槽可能含有DNA酶等，可能會(huì)降解DNA，造成條帶信號(hào)弱、模糊甚至缺失的現(xiàn)象。

（2）選擇電泳方法　一般的核酸檢測(cè)用瓊脂糖凝膠電泳即可；如果需要分辨率高的電泳，特別是只有幾個(gè)bp的差別應(yīng)該選擇聚丙烯酰胺凝膠電泳；對(duì)于大的DNA分子則應(yīng)使用脈沖凝膠電泳。

（3）正確選擇凝膠濃度　瓊脂糖凝膠電泳的可用濃度通常在0.5%～2%之間。低濃度的用于進(jìn)行大片段核酸的電泳，高濃度的用于進(jìn)行小片段分析。低濃度膠易碎，必須采用質(zhì)量好的瓊脂糖，并小心操作。濃度不適當(dāng)?shù)哪z（與DNA分子大小不匹配）可能使分子大小相近的DNA帶不易分辨，造成條帶缺失現(xiàn)象。

（4）選擇適合的電泳緩沖液　常用緩沖液有TAE（Tris-乙酸緩沖液）和TBE（Tris-硼酸緩沖液），TBE比TAE有著更好的緩沖能力。緩沖液一般應(yīng)配制成母液置于4 ℃冰箱中冷藏，使用前再進(jìn)行稀釋。電泳時(shí)使用新制的緩沖液可以明顯提高電泳效果。注意電泳緩沖液多次使用后，離子強(qiáng)度降低，pH值改變，緩沖性能下降，可能使DNA電泳產(chǎn)生條帶模糊和不規(guī)則的DNA帶遷移的現(xiàn)象。

（5）選擇合適電壓和溫　度 電泳時(shí)電壓不應(yīng)該超過(guò)20 V/cm，電泳溫度應(yīng)低于30 ℃，對(duì)巨大的DNA電泳，溫度應(yīng)該低于15 ℃。注意如果電泳時(shí)電壓和溫度過(guò)高，可能導(dǎo)致條帶模糊和不規(guī)則的DNA帶遷移的現(xiàn)象。特別是電壓太大可能導(dǎo)致小片段跑出膠而出現(xiàn)缺帶現(xiàn)象。

（6）DNA樣品的純度和狀態(tài)　注意樣品中含鹽量太高和含雜質(zhì)蛋白均可以產(chǎn)生條帶模糊和條帶缺失的現(xiàn)象。乙醇沉淀可以去除多余的鹽，用酚可以去除蛋白。注意變性的DNA樣品可能導(dǎo)致條帶模糊和缺失，也可能出現(xiàn)不規(guī)則的DNA條帶遷移。在上樣前不要對(duì)DNA樣品加熱，用20mM NaCl緩沖液稀釋可以防止DNA變 性。

（7）Marker的選擇　為了用目測(cè)法估算DNA條帶所代表的相對(duì)分子質(zhì)量大小，電泳時(shí)必須在同一塊膠板上使用DNAmarker或已知大小的正對(duì)照DNA。應(yīng)根據(jù)目標(biāo)DNA分子的大小選擇Marker，使目標(biāo)分子形成的條帶落在Marker條帶較密的范圍內(nèi)，這樣對(duì)目標(biāo)片段大小的估計(jì)才比較準(zhǔn)確。注意：在操作時(shí)，Marker作為樣本的處理方法也要符合DNA電泳的操作標(biāo)準(zhǔn)流程。如果選擇λDNA/Hind III或λDNA/EcoR I的酶切Marker，需要預(yù)先65 ℃加熱5分鐘，冰上冷卻后使用。從而避免Hind III或EcoR I酶切造成的黏性接頭導(dǎo)致的片段連接不規(guī)則或條帶信號(hào)弱等現(xiàn) 象。

（8）DNA樣本的上樣　正確的DNA上樣量和上樣方法是條帶清晰的保證。上樣量太大可能造成“漂樣”，導(dǎo)致DNA帶型模糊；而上樣量太小則導(dǎo)致帶信號(hào)弱甚至缺失。TIANGEN公司DNA相對(duì)分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)每次上樣1～2 μL即可得到清晰均勻的條 帶。

（9）凝膠的染色和觀察　實(shí)驗(yàn)室常用的核酸染色劑是溴化乙啶（EB），染色效果好，操作方便，但是穩(wěn)定性差，具有強(qiáng)烈毒性。其他系列如SYBR Green，GelRed，毒性小，但價(jià)格昂貴、操作條件比較苛刻。注意觀察凝膠時(shí)應(yīng)根據(jù)染料不同使用合適的光源和激發(fā)波長(zhǎng)，如果激發(fā)波長(zhǎng)不對(duì)，條帶則不易觀察，出現(xiàn)條帶模糊的現(xiàn)象。

特別提醒：

●溴化乙啶（EB）具有強(qiáng)烈毒性，操作室必須佩戴乳膠或塑料的一次性手套，且應(yīng)小心操作，切勿濺到皮膚上！

●佩戴手套操作時(shí)，嚴(yán)禁操作除染色盤之外的其他儀器，以免造成污染！

●操作完成后，手套必須按照規(guī)范摘下（摘下時(shí)翻過(guò)來(lái)），放入指定的垃圾桶，不得隨意丟放！

電泳步驟如 下：

a）制備1%瓊脂糖凝膠（大膠用70mL，小膠用50mL）：稱取0.7 g（或0.5 g）瓊脂糖置于錐形瓶中，加入70mL（或50mL）1×TAE，瓶口倒扣小燒杯。微波爐加熱煮沸3次，至瓊脂糖全部熔化，搖勻，即成1.0%瓊脂糖凝膠液。

b）膠板制備：取電泳槽內(nèi)的有機(jī)玻璃內(nèi)槽（制膠槽）洗干凈，晾干，放入制膠玻璃板，取透明膠帶將玻璃板與內(nèi)槽兩端邊緣封好，形成模子。將內(nèi)槽置于水平位置，并在固定位置放好梳子。將冷卻至65 ℃左右的瓊脂糖凝膠液混勻后小心地緩慢倒入內(nèi)槽玻璃板上，使膠液緩慢展開，直到整個(gè)玻璃板表面形成均勻膠層。室溫下靜置直至凝膠完全凝固，垂直輕拔梳子，取下膠帶，將凝膠及內(nèi)槽放入電泳槽中。添加1×TAE電泳緩沖液至沒過(guò)膠板1～2mm為止。

c）加樣：在點(diǎn)樣板或parafilm上混合DNA樣品和上樣緩沖液，上樣緩沖液的最終稀釋倍數(shù)應(yīng)不小于1X。用20 μL微量移液器依次將樣品加入膠板的樣品小槽內(nèi)（注意：加樣前要先記錄加樣的順序），每加完一個(gè)樣品，應(yīng)更換一個(gè)加樣頭，以防污染，加樣時(shí)勿碰壞樣品孔周圍和底部的凝膠，以免造成漏樣。膠板上有些孔可能因各種原因不符合要求，這些孔就不能使用，空置，但必須記錄。

d）電泳：加樣后的凝膠板立即通電進(jìn)行電泳，電壓60～100 V，樣品由負(fù)極（黑色）向正極（紅色）方向移動(dòng)。電壓升高，瓊脂糖凝膠的有效分離范圍降低。當(dāng)溴酚藍(lán)移動(dòng)至距離膠板下沿約1 cm處時(shí)，停止電 泳。

e）電泳完畢后，取出凝膠，放入專用的染色盤中，用含有0.5 ug/mL的溴化乙啶1×TAE溶液染色約20分鐘，再用清水漂洗10分鐘。

f）觀察照相：在紫外燈下觀察，DNA存在則顯示紅色熒光條帶，采用凝膠成像系統(tǒng)拍照保存。

8.3.12　UV—3000凝膠紫外分析儀

圖8-15　凝膠紫外分析儀

UV-3000型高強(qiáng)度紫外分析儀儀器備用三種光源254 nm、365 nm及白光，儀器采用全封閉一體化暗箱，無(wú)需在暗室內(nèi)操作，暗箱箱體設(shè)計(jì)觀察口和兩側(cè)割膠窗口，方便對(duì)凝膠樣品進(jìn)行切割，拉開抽屜燈箱，即可自動(dòng)關(guān)閉光源免受紫外線損傷。

（1）分析觀察樣品

①連接電源線：觀察凝膠樣品，用于制備觀察以及切割等操作，以減少紫外線對(duì)DNA的損傷，請(qǐng)將波長(zhǎng)開關(guān)365 nm或254 nm打開。選擇好合適的波長(zhǎng)后，就可以進(jìn)行凝膠的觀察、分析和切割等操 作。

②將電泳好的凝膠樣品或薄層、紙層樣品放在儀器中央，開啟電源，使樣品發(fā)出的熒光最清晰明亮。通常反射紫外離樣品越近，則熒光越強(qiáng)。開機(jī)約3分鐘，正是觀察和拍照的最好時(shí)機(jī)，不可錯(cuò)過(guò)。

③如需要切片，雙手伸入兩側(cè)的切膠口便可進(jìn)行。

④紫外熒光板轉(zhuǎn)換，直接把熒光板放在紫外燈箱上，即可實(shí)現(xiàn)紫外光與可見光之間切換，適用于蛋白凝膠分析。

（2）拍攝照片

①安上照相立架和固定螺絲。相機(jī)只要裝上濾色鏡即可。

②將相機(jī)鏡頭放進(jìn)相機(jī)座中間圓孔內(nèi)，當(dāng)相機(jī)穩(wěn)定后即可拍照。注意：調(diào)節(jié)相機(jī)鏡頭應(yīng)事前準(zhǔn)備好，才能適時(shí)搶拍。為了拍攝時(shí)穩(wěn)定最好用快門線或其他裝置。

（3）注意

①放置膠片前應(yīng)關(guān)掉紫外燈開關(guān)，防止紫外線泄漏灼傷人體。

②使用前要把紫外濾光片上的保護(hù)膜撕去。

③觀察后應(yīng)及時(shí)關(guān)閉電源開關(guān)，以延長(zhǎng)紫外燈的壽命。

④嚴(yán)禁用金屬物和其他硬物直接接觸紫外濾光片，以免刮花紫外濾光片。

⑤防止電泳液污染紫外濾光片。

⑥定期用無(wú)水乙醇清潔紫外濾光片，以防紫外濾光片發(fā)霉。

8.3.13　制冰機(jī)

制冰機(jī)是制備實(shí)驗(yàn)室用冰的專用儀器。使用時(shí)，應(yīng)注意水源是否通暢。然后插上電源，按下顯示屏正前方下面的開關(guān)按鈕。即開始加水制冰。使用完畢關(guān)閉按鈕。一般情況下，為常開。

特別提醒：實(shí)驗(yàn)室用冰切忌食用！

8.3.14　顯微鏡

顯微鏡是用于顯微觀察的專用精密儀器，應(yīng)注意保護(hù)。

（1）拿取時(shí)，必須用雙手。一手抓住顯微鏡的柄，另一手托住底座，保持水平，防止鏡頭滑落。

（2）使用時(shí)，應(yīng)小心操作，避免用力過(guò)度或調(diào)節(jié)過(guò)快。特別是使用高倍物鏡（40×和100×）時(shí)，應(yīng)避免物鏡與載物臺(tái)兩者相碰。調(diào)焦過(guò)程中，用粗準(zhǔn)焦螺旋使工作臺(tái)快速上升，將接近標(biāo)本時(shí)，用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)焦，并兼顧視場(chǎng)及物鏡與標(biāo)本的碰撞，緩慢地把像調(diào)清 晰。

（3）為彌補(bǔ)空氣媒介對(duì)高倍率的吸收，可以使用100×油浸物鏡。需要在標(biāo)本片表面滴上一小滴合成浸油，使之形成浸油增透，使用完畢后先用擦鏡紙擦去油滴，再用二甲苯或者（乙醚/乙醇＝3/1）擦拭干凈，最后再用擦鏡紙擦干有機(jī)溶劑。擦拭時(shí)應(yīng)按固定一個(gè)方向，以免劃傷鏡片?；蚴褂徒胛镧R，導(dǎo)致?lián)p壞，影響使用。

（4）工作臺(tái)下的聚光鏡座還裝有濾光色片托架，平移托架，放入濾色片，以適用不同的標(biāo)本效果。在使用紫外線作為光源時(shí)（熒光顯微鏡），必須使用防護(hù)濾色片，注意不要直視光源，避免眼睛受傷害。

（5）用完的載玻片要及時(shí)處理掉，物鏡、載物臺(tái)等要及時(shí)清理。（6）使用顯微成像記錄時(shí)，應(yīng)避免放置顯微鏡的臺(tái)子振動(dòng)。