角膜移植手術(shù)能否健康順利的開展，需要角膜材料供應(yīng)的保證。20世紀(jì)70年代，角膜移植失敗的重要原因是供體角膜質(zhì)量問題，術(shù)后常發(fā)生原發(fā)性供體角膜功能衰竭，植片水腫渾濁。而近年來，眼庫技術(shù)的發(fā)展和手術(shù)技術(shù)的提高，角膜移植的成功率可達(dá)到90%。植片失敗的主要原因多是由免疫排斥反應(yīng)所致。

（一）眼庫

眼庫是為角膜移植手術(shù)提供安全和可靠供體角膜材料的機(jī)構(gòu)，它不僅能通過合法的途徑在社會上組織和宣傳過世后捐獻(xiàn)角膜的義務(wù)和良好社會風(fēng)尚，培養(yǎng)眼庫專門技術(shù)人才，而且還能從事角膜保存技術(shù)的研究，并能夠通過提供眼組織為眼科的其他領(lǐng)域的研究提供支持。在眼庫管理技術(shù)方面，最重要的任務(wù)是檢測和排除供體可能傳播給受體的所有疾病，保證供體組織無污染，提供的角膜質(zhì)量符合移植的標(biāo)準(zhǔn)，特別是提供做穿透性角膜移植手術(shù)的角膜內(nèi)皮密度和活性等數(shù)據(jù)資料。

（二）供體的選擇

理想的方式是醫(yī)師根據(jù)眼庫提供的可靠資料，決定是否使用所提供的角膜材料。主要考慮以下幾方面：

1．供體年齡　對穿透性角膜移植手術(shù)，一般認(rèn)為供體年齡為3～50歲最佳。雖然3歲以下角膜內(nèi)皮密度較大，但角膜曲率半徑小，組織比較軟弱，做穿透性角膜移植術(shù)后易發(fā)生高度近視狀態(tài)。而角膜內(nèi)皮密度隨年齡增加而逐漸減少，年齡過大難以保證植片的質(zhì)量。而在實(shí)際工作中，有時(shí)需要充分考慮各種因素決定是否采用。比如對無晶體眼，利用3歲以下的供體可減少術(shù)后的遠(yuǎn)視狀態(tài)。對嚴(yán)重角膜感染或潰瘍，為挽救眼球和恢復(fù)其完整性，植片的供體年齡有時(shí)也不能十分苛求。對50歲以上的供體，通過專門的實(shí)驗(yàn)室檢查技術(shù)，可以明確角膜內(nèi)皮的密度和活性等參數(shù)，年齡可以適當(dāng)放寬。對板層角膜移植手術(shù)用的供體年齡沒有嚴(yán)格限制。

2．供體角膜采集的禁忌證　絕對禁忌證包括：①全身嚴(yán)重感染，如敗血癥和膿毒血癥。②病毒性肝炎。③狂犬病。④嬰幼兒先天性風(fēng)疹。⑤病毒引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如瘋牛病。⑥與病毒感染有關(guān)的惡性腫瘤。⑦AIDS病。⑧某些眼病，如化膿性眼內(nèi)炎、先天或后天性角膜病、明顯的眼表疾病、放射狀角膜切開術(shù)和PRK等手術(shù)后、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、眼內(nèi)腺癌、侵及眼前節(jié)的其他眼內(nèi)或眶內(nèi)惡性腫瘤。相對禁忌證包括：①黃疸。②與病毒感染無明顯關(guān)系的全身慢性惡性腫瘤。③嚴(yán)重糖尿病或梅毒。④未累及眼前節(jié)的某些眼內(nèi)（如黑色素瘤）和眼眶內(nèi)惡性腫瘤。⑤內(nèi)眼手術(shù)史，如白內(nèi)障、青光眼、玻璃體手術(shù)后。

3．供體眼球采集時(shí)間　受多方面因素影響，如死亡原因、環(huán)境溫度，等等。一般在死后6～12h內(nèi)為佳。這樣才能保證獲得最佳的內(nèi)皮質(zhì)量。如果尸體在冷藏等條件下，可適當(dāng)延長。距死亡的時(shí)間越長，內(nèi)皮細(xì)胞的活性越差，對其后的保存時(shí)間也有重要影響，有時(shí)可能無法保存而必須馬上使用。

（三）眼球采集和處理方法

眼球采集原則上應(yīng)該在無菌條件下進(jìn)行，但在實(shí)際工作中難以做到這一點(diǎn)。但應(yīng)常規(guī)盡力按無菌要求進(jìn)行，包括眼瞼皮膚用碘酒或碘氟消毒，結(jié)膜囊用0．25%氯霉素或0．3%慶大霉素眼液反復(fù)沖洗。眼球摘除要使用預(yù)先準(zhǔn)備好的無菌包，包括無菌手套、孔巾、齒鑷和剪刀、帶蓋的廣口瓶和紗布塊。摘除的眼球角膜向上放于廣口瓶中，下方和周圍用浸過氯霉素眼液的濕紗布固定，再放入冰桶中并盡快運(yùn)送眼庫。眼庫接收眼球后，要做進(jìn)一步處理才能進(jìn)行保存或臨床應(yīng)用。首先要在無菌條件下（或超凈工作臺上）剪除眼球表面的筋膜和結(jié)膜，順序由視神經(jīng)開始向角膜緣分離組織，最后在角膜緣全周剪除，可最大限度使眼表面保持清潔。用預(yù)冷的1000U／ml慶大霉素鹽水（4℃）反復(fù)沖洗眼球或浸泡10～20min。眼球表面取樣做細(xì)菌等培養(yǎng)。根據(jù)需要選擇角膜保存方法。

（四）角膜保存方法

1．濕房保存（短期保存方法）　在20世紀(jì)70年代曾是美國眼庫的標(biāo)準(zhǔn)方法。而國內(nèi)目前除少數(shù)大醫(yī)院有眼庫可以進(jìn)行中期保存外，很多開展角膜移植手術(shù)的單位均廣泛采用濕房保存，這種方法簡單，費(fèi)用低廉。具體做法是將處理過的眼球角膜向上放于無菌廣口瓶中，下方及四周墊浸滿慶大霉素液（1000U／ml）或氯霉素液（0．25%）的紗布，封緊瓶口，4℃冰箱保存和運(yùn)送。一般在24～48h內(nèi)使用。

2．角膜保存液保存（中期保存方法）　保存液包括M－K、K、Dexsol和Optisol角膜保存液等，有商品化生產(chǎn)。其中M－K液在一般眼庫均自己配制。

3．器官培養(yǎng)法（長期保存法）　需要特殊的組織細(xì)胞培養(yǎng)條件、技術(shù)和設(shè)備，雖然可使角膜組織能保存長達(dá)1個(gè)月，但成本高，目前難以普及。

4．低溫冷凍保存法（長期保存法）　在嚴(yán)格的冷凍前植片處理、冷凍降溫和復(fù)溫控制條件下，植片可保存長達(dá)1年以上，并能夠使內(nèi)皮保持良好結(jié)構(gòu)和功能，在國內(nèi)外均有成功的臨床應(yīng)用病例。但與器官培養(yǎng)一樣，成本高，技術(shù)條件較復(fù)雜，難以廣泛普及應(yīng)用。

5．干燥保存方法　由于干燥保存的角膜植片沒有細(xì)胞活性，一般適用于板層角膜移植。這種方法簡單實(shí)用，費(fèi)用低廉，可長期保存，特別適合臨床急癥角膜病的治療性目的等，在許多情況下，與新鮮角膜板層移植效果相當(dāng)。但對于感染性疾病的治療，干燥保存的材料可能對感染復(fù)發(fā)的抵抗能力要差些?？蓪⒔悄ゎA(yù)先做板層分離，制作成1／2或2／3厚的板層片，再進(jìn)行脫水干燥。通常放于純甘油中24～48h，再將植片轉(zhuǎn)移到放有純甘油的無菌小瓶中密封保存。也可用滅菌無水氯化鈣在干燥器中脫水后，再封存于放有變色硅膠的無菌瓶中封存。如果發(fā)現(xiàn)硅膠變色，要更換新的脫水硅膠。也有人嘗試用蜂蜜保存角膜的方法。