培養(yǎng)與檢測(cè)方法
研究和觀察細(xì)菌個(gè)體,必須對(duì)細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)、分離和純化,然后方可對(duì)某種細(xì)菌進(jìn)行研究觀察。一般從自然界分離細(xì)菌過程包括采樣、培養(yǎng)、分離、純化和增殖,然后可進(jìn)行細(xì)菌各種特性研究。
【培養(yǎng)液】
細(xì)菌培養(yǎng)液按狀態(tài)有液體、固體、半固體培養(yǎng)液,按性質(zhì)有合成培養(yǎng)液,天然培養(yǎng)液,細(xì)胞培養(yǎng)液和動(dòng)物模型,按功能有鑒別培養(yǎng)液、選擇培養(yǎng)液和種子培養(yǎng)液。
【培養(yǎng)方法】
1.接種
(1)接種工具:白金針,白金耳(環(huán)),微量吸管、毛細(xì)吸管均為常用接種工具。
(2)接種方法:轉(zhuǎn)種,將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種到新的培養(yǎng)液上,目的是為了增菌、保存菌種,檢驗(yàn)等;分離,劃線接種,稀釋接種,涂抹接種,傾注接種等。
2.培養(yǎng)
(1)有氧培養(yǎng):一般利用平板和斜面,適用于需氧菌和兼性厭氧菌。
(2)厭氧培養(yǎng):利用隔絕空氣或驅(qū)除空氣的方法實(shí)現(xiàn)無氧環(huán)境,實(shí)驗(yàn)室多用二氧化碳培養(yǎng)箱,工業(yè)上常用厭氧罐進(jìn)行培養(yǎng)。
【檢測(cè)方法】
1.鏡檢觀察形態(tài)
(1)直接鏡檢:取得含菌標(biāo)本或?qū)iT培養(yǎng)的細(xì)菌培養(yǎng)物,可直接用白金耳或針蘸取少許標(biāo)本置于玻片上,于光學(xué)顯微鏡下觀察,主要是觀察有無細(xì)菌存在,不太容易觀察到。
(2)染色檢查:利用革蘭染色或其他染色方法,把經(jīng)過適當(dāng)處理過的含菌標(biāo)本置于玻片上涂抹開、固定、染色,然后在光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)菌染色性質(zhì)和細(xì)菌形態(tài)。
2.鏡檢活菌計(jì)數(shù)
(1)直接計(jì)數(shù)法:鏡下計(jì)數(shù)法,比濁法,平板計(jì)數(shù)法,測(cè)重量法、電子計(jì)數(shù)法。
(2)間接計(jì)數(shù)法:細(xì)菌菌體組分含量測(cè)定法,包括測(cè)定DNA含量、蛋白質(zhì)含量、ATP含量;測(cè)定培養(yǎng)液營(yíng)養(yǎng)成分消耗量,測(cè)定代謝產(chǎn)物含量等。
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