丙型肝炎病毒抗體檢查
丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是有包膜的單股正鏈RNA病毒,其帶有脂質(zhì)包膜以及病毒蛋白的親、疏水性,HCV屬于黃病毒科,丙型肝炎病毒屬。HCV為丙型病毒性肝炎的病原體,HCV感染的傳染途徑主要是經(jīng)血液傳播,也可能存在其他傳播途徑如母嬰傳播、性傳播和家庭內(nèi)接觸傳播。約有近半數(shù)的HCV感染傳播途徑不明確。
【測定方法】
1.抗HCV初篩 ①酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA);雙抗體夾心法;②免疫膠體金法膠體金免疫層析試驗(yàn)(GICA);③自動(dòng)化分析儀法:例如AXSYM i2000全自動(dòng)酶免疫分析儀,其原理為微粒子酶免分析法使用重組HCV蛋白作為抗原,檢測抗HCV基因組結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白的抗體。又如增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光儀ECI,在酶免化學(xué)發(fā)光法的基礎(chǔ)上加了化學(xué)發(fā)光增強(qiáng)劑。
2.抗-HCV確認(rèn)實(shí)驗(yàn) 目前常用的確認(rèn)方法是條帶免疫法(strip immunoassay,SIA)。其中常用的一種方法稱為重組免疫印跡法(Recombinant Immunoblot Assay,RIBA),該法將HCV重組抗原以條帶的形式包被在硝基纖維素膜上,分別與待檢血清和酶標(biāo)抗體溫育,顯色判斷。
【參考范圍】
抗HCV初篩:陰性;或確證實(shí)驗(yàn):陰性
抗HCV篩選實(shí)驗(yàn):抗HCV在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)>3.8S/CO;化學(xué)發(fā)光法>8.0S/CO可直接報(bào)告陽性。
抗HCV在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)1~3.8S/CO;化學(xué)發(fā)光法1~8.0S/CO時(shí),建議檢測HCV-RNA或定期復(fù)查。結(jié)合肝功及臨床癥狀。
【臨床應(yīng)用價(jià)值】
HCV抗體的出現(xiàn),提示感染過HCV,或是攜帶HCV并能傳播HCV。盡管多數(shù)感染HCV的患者可無癥狀,但HCV感染可發(fā)展為慢性肝炎、肝硬化,并增加患肝細(xì)胞肝癌的危險(xiǎn)性。丙型肝炎病毒可通過輸血傳播,對(duì)供血者進(jìn)行HCV抗體篩查,可明顯降低輸血后肝炎的感染率。
丙型肝炎的臨床病程分為急性和慢性肝炎。
1.急性肝炎 HCV初發(fā)感染往往比較隱匿,大多數(shù)呈亞臨床經(jīng)過,僅20%~30%的感染者呈急性肝炎表現(xiàn),其中約1/3可出現(xiàn)黃疸。絕大多數(shù)患者的病情較輕,很少有嚴(yán)重肝病的表現(xiàn),單獨(dú)由HCV引起暴發(fā)性肝炎極為少見。急性丙型肝炎有2種類型的轉(zhuǎn)歸:①急性自限型,體內(nèi)HCV完全被清除,達(dá)到臨床痊愈,不再復(fù)發(fā);②轉(zhuǎn)為慢性感染。
2.慢性肝炎 ①“ALT正常的HCV攜帶者”,攜帶者血清HCV RNA持續(xù)(或者間歇)陽性,一般有較高水平的抗HCV抗體水平。10%~20%的急性肝炎中患者將轉(zhuǎn)變?yōu)樵擃愋?,一般?xí)慣將其稱為“無癥狀攜帶者”。②伴有ALT升高的慢性丙型肝炎,患者血清HCV-RNA持續(xù)陽性,ALT持續(xù)或者間斷性異常,這種癥狀長期維持,并發(fā)展進(jìn)入慢性期。
【影響因素】
1.實(shí)驗(yàn)前因素 分離后5d之內(nèi)測定的血清或血漿標(biāo)本可放置于2~8℃保存,超過5d在-20℃保存。避免使用溶血、混濁或脂血樣本及反復(fù)凍融樣本。檢測抗-HCV時(shí),無需空腹。
2.實(shí)驗(yàn)中注意的問題 ①使用前試劑盒應(yīng)預(yù)先在室溫環(huán)境中平衡30min。用前搖勻,剩余包被板條應(yīng)密封保存,以免受潮。②試劑盒在2~8℃避光保存,啟用后應(yīng)盡快用完。③不同批次的試劑組分不能混用。④實(shí)驗(yàn)后試劑、血清標(biāo)本均應(yīng)視為有傳染性物質(zhì)。
(竇亞玲)
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