1.萘酚AS-BI磷酸鈉(ICSH推薦方法）

（1）原理:萘酚AS-BI磷酸鈉在pH9.5條件下，被白細(xì)胞中的酶水解為磷酸和芳香萘酚，后者與偶氮鹽耦合形成不溶性的染料。

（2）操作步驟:新鮮干燥血涂片甲醛甲醇溶液中冷固定5s，水沖，晾干。置于萘酚AS-BI磷酸鈉作用液中，于37℃溫箱15min，水沖，晾干。Mayer蘇木素染液復(fù)染10min，水洗，0.5%氨后返藍(lán)，水沖，晾干。鏡檢。

(3）陽性結(jié)果:成熟中性粒細(xì)胞胞質(zhì)酶活性部位，可以看到紫紅色顆粒，細(xì)胞核為藍(lán)色。骨髓中網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞呈強(qiáng)陽性反應(yīng)。

結(jié)果判斷:(-)胞質(zhì)內(nèi)無顆粒;(+)有很少數(shù)顆粒，約占胞質(zhì)面積1/4;(++)中等數(shù)量顆粒，約占胞質(zhì)面積1/2;(+++)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)大量顆粒，約占胞質(zhì)面積3/4;（++++)陽性物充滿了胞質(zhì)，無空隙。

正常參考結(jié)果:陽性率:66.28%±27.75%。

陽性指數(shù):103.28±69.93(中國醫(yī)科院血液病醫(yī)院細(xì)胞化學(xué)室標(biāo)準(zhǔn))。

此試驗(yàn)影響因素較多，因此各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的正常值。

2.萘酚AS-MX磷酸鈉（ICSH推薦方法）

（1）原理:萘酚AS-MX磷酸鈉在pH9.5被白細(xì)胞中酶水解產(chǎn)生磷酸和芳基萘酚，后者再與偶氮鹽偶聯(lián)形成不溶性染料。

（2）操作步驟:從毛細(xì)血管或肝素化靜脈血制備血片，空氣中干燥。將干燥的血片浸泡在冰盒中的固定劑5s，水洗，空氣中晾干。置新配制的作用液中37℃溫浴2h，水洗。藏紅花紅O復(fù)染2min，水沖。

(3）陽性結(jié)果:酶活性出現(xiàn)為不連續(xù)的分散的藍(lán)色顆粒，在中性粒細(xì)胞胞質(zhì)中，細(xì)胞核及漿染成紅到淺紅色，很少的淋巴細(xì)胞可呈現(xiàn)很弱的反應(yīng)，網(wǎng)狀細(xì)胞強(qiáng)陽性反應(yīng)，所有其他血細(xì)胞無反應(yīng)。結(jié)果判斷:（-）無陽性顆粒;（+）5個(gè)染料顆粒;（++）5個(gè)以上到30個(gè)可以清楚計(jì)數(shù)的顆粒;（+++）30個(gè)以上呈不勻的顆粒;（++++）30個(gè)以上顆粒呈均勻分布，但在顆粒之間可以清楚辨別;（+++++）中性粒細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)充滿顆粒，且顆粒之間不可清楚辨別。

正常值:陽性率:>68%;陽性指數(shù):164-380。

（4）臨床意義

①生理變化

a.年齡:NAP活性在新生兒很高，3個(gè)月開始降低，嬰幼兒和兒童期仍略高于成年人，60歲以上老年期NAP活性降低。

b.應(yīng)激狀態(tài):恐懼、緊張和劇烈運(yùn)動(dòng)等應(yīng)激狀態(tài)下NAP活性可增高。

c.性別:成年女性NAP活性較成年男性高，且隨月經(jīng)周期亦有改變，經(jīng)前期增高，行經(jīng)期降低，經(jīng)后期恢復(fù)正常;妊娠2～3個(gè)月NAP積分值輕度增高以后逐月呈階梯式升高，分娩時(shí)達(dá)高峰，產(chǎn)后降至正常范圍。

②病理變化

a.白血病類型的鑒別

急性髓系白血病:NAP陽性率或陽性指數(shù)一般減低，亦可正常，并發(fā)感染時(shí)可稍增高。

急淋:NAP積分明顯增高，有利于急淋和急非淋的鑒別。

慢粒:慢性期(無繼發(fā)感染時(shí))NAP陽性率顯著減低，甚至是“0”，緩解期可恢復(fù)正常范圍，加速期和急變期NAP積分值可有不同程度增高。該檢測可作為觀察慢粒療效和預(yù)后的一項(xiàng)指標(biāo)，也是與類白血病反應(yīng)鑒別的重要檢測項(xiàng)目。

慢淋、多發(fā)性骨髓瘤和原始神經(jīng)母細(xì)胞瘤等，NAP的陽性率和陽性指數(shù)往往增高。

b.其他血液病

再障NAP陽性率和陽性指數(shù)增高;陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿(PNH)一般減低;MDS正?；驕p低。真性紅細(xì)胞增多癥NAP陽性率和陽性指數(shù)正?；蛟龈?，繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥NAP值正常或降低，是兩者的鑒別方法之一。骨髓纖維化、原發(fā)性血小板增多癥等NAP略有增高。惡性組織細(xì)胞病NAP積分值明顯減低，而反應(yīng)性組織細(xì)胞增多時(shí)NAP往往增高，有助兩者鑒別。感染:細(xì)菌性感染時(shí)NAP積分值增高，其中球菌性較桿菌性感染為高;急性感染較慢性感染高;病毒感染或寄生蟲感染、立克次體感染NAP積分值一般正常或降低。該檢測對(duì)鑒別細(xì)菌感染與其他感染有一定價(jià)值。