丁型肝炎病毒抗體檢測
丁型肝炎病毒(hepatitis D virus,HDV)分類位置屬于沙粒病毒科(Arenaviridae)病毒屬(Deltavirus)的一個成員,是引起與HBV相關(guān)聯(lián)的急性和慢性肝病的亞病毒病原體。HDV是目前已知動物病毒中唯一具有負(fù)單鏈共價閉環(huán)RNA基因組的缺陷病毒,其外殼為噬肝DNA病毒表面抗原(在人類為HBsAg),內(nèi)部含丁肝抗原(HDVAg)和HDV基因,所以在病毒復(fù)制時需HBV的輔佐為其提供HBsAg外殼,并協(xié)助其組裝、成熟、分泌和釋放。HDV感染分為兩種類型:同步感染(coinfection)指與HBV同時或者先后感染;重疊感染(superinfection)指在慢性HBV感染的基礎(chǔ)上發(fā)生HDV感染。丁型肝炎的特點有缺陷性、感染性、危險性。
在臨床上檢測病人血清中HDVAg,抗-HDV抗體均有診斷價值??笻DV-IgG陽性,只能在HBsAg陽性的血清中檢測到,是診斷丁型肝炎的可靠指標(biāo),即使HDV感染后仍可保持多年。
【測定方法】
1.酶聯(lián)免疫法(ELISA)測血清
抗丁型肝炎病毒抗體IgM(抗HDV-IgM),常采用捕獲法。
抗丁型肝炎病毒抗體(抗HDV-IgG),常采用競爭抑制法。
丁型肝炎病毒抗原(HDVAg),酶免疫夾心法。
2.RT-PCR 檢測HDV-RNA。
【參考范圍】
1.抗HDV-IgG、抗HDV-IgM、HDAg:陰性。
2.HDV-RNA低于最低檢測限。
【臨床應(yīng)用價值】
1.免疫組化法檢測肝組織中HDVAg(金標(biāo)準(zhǔn));HDV cDNA探針檢測血清中HDV-RNA,此法靈敏度高,可提高血清HDV檢出率。
HDVAg是病毒存在的確證依據(jù),抗HDV陽性證明患者感染了丁型肝炎并產(chǎn)生了抗體,是非保護(hù)性的。
2.在HDV感染期間,HBsAg水平常下降,甚至轉(zhuǎn)陰。
3.丁型肝炎的完整診斷,包括類型和病程,需要對數(shù)種檢測標(biāo)志作出綜合分析。
4.對于疑似HDV急性感染患者,通過檢測HDV抗體可作出診斷。初次感染的血清學(xué)反應(yīng)包括IgM抗體應(yīng)答,在數(shù)周后消失,抗HDV-IgM陽性,可用于丁型肝炎的早期診斷。隨后出現(xiàn)IgG抗體應(yīng)答。通過檢測抗HBs-IgM或者IgG以及HBeAg和抗-HBe抗體,作出同步感染和重疊感染的診斷。同步感染的血清學(xué)模式為,抗HBs-IgM和HBe-IgM以及抗HDV-IgM抗體陽性。而重疊感染的血清學(xué)模式為,抗HBs和抗-HBe IgG抗體持續(xù)存在,以及抗HDV-IgM抗體和HDV-RNA陽性、抗HDV IgG抗體水平生高。
【影響因素】
1.實驗前因素 分離后5d之內(nèi)測定的血清或血漿標(biāo)本可放置于2~8℃保存,超過5d在-20℃保存。避免使用溶血、混濁或脂血樣本及反復(fù)凍融樣本。檢測抗-HDV時,無需空腹抽血。
2.實驗中注意的問題 ①使用前試劑盒應(yīng)預(yù)先在室溫環(huán)境中平衡30min。用前搖勻,剩余包被板條應(yīng)密封保存,以免受潮。②試劑盒在2~8℃避光保存,啟用后應(yīng)盡快用完。③不同批次的試劑組分不能混用。
(竇亞玲)
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