甲胎蛋白是診斷原發(fā)性肝癌的特異性指標(biāo)。原發(fā)性肝癌是指由肝細(xì)胞或肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌變所形成的惡性腫瘤，近年來國內(nèi)外原發(fā)性肝癌的發(fā)病率正在不斷增高。歐美國家發(fā)病率較低（1．9～3．4／10萬），亞非國家發(fā)病率較高（4．6～98．2／10萬），我國的發(fā)病率為14．5～53／10萬，可見我國屬原發(fā)性肝癌的高發(fā)區(qū)。調(diào)查發(fā)現(xiàn)我國男性肝癌的死亡率僅次于胃癌和食管癌，占惡性腫瘤發(fā)病的第三位；女性則僅次于胃癌、宮頸癌和食管癌，為第四位。肝癌的發(fā)病率存在地區(qū)差異，沿海高于內(nèi)地，東南和東北高于西北、華北和西南部，沿海島嶼和江河?？谟指哂谘睾Ｆ渌貐^(qū)。肝癌發(fā)病存在著性別、年齡差異，肝癌多見于男性，男女發(fā)病之比為2～5∶1，年齡大多為40～49歲。越是肝癌高發(fā)區(qū)，這種性別差異就越明顯，發(fā)病年齡也越早。

甲胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP）是1956年在胎兒血清中發(fā)現(xiàn)的一種單鏈糖蛋白，分子量為67～74kD。其編碼基因位于第4對染色體的4q11-q22區(qū)域。主要由早期胎兒的肝合成，其次是卵黃囊、胃腸道黏膜，腎也少量合成。在胎兒6周左右開始合成，12～15周達(dá)到高峰。出生后1～2年降至成人水平。妊娠婦女的血和尿中的AFP含量從妊娠10周開始上升，于32～36周達(dá)到高峰。當(dāng)肝細(xì)胞或生殖腺胚胎組織發(fā)生惡性病變時，編碼AFP的基因重新被激活，使得細(xì)胞恢復(fù)合成AFP的能力，從而導(dǎo)致血中AFP含量明顯升高。在成人，AFP可以在大約80%的肝癌患者血清中升高，在生殖細(xì)胞腫瘤出現(xiàn)AFP陽性率為50%。在其他腸胃管腫瘤如胰腺癌或肺癌及肝硬化等患者亦可出現(xiàn)不同程度的升高。因此檢測血中AFP的濃度對于診斷肝細(xì)胞癌及生殖細(xì)胞腫瘤具有重要的臨床意義，并且甲胎蛋白是診斷原發(fā)性肝癌的一個特異性臨床指標(biāo)。

原發(fā)性肝癌起病隱匿，早期癥狀不明顯，一旦出現(xiàn)臨床病狀和體征，診斷多屬晚期，難以治療，因此臨床上迫切需要一種能夠早期診斷原發(fā)性肝癌的檢查方法。與傳統(tǒng)方法相比，POCT法采用雙抗體夾心法半定量檢測AFP，無需任何設(shè)備，方便快捷，靈敏度可達(dá)20ng／ml。

【檢測原理】　膠體金法檢測試紙條采用高度特異性的抗體抗原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù)，試紙條含有被預(yù)先固定于膜上測試區(qū)（T）的AFP抗體和質(zhì)控區(qū)（C）的羊抗鼠抗體。標(biāo)本中的AFP在層析過程中先與膠體金AFP抗體結(jié)合，然后繼續(xù)往上層析，隨后結(jié)合物會被固定在膜上的AFP抗體結(jié)合，在測試區(qū)（T）內(nèi)會出現(xiàn)一條紫紅色條帶。這條帶是AFP-AFP抗體金標(biāo)粒子的復(fù)合物與膜上AFP抗體結(jié)合形成的。如是陰性，則測試區(qū)（T）內(nèi)將沒有紫紅色條帶。無論AFP抗體是否存在于標(biāo)本中，一條紫紅色條帶都會出現(xiàn)在質(zhì)控區(qū)（C）內(nèi)。質(zhì)控區(qū)（C）內(nèi)所顯現(xiàn)的紫紅色條帶是判定是否有足夠標(biāo)本、層析過程是否正常的標(biāo)準(zhǔn)，同時也作為試劑的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)。

【適應(yīng)證】

1．肝細(xì)胞癌及生殖細(xì)胞癌（睪丸癌、卵巢癌、畸胎瘤等）的診斷，術(shù)后及放療、化療效果的監(jiān)測。

2．高危人群（如肝硬化可最終發(fā)展為肝癌，隱睪癥可導(dǎo)致睪丸癌）的監(jiān)測。

【標(biāo)本采集】　全血標(biāo)本或血清、血漿標(biāo)本。

【操作方法】

1．取出試紙條置于干凈平坦的紙上，1h內(nèi)盡快使用

2．加樣

（1）血清（血漿）標(biāo)本：在加樣處滴加25μl血清（血漿）標(biāo)本，然后馬上加入40μl緩沖稀釋液，并開始計(jì)時。

（2）全血標(biāo)本：在加樣處滴加50μl全血標(biāo)本，然后馬上加入40μl緩沖稀釋液，并開始計(jì)時。

3．結(jié)果　10min時讀取結(jié)果，20min后判讀無效。

【結(jié)果判讀】

1．陽性　測試區(qū)（T）和質(zhì)控區(qū)（C）內(nèi)均出現(xiàn)紫紅色條帶。如果C線強(qiáng)于T線，標(biāo)本中AFP含量低于400ng／ml；如果C、T線強(qiáng)度一致，樣本中AFP含量在400ng／ml左右；如果T線強(qiáng)于C線，標(biāo)本中AFP含量高于400ng／ml。

2．陰性　僅質(zhì)控區(qū)（C）出現(xiàn)一條紫紅色條帶。

3．無效　質(zhì)控區(qū)（C）未出現(xiàn)紫紅色條帶。

【參考范圍】　陰性。

【臨床意義】

1．原發(fā)性肝癌　有80%～90%的原發(fā)性肝癌的患者血清AFP的水平增高，75%左右的患者AFP＞300μg／L，臨床上將AFP＞400μg／L作為診斷原發(fā)性肝癌的醫(yī)學(xué)決定水平。大部分未經(jīng)治療的患者血清AFP呈持續(xù)升高，但仍有大約10%的患者血清AFP正常，因此AFP陰性并不能排除原發(fā)性肝癌。手術(shù)后或治療有效時AFP可逐漸減低，AFP水平的回升則意味著腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。

2．生殖腺胚胎性腫瘤　如睪丸癌、卵巢癌、畸胎瘤等，靈敏度為40%～85%。

3．其他腫瘤　胃癌、胰腺癌、膽管癌、結(jié)腸癌、肺癌等也會導(dǎo)致血清AFP的升高，但靈敏度僅為20%左右。

4．肝良性病變　病毒性肝炎患者的血清AFP濃度升高，多為暫時性改變。肝硬化患者的血清AFP水平可短暫或持續(xù)性升高，盡管通常不高于300μg／L，但大大增加了肝硬化患者發(fā)展為肝癌的危險(xiǎn)性。

【局限性】

1．AFP的生理變化

（1）妊娠：第10周開始升高，至第32～36周達(dá)到高峰，可達(dá)400～500μg／L，其后下降，約維持在250μg／L，分娩后迅速下降。但在胎兒神經(jīng)管畸形、食管及十二指腸閉鎖、先兆流產(chǎn)、胎兒宮內(nèi)窒息時，母體血清和羊水中AFP增高。

（2）胎兒出生時血清AFP約為70mg／L，2～3周后降至0．5～4mg／L，10個月后低于20μg／L。

2．操作失誤或標(biāo)本中存在某些干擾物質(zhì)時可能導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

3．膠體金法檢測試紙條僅為半定量篩選試劑。

【方法學(xué)優(yōu)點(diǎn)】　使用膠體金法檢測試紙條測試方法簡單、快速、準(zhǔn)確，不需要復(fù)雜的儀器?？蓹z測到的最低濃度為20ng／ml，靈敏度為99．05%，特異性為98．83%。