實驗五　尿生成影響因素的分析

實驗?zāi)康?/p>

觀察神經(jīng)、體液因素對尿生成的影響，進一步認識和理解尿生成的調(diào)節(jié)。

實驗原理

尿生成的過程包括腎小球濾過，腎小管和集合管的重吸收以及腎小管、集合管分泌三個環(huán)節(jié)。任何影響這些過程的因素都會影響尿液的生成，引起尿量的變化。影響腎小球濾過的主要因素有有效濾過壓（腎小球毛細血管壓、腎小囊囊內(nèi)壓、血漿膠體滲透壓）、腎血漿流量以及濾過膜的面積與通透性。臨床上常常通過觀察尿量來了解患者的腎臟、血壓等情況，亦用來作為重癥或休克患者的監(jiān)護指標。

實驗對象

家兔。

實驗器材與藥品

BL－420生物信號采集與處理系統(tǒng)；壓力換能器、刺激電極、計滴器；哺乳類動物手術(shù)器械1套、兔手術(shù)臺、動脈夾、動脈插管和輸尿管插管、鐵架臺、培養(yǎng)皿；注射器（1mL、20mL）、靜脈注射滴定管；尿糖試紙、生理鹽水、紗布、20%葡萄糖、1∶10 000去甲腎上腺素、1%肝素鹽水溶液、20%氨基甲酸乙酯溶液、1%呋塞米、神經(jīng)垂體素。

實驗步驟

1．麻醉與固定

家兔稱重。家兔耳緣靜脈注射20%氨基甲酸乙酯溶液（5mL／kg）進行麻醉，待家兔麻醉后，將其仰臥位固定于兔手術(shù)臺上。剪去頸部、下腹部的毛。

2．手術(shù)

1）分離頸部的神經(jīng)和血管，行頸總動脈插管

沿頸正中線切開皮膚5～7cm，鈍性分離皮下組織和肌肉，暴露氣管并進行氣管插管。在氣管兩側(cè)，分離出右側(cè)迷走神經(jīng)和兩側(cè)頸總動脈，穿線備用。把充滿肝素鹽水溶液的動脈插管插到左側(cè)頸總動脈內(nèi)，結(jié)扎固定，留待記錄血壓的變化。

2）尿液收集方法

（1）膀胱插管　從恥骨聯(lián)合向上，將下腹部中線的皮毛剪掉，沿腹白線自恥骨聯(lián)合向上作一長約3cm的切口，打開腹腔；找到膀胱，將膀胱拉出腹壁外，仔細辨認輸尿管，分離其周圍組織，在輸尿管下方穿線，然后將膀胱上提，用線結(jié)扎膀胱出口，以防尿液從尿道排出。在膀胱頂部避開血管做一切口（圖4－5），插入膀胱插管，并用線結(jié)扎固定。將其插管連接到記滴器上。

圖4－5　膀胱切口

（2）尿道插管導(dǎo)尿法　將用液體石蠟潤滑頭端的導(dǎo)尿管，從尿道外口經(jīng)尿道插入膀胱，可見尿液流出。將導(dǎo)尿管連接到計滴器上，計滴器的引導(dǎo)連線插入“計滴”插孔。

（3）輸尿管插管　在恥骨聯(lián)合上緣向上沿正中切線切開皮膚4～8cm，剪開腹壁（勿損傷腹內(nèi)臟器），在膀胱底部找出兩側(cè)輸尿管，把一根已充滿生理鹽水的輸尿管插管插入輸尿管，結(jié)扎固定。按相同的方法，插入另一側(cè)輸尿管；用線把兩側(cè)插管的另一側(cè)開口端結(jié)扎在一起，并接入計滴器的玻璃管內(nèi)。手術(shù)完畢后，用生理鹽水紗布覆蓋腹部創(chuàng)口。把連接計滴器的輸入線插到電腦BL－420生物信號采集與處理系統(tǒng)前面板的計滴輸入插口，記錄尿滴數(shù)。

3）使用BL－420生物信號采集與處理系統(tǒng)

選擇“實驗項目”菜單中的“泌尿?qū)嶒灐辈藛雾?，以彈出“泌尿?qū)嶒灐弊硬藛巍Ｔ凇懊谀驅(qū)嶒灐弊硬藛沃羞x擇“影響尿生成的因素”實驗?zāi)K。啟動信號采集，觀察并記錄血壓和尿滴信號。根據(jù)信號窗口中顯示的波形，再適當(dāng)調(diào)節(jié)實驗參數(shù)以獲得最佳的實驗效果。

實驗觀察項目

（1）記錄尿量、血壓的正常數(shù)據(jù)。

（2）靜脈注射生理鹽水：從耳緣靜脈緩慢輸入38℃生理鹽水20～50mL，觀察血壓和尿量的變化。

（3）電刺激迷走神經(jīng)外周端：在尿量恢復(fù)后，電刺激迷走神經(jīng)外周端（在“設(shè)置刺激器參數(shù)”對話框中調(diào)節(jié)實驗參數(shù)，采用串脈沖刺激，電壓2～10V，頻率5～30Hz，串長10～30個。調(diào)節(jié)完畢，單擊工具條上的“啟動停止刺激”命令按鈕），使血壓明顯下降（降至約6．8kPa或50mmHg）15～20s，觀察血壓和尿量的變化。

（4）靜脈注射葡萄糖與尿糖定性實驗：取尿液2滴至尿糖試紙，觀察顏色變化。然后靜脈注射20%葡萄糖5mL，觀察血壓和尿量的變化。待尿量明顯增多時，再取尿液2滴做尿液定性實驗。

（5）靜脈注射去甲腎上腺素：靜脈注射1∶10 000去甲腎上腺素0．2mL，觀察血壓和尿量的變化。

（6）靜脈注射呋塞米：靜脈注射1%呋塞米0．5mL／kg，5min后觀察血壓和尿量的變化。

（7）靜脈注射神經(jīng)垂體素：靜脈注射神經(jīng)垂體素2U，觀察血壓和尿量的變化。

（8）右側(cè)頸總動脈放血：做右側(cè)頸總動脈插管，結(jié)扎固定。從右側(cè)頸總動脈放血至血壓明顯下降，觀察尿量變化。

（9）從右側(cè)頸總動脈輸回所放的血：觀察輸血過程中尿量的變化。

注意事項

（1）實驗前多喂家兔水和蔬菜，以增加基礎(chǔ)尿量。

（2）嚴格按照本實驗步驟順序做實驗，以更好地觀察各因素對血壓和尿量的影響效果。

（3）在前一項實驗處理的作用基本消失以后，再做下一項實驗。

（4）注射20%葡萄糖后，應(yīng)用新的容器來盛尿，以便做尿糖測定。

（5）盛接動脈放血的容器應(yīng)加入一定量的肝素抗凝，并在放血過程中，輕輕搖動容器以使肝素和血液均勻地混合。

（6）分離輸尿管時要小心，避免把血管錯當(dāng)輸尿管；輸尿管插管時應(yīng)避免將插管插入管壁的肌層，插管后觀察是否有尿液流出，借以判斷導(dǎo)管是否插入到管腔內(nèi)。

思考題

1．對于休克腎患者，使用呋塞米后未能增加尿量，能否繼續(xù)加大該藥使用劑量？為什么？

2．想一想電刺激迷走神經(jīng)與放血對尿生成的影響有何不同？其機制是怎樣的？

3．切除動物的一側(cè)腎臟，尿生成會有什么影響，為什么？

（王曉梅　張　健　李　慧）