第三節(jié)　傳染病的診斷

動(dòng)物傳染病的診斷就是依靠人的感官或利用其他方法對(duì)患病動(dòng)物進(jìn)行檢查，從而作出診斷。及時(shí)、準(zhǔn)確、有效的診斷是撲滅動(dòng)物傳染病工作成敗的關(guān)鍵。及時(shí)準(zhǔn)確診斷動(dòng)物傳染病能有效地組織撲滅措施，做到有的放矢，從而盡早有效、徹底地控制乃至消滅動(dòng)物傳染病。若診斷不準(zhǔn)確或不及時(shí)，將延誤撲滅動(dòng)物傳染病的有效時(shí)機(jī)，影響撲滅措施的有效組織。診斷動(dòng)物傳染病的常用方法有：臨床診斷、流行病學(xué)診斷、病理學(xué)診斷、病原學(xué)診斷和免疫學(xué)診斷等。診斷的方法很多，在實(shí)際工作過程中，需根據(jù)某種動(dòng)物傳染病的特點(diǎn)采用幾種方法進(jìn)行綜合診斷，有時(shí)僅需要采用其中一兩種方法便可作出準(zhǔn)確診斷?，F(xiàn)將常用的診斷方法簡(jiǎn)介如下。

一、臨床診斷

這是最基本、最簡(jiǎn)便易行的方法，也是動(dòng)物傳染病診斷的起點(diǎn)和基礎(chǔ)。它是利用人的感官或借助一些最簡(jiǎn)單的器械，如溫度計(jì)、聽診器等直接對(duì)患病動(dòng)物進(jìn)行檢查，有時(shí)也需要結(jié)合血、尿、糞的常規(guī)檢查方可作出診斷，對(duì)某些具有典型癥狀的病例，通過臨床診斷一般可以確診，如破傷風(fēng)、放線菌病、馬腺疫、豬氣喘病等。但應(yīng)當(dāng)指出的是，這種方法有一定的局限性和片面性，如對(duì)發(fā)病初期特征性癥狀尚不明顯的病例和非典型病例；通過臨床診斷難以確診，只能提出可疑動(dòng)物傳染病的大致范圍，必須結(jié)合其他方法才能作出確診。在進(jìn)行臨床診斷時(shí)，應(yīng)注意對(duì)整個(gè)發(fā)病動(dòng)物群所表現(xiàn)的綜合癥狀加以分析判斷，不要單憑個(gè)別或少數(shù)病例的癥狀輕易下結(jié)論，防止誤診。

二、流行病學(xué)診斷

流行病學(xué)診斷經(jīng)常與臨床診斷是聯(lián)系在一起的。流行病學(xué)診斷是在流行病學(xué)調(diào)查疫情調(diào)查）的基礎(chǔ)上進(jìn)行的，疫情調(diào)查可在臨床診斷過程中進(jìn)行，如以座談的方式向畜主詢問疫情，并對(duì)疫情發(fā)生的現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行仔細(xì)檢查，取得第一手資料，然后對(duì)材料進(jìn)行分析，作出診斷。由于動(dòng)物傳染病不同，流行病學(xué)診斷的重點(diǎn)也不一樣。一般應(yīng)調(diào)查以下幾個(gè)問題：

（一）本次流行的情況

最初發(fā)病的時(shí)間、地點(diǎn)和隨后蔓延的情況，以及目前的疫情分布。疫區(qū)內(nèi)各種動(dòng)物的數(shù)量和分布情況、發(fā)病動(dòng)物的種類、數(shù)量、年齡、性別。查明其感染率、發(fā)病率、病死率和死亡率以及治療效果等。

（二）疫情來(lái)源

本地過去曾否發(fā)生過類似的動(dòng)物傳染病？何時(shí)何地？流行情況如何？是否經(jīng)過確診？有無(wú)歷史資料可查？何時(shí)采取過何種防治措施？效果如何？如本地未發(fā)生過，附近地區(qū)曾否發(fā)生？這次發(fā)病前，是否在其他地方引進(jìn)動(dòng)物、畜產(chǎn)品或飼料？輸出地有無(wú)類似的動(dòng)物傳染病存在。

（三）傳播途徑和方式

本地有關(guān)各類動(dòng)物的飼養(yǎng)管理方法，使役和放牧情況，牲畜流動(dòng)、收購(gòu)以及防疫衛(wèi)生情況如何？交通檢疫、市場(chǎng)檢疫和屠宰檢驗(yàn)的情況如何？死病畜處理情況如何？有哪些助長(zhǎng)動(dòng)物傳染病傳播蔓延的因素和控制動(dòng)物傳染病的經(jīng)驗(yàn)？疫區(qū)的地理、地形，氣候，河流、交通、植被和野生動(dòng)物、節(jié)肢動(dòng)物等的分布和活動(dòng)情況，它們與動(dòng)物傳染病的發(fā)生及蔓延傳播有無(wú)關(guān)系。

綜上所述，可以看出，疫情調(diào)查不僅可以為流行病學(xué)診斷提供依據(jù)，而且也能為擬定防治措施提供依據(jù)。

三、病理學(xué)診斷

大多數(shù)的動(dòng)物傳染病都有不同程度的特殊病理剖檢變化，對(duì)于診斷動(dòng)物傳染病具有重要價(jià)值，如雞新城疫、豬瘟、禽霍亂、豬氣喘病等。但有些病例，如最急性和非典型病例，其病理變化不太典型，尤其是非典型病例，需多剖檢一些病例進(jìn)行綜合分析，方可發(fā)現(xiàn)某病典型病理變化，如非典型雞新城疫。

病理組織學(xué)診斷是經(jīng)典的診斷方法之一，主要是通過顯微鏡觀察病料組織切片中的特征性顯微病變和特殊結(jié)構(gòu)，借以診斷或區(qū)別不同的傳染病。目前病理組織學(xué)診斷對(duì)某些傳染病仍是最主要和可靠的診斷方法，例如狂犬病和牛海綿狀腦病。

四、病原學(xué)診斷

病原學(xué)檢查是診斷動(dòng)物傳染病最重要的方法之一，是確診動(dòng)物傳染病的重要依據(jù)。在進(jìn)行病原學(xué)診斷時(shí)，首先要正確采取病料進(jìn)行包裝和送檢，否則會(huì)直接影響檢查結(jié)果的準(zhǔn)確性。病料力求新鮮，盡量在瀕死期或死亡時(shí)立即采取。病料采取時(shí)要注意滅菌操作，防止污染，用具、器械等盡可能嚴(yán)格消毒。根據(jù)流行病學(xué)、臨診和剖檢的不完整資料而懷疑的動(dòng)物傳染病，應(yīng)按其特性采取含病原體多、病變較明顯的臟器或組織。如豬瘟病例，可采取淋巴結(jié)和脾臟；雞新城疫和鴨瘟可取整個(gè)頭部、肝和脾；水泡病可取水泡液或水泡皮；痘病可取痘痂；結(jié)核病可取結(jié)核病灶等。對(duì)于缺乏臨診資料、流行病學(xué)資料、剖檢又無(wú)明顯病變難以提出懷疑病種時(shí)，應(yīng)按敗血癥動(dòng)物傳染病較全面地取肝、脾、胃、肺、血液、腦及淋巴結(jié)等。特別需要注意的是懷疑為炭疽則禁止剖檢，只割取一只耳朵則可，且局部要徹底消毒。常用病原學(xué)診斷方法如下：

（一）病料涂片鏡檢

通常在有顯著病變的不同組織器官和不同部位涂抹數(shù)片，進(jìn)行染色鏡檢。此法對(duì)于一些具有特征性形態(tài)的病原微生物（如炭疽桿菌、巴氏桿菌等）可以迅速作出診斷，但對(duì)大多數(shù)動(dòng)物傳染病來(lái)說，只能提供進(jìn)一步檢查的依據(jù)或參考。

（二）分離培養(yǎng)和鑒定

用人工培養(yǎng)方法將病原體從病料中分離出來(lái)。細(xì)菌、真菌、螺旋體等可選擇適當(dāng)?shù)娜斯づ囵B(yǎng)基，病毒可先用動(dòng)物或組織培養(yǎng)等方法分離培養(yǎng)，分得病原體后，再進(jìn)行形態(tài)學(xué)、培養(yǎng)特性、動(dòng)物接種及免疫學(xué)試驗(yàn)等方法作出鑒定。

（三）動(dòng)物接種試驗(yàn)

通常選擇對(duì)該種動(dòng)物傳染病病原體最敏感的動(dòng)物進(jìn)行人工感染試驗(yàn)。將病料用適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行人工接種，然后根據(jù)對(duì)不同動(dòng)物的致病力、癥狀和病理變化特點(diǎn)來(lái)幫助診斷。當(dāng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物死亡或經(jīng)一定時(shí)間殺死后，觀察其體內(nèi)變化，并采取病料進(jìn)行涂片檢查和分離鑒定。

一般應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)小動(dòng)物有家兔、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、家禽、鴿子等，在實(shí)驗(yàn)小動(dòng)物對(duì)該病原體無(wú)感受性時(shí)，可以采用有易感性的大動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)，但費(fèi)用大，而且需要嚴(yán)格的隔離條件和嚴(yán)格的消毒措施，因此只有在非常必要時(shí)和條件許可時(shí)才能進(jìn)行。

從病料中分離出微生物，雖是確診的重要依據(jù)，但也應(yīng)注意動(dòng)物的“健康帶菌”現(xiàn)象，其結(jié)果還需與臨診及流行病學(xué)、病理變化結(jié)合起來(lái)進(jìn)行分析。有時(shí)即使沒有發(fā)現(xiàn)病原體，也不能完全否定該種動(dòng)物傳染病的診斷。

（四）免疫組化技術(shù)

免疫組化技術(shù)是指用標(biāo)記的特異性抗體（抗原）對(duì)組織細(xì)胞內(nèi)抗原（抗體）分布進(jìn)行檢測(cè)的方法。根據(jù)標(biāo)記物的不同分為免疫熒光組化技術(shù)、免疫酶組化技術(shù)、免疫電鏡技術(shù)等。不同的免疫組化技術(shù)各自具有獨(dú)特的試劑和方法，包括抗體制備、組織材料處理、免疫染色、對(duì)照試驗(yàn)及顯微觀察等。在涉及病毒、細(xì)菌和原生生物等抗原的檢測(cè)或鑒定中，該技術(shù)具有以下幾方面的優(yōu)點(diǎn)：樣品運(yùn)送方便；能夠安全地控制對(duì)人員具有潛在致病作用的病原體；使樣品的保存和回顧性研究成為可能；診斷快速；能夠?qū)o(wú)活性的病原體進(jìn)行檢測(cè)。隨著單克隆抗體技術(shù)的發(fā)展，免疫組化技術(shù)在動(dòng)物疫病診斷方面的應(yīng)用將愈來(lái)愈廣泛。

五、免疫學(xué)診斷

免疫學(xué)診斷是動(dòng)物傳染病診斷和檢疫中常用的重要方法，包括血清學(xué)試驗(yàn)和變態(tài)反應(yīng)兩類。

（一）血清學(xué)試驗(yàn)

利用抗原和抗體特異性結(jié)合的免疫學(xué)反應(yīng)進(jìn)行診斷?？梢杂靡阎乖瓉?lái)測(cè)定被檢動(dòng)物血清中的特異性抗體，也可以用已知的抗體（免疫血清）來(lái)測(cè)定被檢材料中的抗原。血清學(xué)試驗(yàn)有中和試驗(yàn)（毒素抗毒素中和試驗(yàn)、病毒中和試驗(yàn)等）；凝集試驗(yàn)（直接凝集試驗(yàn)、間接凝集試驗(yàn)、間接血凝試驗(yàn)）；沉淀試驗(yàn)（環(huán)狀沉淀試驗(yàn)、瓊脂擴(kuò)散沉淀試驗(yàn)）；溶細(xì)胞試驗(yàn)（溶菌試驗(yàn)、溶血試驗(yàn)）；補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)以及免疫熒光試驗(yàn)、免疫酶技術(shù)、放射免疫測(cè)定、單克隆抗體和核酸探針等。

（二）變態(tài)反應(yīng)

動(dòng)物患某些動(dòng)物傳染?。ㄖ饕锹詣?dòng)物傳染病）時(shí)，可對(duì)該病病原體或其產(chǎn)物的再次進(jìn)入產(chǎn)生強(qiáng)烈的反應(yīng)。能引起變態(tài)反應(yīng)的物質(zhì)稱變態(tài)原，如結(jié)核菌素，將其注入患病畜，可引起局部或全身反應(yīng)。