五、無病毒苗木的繁育

蘋果是多年生作物，在遺傳上是高度雜合體，并且一般需要異花授粉才能結(jié)實(shí)，所以采用種子繁育后代會產(chǎn)生變異，導(dǎo)致經(jīng)濟(jì)性狀下降。因此，為了保持品種特性，需要進(jìn)行嫁接繁殖。一株蘋果苗有兩部分組成，上部為嫁接的品種，下部為砧木。蘋果樹在長期的繁殖和生長發(fā)育過程中，會感染病毒而產(chǎn)生病毒病害，病毒病害對蘋果樹的生長發(fā)育和果實(shí)的產(chǎn)量和質(zhì)量有不良的影響。病毒是一類特殊的微生物，由核酸和蛋白質(zhì)外殼組成，病毒侵入寄主細(xì)胞后，利用寄主細(xì)胞的基礎(chǔ)物質(zhì)合成新的病毒粒子，從而使寄主發(fā)病。蘋果病毒有30余種，目前我國鑒定明確的有6種：蘋果銹果病毒、蘋果花葉病毒、蘋果綠縮果病毒是非潛隱性病毒，發(fā)病后外觀有明顯的癥狀；蘋果褪綠葉斑病毒、蘋果莖痘病毒、蘋果莖溝病毒是潛隱性病毒，外觀無明顯癥狀。所以，建立無病毒苗木繁育體系、健全無病毒檢疫檢驗(yàn)制度、培育無病毒原種、防止果苗帶毒和人為傳播是防止和克服果樹病毒病危害的根本措施。

1.建立無病毒果苗繁育體系

無病毒果苗有兩個(gè)來源，一是國內(nèi)外引進(jìn)無病毒繁殖材料（砧木或接穗），經(jīng)過檢測確認(rèn)不帶病毒后，可作為無病毒原種妥善保存和繁殖利用；二是生產(chǎn)中選擇優(yōu)良品種母株，進(jìn)行脫毒處理和嚴(yán)格病毒檢測后，將確認(rèn)不帶病毒的單系作為無病毒原種，供繁殖和利用。

無病毒苗木繁育體系主要包括：無病毒原種培育、引進(jìn)、保存和病毒檢測；無病毒品種采穗圃；無病毒砧木種子園；無病毒無性系砧木母本園和無病毒苗木繁殖圃等部分。

2.無病毒果苗的培育

（1）熱處理脫毒?？裳泳彶《緮U(kuò)散速度并抑制病毒增殖，使果樹生長速度超過病毒的擴(kuò)散速度，達(dá)到正在生長的果樹組織不含病毒的目的。之后，再將不含病毒組織取下，培養(yǎng)成無病毒個(gè)體。主要過程如下：

①將擬行熱處理的砧木或品種枝條嫁接于盆栽砧木上，培育成供試盆栽苗木。

②于2～3月，將解除休眠的供試盆栽苗移入15℃～28℃的溫室，促其萌發(fā)生長。待新梢長至5厘米時(shí)移入熱處理箱中，溫度控制在37±1℃，相對濕度保持60%～80%，處理時(shí)間4周以上?？擅撊ザ喾N潛隱性病毒。熱處理時(shí)間愈長，脫毒效果愈高，但脫毒材料受熱死亡也愈多。在這一溫度條件下，蘋果新梢的生長不會受到嚴(yán)重影響，而病毒卻被鈍化，蘋果新梢的生長速度比病毒向頂端擴(kuò)展的速度快，在新梢的頂端就會出現(xiàn)無病毒的區(qū)域。

③切取熱處理期間長出的新梢頂端10～20毫米作接穗，在準(zhǔn)備好的盆栽實(shí)生砧木上實(shí)行嫩梢嫁接。

④經(jīng)過熱處理的嫩梢嫁接成活后，長至50～60厘米高時(shí)，采取脫毒苗新葉，進(jìn)行檢測，淘汰帶毒苗。未測出病毒的脫毒苗，取其芽片嫁接于指示植物上，進(jìn)行復(fù)測。

⑤確認(rèn)無病毒以后，可作為無病毒母本樹，繁殖無病毒苗木。

（2）莖尖組培脫毒。果樹莖尖生長點(diǎn)大多不帶病毒或病毒濃度很低，無病毒部分一般為莖尖的0.1～0.2毫米，通常多切取帶有兩個(gè)葉原基進(jìn)行組織培養(yǎng)。

（3）熱處理與組織培養(yǎng)相結(jié)合脫毒。常用兩種方法，一是切取經(jīng)過熱處理后長出的新梢0.5～0.8毫米的莖尖，進(jìn)行組織培養(yǎng)。二是先將微莖尖組織培養(yǎng)分化成叢狀苗，將其繼代苗放入37±1℃恒溫光照培養(yǎng)箱中熱處理，再切取0.3～0.5毫米莖尖組織培養(yǎng)并準(zhǔn)備病毒檢測。

（4）莖尖嫁接脫毒。用微小的莖尖作接穗，嫁接于組培無毒苗幼嫩砧木上，培養(yǎng)成無病毒苗木并擴(kuò)大繁殖。