四、RNAi在干細(xì)胞研究中的應(yīng)用

果蠅Agronaute家族成員Piwi是干細(xì)胞保持自我更新、不對稱分裂等所必需的，Piwi過表達(dá)引起干細(xì)胞增殖、分裂；與Piwi同源的鼠Agronaute家族成員Miwi和Mili則調(diào)控精子原始生殖細(xì)胞的發(fā)生，Miwi是精子發(fā)生的主要調(diào)控分子。

鼠未分化的EC細(xì)胞和ES細(xì)胞通過dsRNA誘導(dǎo)RNAi引起特異基因沉默，分離細(xì)胞和免疫定位發(fā)現(xiàn)Dicer位于細(xì)胞質(zhì)。在人類干細(xì)胞的研究中發(fā)現(xiàn)Agronaute家族成員Hiwi在原始造血干細(xì)胞（CD³⁴＋骨髓干細(xì)胞）表達(dá)，而在已分化的血細(xì)胞不表達(dá)。表明Hiwi基因表達(dá)參與原始造血干細(xì)胞的分化。

Zaehres H等用慢病毒載體介導(dǎo)siRNA特異性沉默人胚胎干細(xì)胞中Oct4和Nanog基因的表達(dá)，Oct4或Nanog基因沉默后導(dǎo)致胚胎干細(xì)胞的分化，證明Oct4或Nanog參與胚胎干細(xì)胞的自我更新（圖13－8）。

圖13－8　Oct4和Nanog參與胚胎干細(xì)胞的自我更新

RNAi技術(shù)比反義核苷酸技術(shù)和基因敲除等更快更方便地使基因表達(dá)沉默或基因表達(dá)降低，從而為干細(xì)胞相關(guān)基因功能的研究提供了十分有效的工具。RNAi技術(shù)不僅用于干細(xì)胞基因調(diào)控機(jī)制的研究，而且也可用于干細(xì)胞分化及其細(xì)胞和基因治療的研究。例如：用dsRNA使基因沉默研究干細(xì)胞的分化；利用RNAi技術(shù)對干細(xì)胞的基因做某些修飾，破壞細(xì)胞中表達(dá)組織相容性復(fù)合物的基因，創(chuàng)建“萬能供者細(xì)胞”，即躲避受者免疫系統(tǒng)的監(jiān)視，從而防止免疫排斥效應(yīng)。