三、pH對(duì)酶活性的影響

（一）實(shí)驗(yàn)原理

酶的活性受環(huán)境pH值的影響極為顯著。不同酶的最適pH值不同。本實(shí)驗(yàn)觀察pH值對(duì)唾液淀粉酶活性的影響，唾液淀粉酶的最適pH值約為6～8（不同緩沖液中略有變化）。

（二）實(shí)驗(yàn)藥品、實(shí)驗(yàn)設(shè)備

1．溶于0.3％氯化鈉的0.5％淀粉溶液（現(xiàn)用現(xiàn)配）；

2．稀釋200倍的新鮮唾液；

3．0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液；

4．0.1mol/L檸檬酸溶液；

5．碘化鉀-碘溶液；

6．pH試紙：pH值分別為5、5.8、6.8以及8的試紙共4種；

7．試管及試管架，吸管，滴管，50mL錐形瓶，恒溫水浴。

（三）實(shí)驗(yàn)方法

取4個(gè)50mL錐形瓶。用吸管按表3-2所示順序和劑量加入0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液和0.1mol/L檸檬酸溶液以制備pH值為5.0～8.0的4種緩沖液。

從4個(gè)錐形瓶中各取緩沖液3mL，分別注入4支帶有號(hào)碼的試管中，隨后于每個(gè)試管中添加0.5％淀粉溶液2mL和稀釋200倍的唾液2mL。向各試管中加入稀釋唾液的時(shí)間間隔各為1min。將各試管內(nèi)容物混勻，并依次置于37℃恒溫水浴中保溫。

第4管加入唾液2min后，每隔1min由第3管取出1滴混合液，置于白瓷板上，加1小滴碘化鉀-碘溶液，檢驗(yàn)淀粉的水解程度。待混合液變?yōu)樽攸S色時(shí)，向所有試管依次添加1～2滴碘化鉀-碘溶液。添加碘化鉀-碘溶液的時(shí)間間隔，從第1管起，亦均為1min。

觀察各試管內(nèi)容物呈現(xiàn)的顏色，分析pH對(duì)唾液淀粉酶活性的影響。

表3-2　pH對(duì)酶活性的影響

（四）實(shí)驗(yàn)記錄