三、雙縮脲反應(yīng)

（一）實(shí)驗(yàn)原理

將尿素加熱至180℃左右，生成雙縮脲并放出一分子氨。雙縮脲在濃堿液中能與Cu²⁺結(jié)合生成紫色或紫紅色化合物，這一呈色反應(yīng)稱為雙縮脲反應(yīng)。凡含有兩個(gè)肽鍵（—CO—NH—）以上的化合物都有雙縮脲反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子中有肽鍵，其結(jié)構(gòu)與雙縮脲相似，也能發(fā)生此反應(yīng)，反應(yīng)式見下頁所示。

雙縮脲反應(yīng)不僅為含有兩個(gè)以上肽鍵的物質(zhì)所有，除肽鍵外，有些基團(tuán)如含有一個(gè)肽鍵和一個(gè)—CS—NH₂或—CH₂—NH₂或—CRH—NH₂或—CH₂—NH—CHNH₂—CH₂OH或—CHOHCH₂NH₂等基團(tuán)的物質(zhì)以及乙二酰二胺等物質(zhì)也有此反應(yīng)。NH₃也干擾此反應(yīng)，因?yàn)镹H₃與Cu²⁺可生成暗藍(lán)色的絡(luò)離子Cu（NH₃）42+。因此，一切蛋白質(zhì)或二肽以上的物質(zhì)都有雙縮脲反應(yīng)，但有雙縮脲反應(yīng)的物質(zhì)不一定都是蛋白質(zhì)或多肽。

（二）實(shí)驗(yàn)藥品

1．尿素；

2．10％氫氧化鈉溶液；

3．1％硫酸銅溶液；

4．雞蛋白溶液（雞蛋清∶水＝1∶10）。

（三）實(shí)驗(yàn)方法

1．取小試管1支（編為一號），加小匙尿素，小火加熱至熔，繼續(xù)加熱使之凝固，停止加熱，尿素放出氨，形成雙縮脲。冷卻后，加10％氫氧化鈉溶液約1mL，振蕩混勻，再加1％硫酸銅溶液1滴，再振蕩。觀察出現(xiàn)的粉紅顏色。避免添加過量硫酸銅，否則，生成的藍(lán)色氫氧化銅能掩蓋粉紅色。

2．另取小試管1支（編為二號），加1∶10雞蛋白液2滴，10％氫氧化鈉溶液5滴，搖勻，再加1％硫酸銅溶液1滴，混勻后，呈紫紅色的雙縮脲反應(yīng)。

（四）實(shí)驗(yàn)記錄