實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目十三　吸附層析法分離胡蘿卜素

學(xué)習(xí)目標(biāo)

【知識(shí)目標(biāo)】

（1）能用自己的語言描述吸附層析法的原理。

（2）能夠迅速而準(zhǔn)確地陳述吸附層析法的實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)。

（3）能夠準(zhǔn)確鑒別吸附層析法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并能說明意義。

【能力目標(biāo)】

（1）能夠正確完成吸附層析法的各項(xiàng)操作內(nèi)容，做到步驟正確、動(dòng)作連貫協(xié)調(diào)、內(nèi)容全面無遺漏。

（2）能夠正確操作吸附層析技術(shù)，清楚有哪些注意事項(xiàng)。

（3）能夠正確分析影響吸附層析結(jié)果的各個(gè)因素。

案例引導(dǎo)

麻黃是我國特產(chǎn)的一種中藥，常用于治療風(fēng)寒感冒、胸悶喘咳、中風(fēng)水腫、支氣管哮喘等病。麻黃的主要有效成分是麻黃堿和偽麻黃堿兩種含氮甲基類生物堿。工業(yè)上的生產(chǎn)需要對(duì)麻黃中的麻黃堿進(jìn)行清潔、安全和有效的分離。結(jié)合所學(xué)知識(shí)，思考可用何種方法進(jìn)行分離。

（提示：吸附層析法）

【實(shí)驗(yàn)原理】

用乙醇、石油醚和丙酮等有機(jī)溶劑可將胡蘿卜、辣椒及綠葉蔬菜中的胡蘿卜素和其他一些植物色素提取出來，這些色素能被Al₂O₃吸附。因?yàn)楹}卜素與其他植物色素的化學(xué)結(jié)構(gòu)不同，它們被Al₂O₃吸附的強(qiáng)度以及在有機(jī)溶劑中的溶解度均不同，所以將提取液利用氧化鋁層析，再用石油醚等沖洗層析柱，可分離成不同色帶。其中，胡蘿卜素被吸附程度最差，色帶在最前面，最先被洗脫。

【實(shí)驗(yàn)器材】

1cm×16cm層析柱，40～60mL分液漏斗，干燥試管，研缽。

【藥品及試劑】

95%乙醇，石油醚及1%丙酮石油醚，Al₂O₃，無水Na₂SO₄。

【試劑配制】

（1）無水Na₂SO₄：120℃下烘干2h備用。

（2）Al₂O₃：120℃下烘干2h備用。

操作流程

【操作步驟】

（1）稱取干紅辣椒皮2.0g，剪碎后放入研缽中，加95%乙醇4.0mL，研磨至提取液呈深紅色，再加石油醚6mL研磨3～5min。此時(shí)，若石油醚揮發(fā)過多，可再加4 mL左右，提取液顏色越深則表示提取的胡蘿卜素越多。取出提取液，置于40～60 mL分液漏斗中，用20mL蒸餾水洗滌數(shù)次，直至水層透明為止，以除去提取液中的乙醇。將紅色石油醚自分液漏斗上口倒入干燥試管中，加少量無水Na₂SO₄除去水分，塞緊管口以免石油醚揮發(fā)。

（2）層析柱的制備：取1cm×16cm玻璃層析柱，在其底部放置少量棉花，然后倒入石油醚氧化鋁混懸液，氧化鋁即均勻沉積于管內(nèi)，柱高要達(dá)到10cm左右。在柱床上鋪一張圓形濾紙片，將柱垂直夾在鐵架臺(tái)上備用。

（3）層析：當(dāng)層析柱中石油醚液面與柱床相切時(shí)，立即用吸量管吸取紅色石油醚提取液1.0mL，沿管壁加入層析柱上端。待提取液完全流入層析柱即用1%丙酮石油醚沖洗，使吸附在柱上的色素物質(zhì)逐漸展開成為數(shù)條顏色不同的色帶。

【實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理及結(jié)果分析】

仔細(xì)觀察色帶的位置、寬度與顏色深淺。

【注意事項(xiàng)】

（1）先用高溫處理Al₂O₃以除去水分，提高其吸附力。

（2）石油醚提取液中的乙醇必須洗凈，否則吸附不好，色帶也彌散不清。

（3）展開溶媒中丙酮可增強(qiáng)洗脫效果，但含量不宜過高，以免洗脫過快而使色帶分離不清。

【實(shí)驗(yàn)意義】

層析法在醫(yī)藥領(lǐng)域有很廣泛的應(yīng)用，特別是在中醫(yī)藥化學(xué)成分的分離分析上，有重要的作用。

能力檢測(cè)

一、單項(xiàng)選擇題

1.下列關(guān)于吸附層析法分離物質(zhì)的原理敘述正確的是（　?。?/p>

A.不同物質(zhì)有不同的吸附強(qiáng)度以及在有機(jī)溶劑中的溶解度不同

B.不同物質(zhì)與固定相的結(jié)合力不同

C.根據(jù)不同物質(zhì)分子大小不同進(jìn)行分離

D.根據(jù)不同物質(zhì)帶電量不同進(jìn)行分離

E.根據(jù)物質(zhì)重量不同進(jìn)行分離

2.靈敏度是指（　?。?。

A.樣品測(cè)定值與標(biāo)準(zhǔn)值的符合程度

B.樣品測(cè)定值與平均值的偏差

C.某一實(shí)驗(yàn)方法的最小測(cè)出量

D.檢測(cè)物與其對(duì)應(yīng)物之間選擇性反應(yīng)

E.樣品測(cè)定值與平均值的符合程度