皮膚作為人體最大的組織，是與外界環(huán)境接觸的屏障。當(dāng)由于外界損傷或疾病等因素造成皮膚缺損時（如燒傷），常常造成創(chuàng)面水分、電解質(zhì)及蛋白質(zhì)丟失，開放的創(chuàng)面還增加了感染的概率。早期、有效地封閉創(chuàng)面可以減少上述并發(fā)癥的發(fā)生，臨床上常用的是凡士林紗布和斷層／全厚皮片，其中自體斷層皮片移植是公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)療法。但在大面積皮膚缺損患者，仍存在著供區(qū)不足及造成機(jī)體新的損傷等缺陷。因此，尋找一種理想的皮膚代用品一直是臨床上一個急需解決的難題。

隨著細(xì)胞生物學(xué)、材料學(xué)、生物化學(xué)、生物工程學(xué)、移植學(xué)的飛速發(fā)展，特別是近25年來，人們對表皮角質(zhì)形成細(xì)胞的生物學(xué)特性、人工材料的加工與合成等有了更深入的認(rèn)識，使在體外構(gòu)建組織工程皮膚成為可能。組織工程化皮膚領(lǐng)域的研究一直是組織工程學(xué)的一個重點和熱點，用組織工程技術(shù)構(gòu)建的皮膚組織已有多種產(chǎn)品問世。考慮到皮膚的結(jié)構(gòu)和功能特點，“理想”的組織工程化皮膚應(yīng)具備以下特征：①能防止體液丟失；②有效阻止細(xì)菌入侵；③提供“現(xiàn)貨供應(yīng)”（off　the shelf）；④較長的儲備時間；⑤無抗原性；⑥在創(chuàng)面持久存在；⑦一定的柔韌度；⑧容易獲取，價格能為大多數(shù)人所接受；⑨隨兒童的生長而生長；⑩應(yīng)用方便，一次手術(shù)即可完成。

組織工程化皮膚按照不同的標(biāo)準(zhǔn)可分為：組織工程化表皮、組織工程化真皮和組織工程化復(fù)合皮膚；暫時性皮膚替代物、永久性皮膚替代物；生物性替代物和化學(xué)合成人工皮膚替代物等。幾種商品化的組織工程皮膚產(chǎn)品見表15－1。

表15－1　商品化的組織工程皮膚產(chǎn)品

一、組織工程化表皮

創(chuàng)面的再上皮化是創(chuàng)傷愈合的重要指標(biāo)。表皮可以減少體液丟失及降低感染的發(fā)生率，臨床上，愈合時間超過3周的燒傷創(chuàng)面形成增生性瘢痕的概率很高，這主要是由于缺少表皮細(xì)胞對成纖維細(xì)胞的有效調(diào)控。

重建表皮的方法很多，從表皮細(xì)胞懸液移植到包含分化完善表皮層的全厚皮片移植。雖然硅膠膜很早就被用作臨時性的表皮替代物，但永久的生物性修復(fù)仍有賴于具備活性的表皮角質(zhì)形成細(xì)胞。

1975年，Rheinwald和Green以3T3細(xì)胞作為滋養(yǎng)層連續(xù)培養(yǎng)人類表皮角質(zhì)形成細(xì)胞獲得成功，其基本方法是用胰蛋白酶消化分離表皮角質(zhì)形成細(xì)胞，以加有小牛血清、胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、氫化可的松、表皮生長因子及霍亂毒素的培養(yǎng)基，經(jīng)過培養(yǎng)得到平鋪生長的表皮細(xì)胞，再經(jīng)過傳代擴(kuò)增，得到大量表皮細(xì)胞。Green隨即提出構(gòu)想：培養(yǎng)的表皮角質(zhì)形成細(xì)胞融合成片后可用于修復(fù)自體皮膚缺損。1981年，O′Connor等首次應(yīng)用此方法在體外培養(yǎng)出適于移植的人自體表皮細(xì)胞膜片（cultured　epidermal　autograft，CEA），在2例燒傷患者的切痂后創(chuàng)面上，培養(yǎng)的表皮細(xì)胞膜片附著良好，觀察到8周時仍可見到移植的細(xì)胞膜片。組織學(xué)也證實自體表皮細(xì)胞膜片覆蓋全厚創(chuàng)面后，最終可形成分化完全的基底層、棘層、顆粒層及角質(zhì)層，但生發(fā)層缺乏突起的棘狀結(jié)構(gòu)。Woodley等觀察了4例燒傷后移植CEA患者的組織標(biāo)本。發(fā)現(xiàn)其CEA下重建的基底膜結(jié)構(gòu)都不完整，缺乏Ⅳ型膠原和錨著纖維。免疫熒光證實在CEA和真皮結(jié)合的部位有錨著纖維膠原（Ⅶ型膠原）存在，但未形成成熟的錨著纖維。

CEA移植技術(shù)的優(yōu)點是可以應(yīng)用極少量的自體標(biāo)本獲得大面積的永久性創(chuàng)面覆蓋，而且細(xì)胞可以凍存?zhèn)溆?。其缺點是獲得表皮細(xì)胞膜片的周期較長，2～3周；且形成的膜片較脆弱，不易操作；創(chuàng)面接受率低；形成真皮不完整，新生真皮的形成需要數(shù)年。

1994年，Genzyme公司將培養(yǎng)的表皮細(xì)胞膜片商業(yè)化，注冊商標(biāo)為Epicel。Epicel一般用于燒傷面積占體表面積30%以上、累及真皮深層或全層的嚴(yán)重?zé)齻?。這時缺損處喪失了再生表皮的能力，只能通過移植自體斷層皮片來覆蓋創(chuàng)面，而由于燒傷面積較大，存在著自體皮源不足的矛盾，移植CEA成為最佳選擇之一。首先取患者少量健康皮膚在體外分離、培養(yǎng)、擴(kuò)增自體表皮細(xì)胞，2～3周細(xì)胞融合成膜片后附著于凡士林紗布上，應(yīng)用于燒傷創(chuàng)面。

因為自體表皮細(xì)胞膜片培養(yǎng)需要周期較長，許多研究者嘗試培養(yǎng)異體表皮細(xì)胞膜片用于移植。排斥反應(yīng)是異體移植必須考慮的問題。排斥反應(yīng)的發(fā)生是因為主要組織相容性抗原存在所致，對于皮膚而言，免疫排斥反應(yīng)主要與表皮中的郎格漢斯細(xì)胞有關(guān)，郎格漢斯細(xì)胞是上皮組織中能夠激活免疫系統(tǒng)，正常表達(dá)HLA的惟一細(xì)胞。表皮細(xì)胞在傳代培養(yǎng)過程中，郎格漢斯細(xì)胞逐漸丟失，因此新形成的上皮組織缺乏郎格漢斯細(xì)胞，表現(xiàn)為免疫惰性，故從理論上講，培養(yǎng)的異體上皮組織能夠為受體接受。1983年Hefton最先將異體表皮細(xì)胞膜片移植成功應(yīng)用于臨床，修復(fù)了3例通常需要移植自體斷層皮片的嚴(yán)重?zé)齻麆?chuàng)面。隨后許多臨床應(yīng)用證實這種異體表皮細(xì)胞膜片的作用，受體接受率30%～100%。

該種異體表皮細(xì)胞膜片能夠冷凍保存，不需患者活檢標(biāo)本，即可為臨床提供即時可用的創(chuàng)面覆蓋物，解決了自體表皮細(xì)胞膜片培養(yǎng)周期較長的缺點。但是這種表皮細(xì)胞膜片由于缺乏真皮，存在諸如：愈合后創(chuàng)面收縮嚴(yán)重、起水皰、易于潰破等缺點。

為了克服上述問題，學(xué)者們大致探索了兩條途徑：一是結(jié)合真皮替代物以形成復(fù)合皮；二是利用液態(tài)或固態(tài)細(xì)胞投遞系統(tǒng)將亞融合狀態(tài)（pre－confluent）的表皮細(xì)胞直接種植到創(chuàng)面，即由體外培養(yǎng)轉(zhuǎn)到體內(nèi)培養(yǎng)構(gòu)建表皮。亞融合狀態(tài)的表皮細(xì)胞保持著旺盛的增生能力，還沒有因為細(xì)胞間接觸抑制而降低活力。目前，用于研究或臨床的細(xì)胞投遞系統(tǒng)又分兩種。第一種為各種合成或半合成的薄膜。如Kopp等應(yīng)用Biobrane——一種外層為硅膠薄膜、內(nèi)層由整合有牛Ⅰ型膠原顆粒的尼龍網(wǎng)組成的、長期以來在臨床上被用作臨時性敷料的雙層膜狀物；Rennekampff等應(yīng)用Polyurethane，Myers等利用透明質(zhì)酸膜等。Stark等試驗了數(shù)種薄膜，包括人工真皮Integra，Laserskin（一種含有激光微孔的透明質(zhì)酸膜）。發(fā)現(xiàn)這些薄膜在體外對細(xì)胞均無毒性，可以有效的作為底物支持表皮細(xì)胞的生長。細(xì)胞在特定的培養(yǎng)條件下，保持其旺盛的增殖潛能，待達(dá)到亞融合狀態(tài)時，可以連同薄膜一起，無需酶消化過程，直接移植到創(chuàng)面。細(xì)胞貼附到創(chuàng)面后，可以從薄膜上移行到創(chuàng)面，繼續(xù)增殖、分化以形成新生表皮。在此之前，薄膜繼續(xù)留在創(chuàng)面，對細(xì)胞起到很好的保護(hù)作用。另一種細(xì)胞投遞系統(tǒng)是由Hunyadi創(chuàng)用，Kaiser等完善并首先用于燒傷患者創(chuàng)面的纖維蛋白膠懸液（keratinocytes　fibrin　glue　suspension，KFGS），主要是由血漿提取的纖維蛋白原和凝血酶組成，市售的纖維蛋白膠將兩種成分分開包裝，兩者均為透明液體。可以利用其中之一將細(xì)胞制成懸液，然后用特制的注射器邊推注邊與另一種成分相混合，形成具有黏性的凝膠狀物。焦向陽等用細(xì)胞標(biāo)記的方法證明表皮細(xì)胞可以在這種凝膠中至少存活5d。表皮細(xì)胞的KFGS懸液涂布到創(chuàng)面后，細(xì)胞在這種網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)中繼續(xù)增殖、移行，最后形成復(fù)層的分化良好的新生上皮。KFGS不僅為細(xì)胞的生長代謝和移行提供場所和支架，而且其中的一些成分，如纖維蛋白原、纖維連接素及Ⅷ因子等對細(xì)胞功能起到一定的促進(jìn)作用。Stark利用這種方法臨床應(yīng)用10余例患者，證明可以有效封閉全厚創(chuàng)面。如果結(jié)合異體真皮，新生的皮膚組織的結(jié)構(gòu)和功能更加接近正常。

二、組織工程化真皮

1．真皮在創(chuàng)面愈合中的重要作用　真皮（dermis）位于表皮和皮下脂肪組織之間。真皮的淺層——乳頭層通過基底膜與表皮緊密相連，乳頭層是由松散交織排列的膠原構(gòu)成，真皮的深層——網(wǎng)狀層較厚，由粗大、水平排列的膠原束構(gòu)成。真皮中含有膠原纖維、彈力纖維、網(wǎng)狀纖維和無定形基質(zhì)，它的成纖維細(xì)胞合成所有這些纖維和基質(zhì)，并可對它們進(jìn)行分解代謝。真皮膠原組織堅韌而有彈性，占真皮成分的70%以上，起保護(hù)、維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，增強(qiáng)表皮外屏障的作用。真皮與表皮無論在結(jié)構(gòu)上還是在功能上都是不可分割的有機(jī)整體。

在全層皮膚缺損，真皮層通過瘢痕增生來修復(fù)（repair）受損的真皮組織，而不像表皮的愈合是通過再生（regeneration）的方式。真皮層損傷越深，愈合后的瘢痕增生越重。因此，在皮膚移植中，真皮成分是很重要的。移植物中的真皮成分越多，創(chuàng)面愈合越快，而且愈合后創(chuàng)面質(zhì)量明顯改善，形成瘢痕少，創(chuàng)面收縮輕。臨床上常采用經(jīng)處理的天然真皮或人工合成材料替代真皮，不僅能加速創(chuàng)面愈合，減少皮膚收縮，而且能減少供區(qū)皮膚切取的厚度，加快供皮區(qū)愈合。經(jīng)處理的天然真皮如Alloderm，人工合成材料有Integra、Biobrane、Dermagraft等。

2．幾類組織工程化真皮替代物

（1）脫細(xì)胞真皮基質(zhì)：尸體皮被用于皮膚缺損修復(fù)已有近百年的歷史。1942年Brown和McDowell提出應(yīng)用尸體皮作為燒傷后創(chuàng)面的應(yīng)急的臨時性覆蓋物。他們同時指出由于免疫排斥尸體皮只能在創(chuàng)面存留3到10周，“如果有朝一日能有方法使異體皮片在創(chuàng)面存活，整形外科最大的難題將被攻克?！?/p>

1974年，Burke等第一次將免疫抑制療法引入異體皮移植。盡管免疫抑制能使異體皮在燒傷后創(chuàng)面較長時間存活，但由于隨之而來的感染、膿毒血癥的巨大風(fēng)險，使這種方法未能被大多數(shù)人所接受。

Gibson和Medawar在研究中發(fā)現(xiàn)，對異體皮片的排斥主要是針對表皮與真皮中的細(xì)胞成分，而真皮中的膠原等幾乎沒有任何免疫排斥反應(yīng)。1964年，Grillo和McKhann用連續(xù)凍融法將真皮中的細(xì)胞成分殺死，然后將處理后的真皮覆蓋皮膚缺損，10d后在其上覆蓋自體斷層薄皮片。結(jié)果證明這種真皮與創(chuàng)底結(jié)合良好，自體斷層薄皮片亦成活。

在Grillo和McKhann的啟發(fā)下脫細(xì)胞真皮基質(zhì)（acellular　dermal　matrix）研究受到了許多學(xué)者的關(guān)注，脫細(xì)胞的方法也越來越完善。早期的脫細(xì)胞方法主要有反復(fù)凍融法、胰蛋白酶法等，但這些方法處理得到的脫細(xì)胞真皮基質(zhì)免疫原性較強(qiáng)，移植于創(chuàng)面后被排斥的概率高。近年來發(fā)展的方法有NaCl－SDS法及Dispase－Triton法，Robert J．W的研究指出NaCl－SDS法制備的ADM較Dispase－Triton法制備的ADM保留了相對較多的細(xì)胞外基質(zhì)成分（如laminin，Ⅳ、Ⅶ型膠原，纖維結(jié)合素等），更有利于細(xì)胞的黏附、生長，但同時與細(xì)胞相關(guān)抗原（如HLADR）的表達(dá)也相應(yīng)增加。

AlloDerm是一種商品化的脫細(xì)胞真皮基質(zhì)。新鮮尸體皮在1MNaCl中處理15h后撕去真皮，然后在室溫下于0．5%SDS中連續(xù)振搖1h去除細(xì)胞成分，PBS清洗后，凍干保存?zhèn)溆谩＝M織學(xué)檢測見AlloDerm仍保持真皮層的正常結(jié)構(gòu)，免疫組化染色表明基底膜的主要成分層粘連蛋白仍存在于脫細(xì)胞真皮基質(zhì)表面。將脫細(xì)胞真皮基質(zhì)應(yīng)用在裸鼠和豬的全層皮膚缺損創(chuàng)面的結(jié)果證實脫細(xì)胞真皮基質(zhì)能夠在創(chuàng)面成活，誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞長入、新生血管形成，能夠支持移植于其表面的表皮角質(zhì)形成細(xì)胞生長和遷移。將AlloDerm縫合在裸鼠背部的2cm×2cm的全厚皮膚缺損上，再在其表面接種一層培養(yǎng)的人表皮細(xì)胞膜片，術(shù)后21d可見分化良好的表皮層覆蓋創(chuàng)面，且傷口收縮較單純應(yīng)用表皮細(xì)胞膜片的對照組明顯縮小。復(fù)合移植Alloderm和自體表皮細(xì)胞膜片于患者燒傷后創(chuàng)面，CEA的接受率提高到95%。同單純CEA移植比較，表皮釘突形成早。

（2）膠原－糖胺多糖（Integra）：1980年，Yannas和Burke將從牛跟腱提取的Ⅰ型膠原和糖胺多糖（主要是6－硫酸軟骨素）共價交聯(lián)，再在其表面被覆一層薄的硅膠膜 （臨時性的“表皮”）制成一種多孔狀的皮膚替代物。

1996年由Integra　Life　Sciences公司制造的這種組織工程化皮膚（Integra被FDA批準(zhǔn)應(yīng)用于燒傷患者）。Integra呈多孔狀結(jié)構(gòu)，孔徑（50±20）μm　，當(dāng)植入創(chuàng)面后毛細(xì)血管及成纖維細(xì)胞可浸潤生長形成新的真皮組織。上層硅膠膜的作用與表皮相當(dāng)，可控制水分蒸發(fā)，防止細(xì)菌感染。它的主要特點是多孔洞性，且能在凍干交聯(lián)的過程中，通過控制基質(zhì)中冰晶的形態(tài)控制孔洞的大小。植入創(chuàng)面約2周后新的真皮組織形成，此時，揭去硅膠膜，再以薄的自體網(wǎng)狀皮片或培養(yǎng)的自體表皮細(xì)胞膜片覆蓋。臨床試驗表明，此種人工真皮可永久的修復(fù)創(chuàng)面，產(chǎn)生瘢痕少，傷口攣縮小，外形佳，異種牛膠原未引起明顯免疫反應(yīng)。

在一項回顧性研究中，121例應(yīng)用Integra的燒傷患者無一例有嚴(yán)重增生性瘢痕形成，7%的患者有中度的增生性瘢痕，其余93%的患者無或僅有輕度瘢痕增生，其中63例患者有涉及關(guān)節(jié)活動部位的皮膚創(chuàng)傷，在應(yīng)用Integra治療后，患者的關(guān)節(jié)活動功能均良好。

Integra不包含有活性的細(xì)胞成分，無疾病傳播的危險。但I(xiàn)ntegra仍有一些局限性，比如：Integra缺乏正常皮膚的免疫防御能力，對創(chuàng)面的要求較高，對出血、感染抵御能力差，必須加強(qiáng)移植后的日常監(jiān)護(hù)，早期發(fā)現(xiàn)并處理感染區(qū)；其次，表層的硅膠膜在2周后仍需移植自體薄皮片覆蓋創(chuàng)面，延長了患者的住院時間，增加了治療費用。

（3）Dermagraft：Dermagraft是由Advanced　Tissue　Sciences公司生產(chǎn)的一種基于PGA／PGL的人工真皮。聚羥基乙酸（Polyglycolic　acid，PGA）、聚羥基乙酸－共－乳酸（Polyglactin－910，PGL）是最常用的人工合成高分子可降解材料，外科用的可吸收縫線就是由聚羥基乙酸和（或）聚乳酸纖維編織而成。PGA、PGL已被用于多種組織的替代或再造。PGA、PGL炎性反應(yīng)較輕，主要是通過水解而不是酶解的過程降解吸收，在皮下組織一般需60～90d完全吸收。

將從新生兒包皮中獲取的成纖維細(xì)胞接種于PGA／PGL支架上，2周后，成纖維細(xì)胞大量增殖并分泌膠原、纖維連接蛋白、蛋白多糖、生長因子等，形成由成纖維細(xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)和可降解生物材料構(gòu)成的人工真皮。Dermagraft纖維連接素高水平表達(dá)并接近胎兒皮膚中的水平，這對于真皮替代品具有重要意義，纖維連接素具有促進(jìn)上皮細(xì)胞的生長爬行，促進(jìn)基底膜形成的作用。動物及臨床試驗顯示該種人工真皮可以獲得良好的創(chuàng)面黏附，血管化快。結(jié)合自體網(wǎng)狀皮片移植，14d內(nèi)可以獲得創(chuàng)面的良好愈合。Dermagraft已經(jīng)在臨床上用于燒傷及慢性潰瘍創(chuàng)面的治療。研究表明，Dermagraft能有效減小創(chuàng)面收縮，促進(jìn)接種于其上的表皮細(xì)胞膜片黏附、生長（基底膜分化良好，可見錨著細(xì)絲、層粘連蛋白等）。

（4）暫時性真皮替代物（Biobrane、Dermagraft－TC／Trancyte）：Biobrane長期以來在臨床上被用作一種臨時性敷料來覆蓋大面積燒傷創(chuàng)面。它是雙層結(jié)構(gòu)，外層是薄的硅膠膜，內(nèi)層整合有大量的膠原顆粒，可以迅速與創(chuàng)面緊密貼附。Biobrane允許創(chuàng)面生理性液體蒸發(fā)，同時可防止蛋白等大分子物質(zhì)丟失；Biobrane還可以有效減輕疼痛，促進(jìn)表皮再生并減小膿毒血癥發(fā)生的風(fēng)險。

Dermagraft－TC是Advanced　Tissue Sciences公司的一種人工真皮，它作為一種臨時性敷料被用于燒傷創(chuàng)面。將新生兒成纖維細(xì)胞接種于人工合成敷料Biobrane上，成纖維細(xì)胞在Biobrane的膠原層黏附、擴(kuò)增，分泌基質(zhì)，外層的硅膠膜發(fā)揮著表皮的屏障作用。研究表明，Dermagraft－TC對燒傷創(chuàng)面的黏附情況以及隨后植入其上的表皮細(xì)胞膜片的接受率均與尸體皮相似，并且沒有免疫排斥反應(yīng)的發(fā)生。

三、組織工程化復(fù)合皮膚

理想的組織工程化皮膚應(yīng)包含表皮與真皮兩層，因為無論在解剖上還是在功能上兩者都是相互依存的整體。

1981年，Bell等將培養(yǎng)、擴(kuò)增的SD大鼠成纖維細(xì)胞融鑄于膠原網(wǎng)格中，膠原收縮后成為一種真皮類似物，5～7d后再在其表面種入未經(jīng)培養(yǎng)的自體表皮細(xì)胞，這種人工復(fù)合皮膚被固定在供體鼠背部的開放創(chuàng)面上。表皮細(xì)胞植入后第4天，就可觀察到膠原網(wǎng)格被表皮細(xì)胞部分覆蓋，5周后可見多層分化的表皮細(xì)胞覆蓋創(chuàng)面并且具有規(guī)整、光滑的基底層；移植后1周就有血管長入真皮層，7周時血管形成情況與周圍組織無明顯差別；術(shù)后50d，80%的移植物仍保持原來的大小和形狀。這種人工皮膚類似物應(yīng)該是第一種真正意義上的復(fù)合皮替代物（composite skin　replacements）。

Apligraft（又稱作Graftskin）是第一種商品化的既含有表皮層又含有真皮層的組織工程化皮膚，這種由Organogenesis公司注冊生產(chǎn)的產(chǎn)品已在加拿大和美國獲準(zhǔn)用于臨床治療靜脈性潰瘍。將從新生兒包皮中獲取的成纖維細(xì)胞溶于牛膠原中塑形，再在其表面接種新生兒表皮角質(zhì)形成細(xì)胞。10d左右，表皮角質(zhì)形成細(xì)胞融合成片，覆蓋其下的“真皮層”。整個復(fù)合物隨后被置于氣—液界面以促使角朊細(xì)胞分化形成角質(zhì)層。在一項臨床研究中，Apligraft與傳統(tǒng)治療靜脈性潰瘍的壓迫療法相比較，6個月治愈率分別為63%和48．8%（P＝0．012）；平均愈合時間分別為61d和181d（P＝0．003）；對于超過6個月的難治性潰瘍Apligraft治療組愈合時間明顯短于對照組（92d／190d，P＝0．001）。

四、結(jié)　語

皮膚作為最先面市的組織工程化產(chǎn)品，有著極其巨大的社會和商業(yè)價值以及廣闊的研究和臨床應(yīng)用前景?，F(xiàn)有的幾種組織工程化皮膚雖然在治療燒傷及慢性潰瘍上取得了長足進(jìn)步，但無論在功能上還是在外形上仍有待于進(jìn)一步改善。目前此領(lǐng)域的研究方向是：①選擇與開發(fā)適于細(xì)胞生長的支架材料，進(jìn)一步研究細(xì)胞與基質(zhì)的相互作用。②基因轉(zhuǎn)染技術(shù)的應(yīng)用。暫時性皮膚替代物中如果包含能夠選擇性高效分泌特殊生長因子的皮膚細(xì)胞，不但可以提高創(chuàng)面修復(fù)質(zhì)量，并且有可能促使永久性組織工程化皮膚的出現(xiàn)。③表皮干細(xì)胞。表皮干細(xì)胞具有無限分裂增殖能力，在皮膚組織的自我更新及維護(hù)機(jī)體自穩(wěn)態(tài)中具有重要作用，隨著對表皮干細(xì)胞的定位、表面標(biāo)志及分化調(diào)控的深入研究，表皮干細(xì)胞有可能成為組織工程皮膚的種子細(xì)胞，從而構(gòu)建出功能完善的皮膚替代物。④將黑色素細(xì)胞、郎格漢斯細(xì)胞引入皮膚構(gòu)建等。

隨著21世紀(jì)生命科學(xué)、材料科學(xué)以及諸多相關(guān)學(xué)科的飛速發(fā)展，在未來幾年內(nèi)，構(gòu)建出一種理想的組織工程化皮膚（功能與外形近乎正常的人工皮膚）永久性替代物將不再僅僅是夢想。