【原理】　受檢血漿、稀釋的正常血漿分別同缺乏因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ的基質(zhì)血漿、白陶土磷脂懸液和Ca2＋溶液混合，記錄開始出現(xiàn)纖維蛋白絲所需的時(shí)間。將受檢者血漿測(cè)定的結(jié)果同正常血漿做比較，分別計(jì)算出受檢血漿中因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ的促凝活性（FⅧ：C、FⅨ：C、FⅪ：C和FⅫ：C）相當(dāng)于正常人的百分率。下面為FⅧ：C活性測(cè)定方法，F(xiàn)Ⅸ：C、FⅪ：C和FⅫ：C活性測(cè)定方法與FⅧ：C相同。

【試劑】

1.缺乏因子Ⅷ C的基質(zhì)血漿先天性或人工制備的缺乏因子Ⅷ：C的血漿，它的活性要低于1%，即為基質(zhì)血漿。凍干低溫（-40℃～-80℃）保存。

2.腦磷脂溶液 用兔腦或人腦的部分凝血活酶，用前以生理鹽水作1:100稀釋。

3.5g/L白陶土生理鹽水懸液

4.0.05mol/L氯化鈣溶液

5.咪唑緩沖液（pH 7.3）

甲液：取咪唑1.36g，氯化鈉2.34g溶于200ml蒸餾水中，再加0.1mol/L HCl 74.4ml，最后加蒸餾水至400ml。

乙液：38g/L枸櫞酸鈉溶液。

工作液：5份甲液加1份乙液混合而成。

【標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制】　取20名正常人新鮮混合血漿，用咪唑工作液做1:10，1:20，1:40，1:80，1:160稀釋。將各稀釋度樣品分別與乏因子Ⅷ：C基質(zhì)血漿，腦磷脂懸液及5g/L白陶土生理鹽水懸液各0.1ml，混勻置37℃水浴中預(yù)溫2min，再加0.05mol/L氯化鈣溶液0.1ml立即計(jì)時(shí)，由此所得凝固時(shí)間的對(duì)數(shù)和濃度的對(duì)數(shù)計(jì)算回歸方程（以1:10作為100%），或以稀釋度為橫坐標(biāo)，凝固時(shí)間作為縱坐標(biāo)，在雙對(duì)數(shù)曲線紙上繪制曲線。

【操作方法】

1.空白管測(cè)定 取基質(zhì)血漿、腦磷脂懸液、咪唑工作液和5g/L白陶土生理鹽水懸液各0.1ml混勻，測(cè)定方法同上。要求空白管時(shí)間在240～250s。凝固時(shí)間長(zhǎng)短可用腦磷脂溶液的濃度來調(diào)節(jié)。

2.被檢標(biāo)本的測(cè)定 取被檢者全血以38g/L枸櫞酸鈉做9:1抗凝，立即以3 000r/min離心10min。分離血漿并置于冰浴中，然后以咪唑工作液將被檢者血漿做1:20稀釋，測(cè)定方法同上。將測(cè)定凝固時(shí)間代入回歸方程或從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出Ⅷ:C值，將結(jié)果乘以2。若凝固時(shí)間過長(zhǎng)，應(yīng)減少稀釋倍數(shù)，以使凝固時(shí)間處于線性的范圍內(nèi)。

【參考值】　FⅧ：C為103%±25.7%；FⅨ：C為98.1%±30.4%；

　　　　　　FⅪ：C為100%±18.4%；FⅫ：C為92.4%±20.7%。

【臨床意義】

1.血漿因子Ⅷ：C C、Ⅸ：C、Ⅺ：C和Ⅻ：C水平升高主要見于血栓前狀態(tài)和血栓形成性疾病，如肺栓塞、妊娠高血壓綜合征、晚期妊娠、口服避孕藥、腎病綜合征及惡性腫瘤等。

2.血漿因子Ⅷ：C C、Ⅸ：C、Ⅺ：C和Ⅻ：C水平減低因子Ⅷ：C減低常見于血友病A、DIC、血管性血友病、抗Ⅷ：C抗體所致獲得性血友病。因子Ⅸ：C減低常見于血友病B、維生素K缺乏癥、DIC、肝臟病、口服抗凝藥物等。因子Ⅺ：C減低常見于因子Ⅸ缺乏癥、DIC、肝臟疾病等。因子Ⅻ：C減低見于先天性因子Ⅻ缺乏癥、DIC、肝臟疾病、某些血栓性疾病等。

【注意事項(xiàng)】

1.乏因子Ⅷ：C的基質(zhì)血漿Ⅶ：C水平應(yīng)＜1%，而其他因子水平必須正常。

2.被檢標(biāo)本要立即測(cè)定，若不測(cè)定應(yīng)立即分離置-20℃～-40℃冰箱中保存?zhèn)錂z。

3.正常標(biāo)準(zhǔn)血漿要求20人以上混合血漿，分裝凍干保存于低溫冰箱內(nèi)，可用2～3個(gè)月。

4.每次測(cè)定都應(yīng)作標(biāo)準(zhǔn)曲線，并注意實(shí)驗(yàn)條件及操作對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。