目前已發(fā)現(xiàn)載脂蛋白20余種,只有血漿Apo AⅠ和ApoB測(cè)定在臨床上廣泛應(yīng)用,其測(cè)定方法主要有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和免疫濁度法,尚無公認(rèn)的參考方法。中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)建議免疫濁度法作為測(cè)定血漿Apo AⅠ和ApoB的常規(guī)方法,首選ITA法,其次為INA法。

免疫透射比濁法測(cè)定血漿Apo AⅠ和ApoB實(shí)驗(yàn)如下。

【原理】 利用載脂蛋白的特異抗體與血漿中相應(yīng)抗原結(jié)合,形成抗原抗體免疫復(fù)合物,并形成微細(xì)顆粒,均勻分散于溶液介質(zhì)中,光線通過溶液時(shí),渾濁液內(nèi)的顆粒能吸收光線,并與渾濁顆粒的量成正比。血漿Apo AⅠ或ApoB與相應(yīng)抗體結(jié)合,在一定條件下,形成不溶性抗原-抗體復(fù)合物,使溶液渾濁,渾濁度與Apo AⅠ或ApoB的含量成正比,以此定量。

【參考區(qū)間】 成年人血漿Apo AⅠ為1.20~1.60g/L,ApoB為0.80~1.20g/L。

【應(yīng)用評(píng)價(jià)】 臨床上一般同時(shí)進(jìn)行血漿Apo AⅠ和ApoB測(cè)定。為達(dá)到準(zhǔn)確測(cè)定的目的,免疫比濁測(cè)定應(yīng)以多點(diǎn)(5~7點(diǎn))定標(biāo),必須按曲線回歸方程計(jì)算結(jié)果。用單點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算結(jié)果誤差較大,不符合免疫比濁法原理,其測(cè)定結(jié)果不能準(zhǔn)確反映濃度的高低(高的偏低,低的偏高)。切忌單點(diǎn)法簡(jiǎn)便而忽略測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

【臨床意義】 血漿Apo AⅠ水平與動(dòng)脈粥樣硬化性疾病呈負(fù)相關(guān),Apo AⅠ降低是冠心病的危險(xiǎn)因素。ApoB水平與冠心病發(fā)病率呈正相關(guān),ApoB增高是冠心病的危險(xiǎn)因素。

Apo AⅠ是HDL的主要載脂蛋白。一般情況下,血漿Apo AⅠ水平與HDL-C呈顯著正相關(guān)。但某些病理狀態(tài)下Apo AⅠ的含量不一定與HDL-C成比例,如家族性高三酰甘油血癥者HDL-C常偏低,而Apo AⅠ不一定低,不增加冠心病危險(xiǎn);但家族性混合型高脂血癥患者Apo AⅠ與HDL-C都降低,冠心病的危險(xiǎn)性很高。此外,Apo AⅠ缺乏癥、家族性低α脂蛋白血癥等,血漿中Apo AⅠ與HDL-C均極低。故同時(shí)測(cè)定Apo AⅠ與HDL-C有利于臨床判斷。

ApoB包括ApoB48和ApoB100兩種,臨床常規(guī)測(cè)定ApoB100。ApoB100是LDL的主要結(jié)構(gòu)蛋白,約有90%的ApoB100分布于LDL中,故一般情況下,血漿ApoB水平與LDL-C呈明顯正相關(guān)。但高三酰甘油血癥時(shí)VLDL極高,小而密LDL(LDL一般可分為A型和B型亞組分,其中B型是小而密的LDL,是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的強(qiáng)危險(xiǎn)因素)增高,因其ApoB含量較多而膽固醇較少,故臨床表現(xiàn)為L(zhǎng)DL-C不高,而血漿ApoB增高。所以ApoB與LDL-C同時(shí)測(cè)定對(duì)病理狀態(tài)的分析很有幫助。

知識(shí)拓展反映脂質(zhì)代謝狀況新的檢測(cè)指標(biāo)不斷出現(xiàn),目前有游離脂肪酸(free fatty acid, FA)、脂肪酸結(jié)合蛋白(fatty acid binding protein,FABP)、載脂蛋白E(Apolipoprotein, poE)、小而密低密度脂蛋白(small dense low density lipoprotein,sd LDL)、氧化低密度脂蛋白(oxidized LDL)及脂蛋白代謝相關(guān)基因檢測(cè)等,隨著對(duì)脂代謝機(jī)制研究的逐漸深入和商品化試劑盒的日趨成熟,這些新的檢測(cè)指標(biāo)將為臨床脂代謝紊亂和心腦血管疾病提供更靈敏、特異的診療信息。