血漿中重要的蛋白質(zhì)有很多,甲胎蛋白、癌胚抗原、肌鈣蛋白I、糖化清蛋白、免疫球蛋白等將由其他章節(jié)詳述,下面介紹目前常被臨床采用分析的部分主要蛋白質(zhì)。多數(shù)血漿(清)蛋白質(zhì)有多種檢測方法,參考區(qū)間因方法而異,本處所列僅為參考。

1.前清蛋白(prealbumin,PA) 分子量約55k D,不含糖,p I 4.7,血漿中半衰期約12h。因電泳時移動速度較清蛋白快,位于清蛋白前面而得名。由肝細(xì)胞合成,主要包括甲狀腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(transthyretin,TTR)和視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)。

PA除了作為組織修補(bǔ)材料外,還有運(yùn)載功能。TTR是一種運(yùn)載蛋白,可結(jié)合大約10%的T 3和T 4,對T 3的親和力更大,具有調(diào)節(jié)甲狀腺素代謝的功能,但對甲狀腺激素的運(yùn)輸作用較甲狀腺素結(jié)合球蛋白(TBG)弱。RBP能與視黃醇結(jié)合形成復(fù)合物,具有轉(zhuǎn)運(yùn)視黃醇的功能。

檢測方法主要有免疫散射比濁法和免疫透射比濁法。

參考區(qū)間:200~400mg/L。

臨床意義:PA作為營養(yǎng)不良和肝功能不全的指標(biāo),比清蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白更為敏感。100~150mg/L為輕度缺乏,50~100mg/L為中度缺乏,<50mg/L為重度缺乏。在急性炎癥、創(chuàng)傷、惡性腫瘤等急需合成蛋白質(zhì)的情況下,血清PA下降迅速。

2.清蛋白(albumin,Alb) 分子量約66.3k D,為含580個氨基酸殘基的多肽鏈,分子中含17個二硫鍵,不含糖,pI為4~5.8,半衰期15~19d。由肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成,是血漿中含量最多的蛋白質(zhì),占血漿總蛋白的57%~68%。

清蛋白合成速度主要受血漿膠體滲透壓和蛋白質(zhì)攝入量的調(diào)節(jié),腎病綜合征時合成量可達(dá)正常的3倍以上。正常情況下,每日約有360mg清蛋白通過腎小球?yàn)V過,但大部分(約95%)被腎小管重吸收,在腎小管細(xì)胞中清蛋白被溶酶體水解酶降解為小分子片段進(jìn)入血循環(huán)。

清蛋白具有廣泛的生理功能。清蛋白被組織細(xì)胞內(nèi)吞而攝取,其分解產(chǎn)物氨基酸可用于合成組織蛋白,起補(bǔ)充和修復(fù)作用。清蛋白分子量小數(shù)量多,能最有效地維持血漿膠體滲透壓(占75%~80%)。清蛋白是血漿緩沖系統(tǒng)的主要蛋白質(zhì),有較強(qiáng)的緩沖酸堿能力,維持血漿正常的p H。清蛋白帶有較多的極性基團(tuán),與某些金屬離子和化合物有高度親和力,很多水溶性差的物質(zhì)如膽汁酸鹽、膽紅素、長鏈脂肪酸、前列腺素、類固醇激素、某些藥物(如青霉素、阿司匹林)、某些金屬離子(如Ca2+、Cu2+、Ni2+)等都可以通過與清蛋白不同程度的可逆結(jié)合,有效地將這些物質(zhì)運(yùn)送到各自的靶細(xì)胞。有活性的激素或藥物與清蛋白結(jié)合后,可不表現(xiàn)出活性而視為儲存形式。由于這種結(jié)合具有可逆性,與血液中游離型的同種物質(zhì)處于動態(tài)平衡狀態(tài),因此,通過這種可逆結(jié)合和運(yùn)輸可以調(diào)節(jié)這些激素或藥物的代謝。

3.α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,α1-AT或AAT) 分子量約51.8k D,為含394個氨基酸殘基的多肽鏈,pI 4.8,含糖10%~12%,半衰期約4d,由肝細(xì)胞合成。電泳時位于α1-球蛋白區(qū)帶,該區(qū)帶中另有含脂類很高的α1-脂蛋白和含糖量很高的α1-酸性糖蛋白2種組分,因這兩種組分中蛋白含量較少,染色都很淺,因此α1-AT是這一區(qū)帶主要的顯色成分。

α1-AT具有抑制蛋白酶的作用,也稱絲氨酸蛋白酶抑制物。α1-AT的分子量較小,可以通過毛細(xì)血管壁進(jìn)入組織液與蛋白酶結(jié)合再回到血管內(nèi),蛋白酶復(fù)合物有可能轉(zhuǎn)移到α2-巨球蛋白分子上,經(jīng)血液循環(huán)運(yùn)輸?shù)絾魏送淌杉?xì)胞系統(tǒng)降解。

檢測方法有免疫散射比濁法、免疫透射比濁法和血清蛋白電泳等。

參考區(qū)間:正常成年人,0.83~1.99g/L;新生兒,1.45~2.7g/L。

臨床意義:血清低α1-AT見于胎兒呼吸窘迫綜合征和肺氣腫。α1-AT在急性炎癥、外科手術(shù)后、組織壞死時增高,一般24h后開始升高,3~4d達(dá)到高峰。α1-AT增高還見于長期服用可的松、雌激素類藥物及妊娠等。

4.α1-酸性糖蛋白(α1-acid glycoprotein,AAG或α1-AG) 又稱黏蛋白。分子量約40k D,含糖約45%,其中含唾液酸占11%~12%,pI 2.7~4.0,血漿半衰期為1~3d。主要由肝細(xì)胞合成,在某些腫瘤組織或膿毒血癥時粒細(xì)胞和單核細(xì)胞也可以合成。

AAG是體內(nèi)主要的急性時相反應(yīng)蛋白,急性炎癥時升高,與免疫防御功能有關(guān)。AAG也可結(jié)合利多卡因和普萘洛爾等藥物。AAG含量增加使上述藥物結(jié)合狀態(tài)增加而游離狀態(tài)減少,從而使藥物的有效濃度下降。

檢測方法有免疫比濁法、酶聯(lián)免疫吸附法等,也可通過測定分子中糖含量間接計算AAG的含量。

參考區(qū)間:0.25~2.0g/L。

臨床意義如下。

(1)增高:AAG在炎癥性疾病、組織損傷或某些腫瘤時增高。在急性炎癥和外科手術(shù)的當(dāng)日即可升高,4~5d后迅速下降。AAG血漿含量升高是診斷潰瘍性結(jié)腸炎最可靠的指標(biāo)之一。糖皮質(zhì)激素增加可引起血漿AAG含量增高,見于庫欣綜合征及應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素治療。

(2)降低:營養(yǎng)不良、肝實(shí)質(zhì)病變時,AAG合成減少導(dǎo)致血液中AAG降低。雌激素可導(dǎo)致AAG合成減少,由于AAG分子量較小,腎病綜合征時AAG可以進(jìn)入尿液,一些消化道疾病AAG可進(jìn)入消化道導(dǎo)致血液中AAG含量降低。

5.視黃醇結(jié)合蛋白(retinol binding protein,RBP) 分子量為21~22k D的單體多肽鏈,半衰期約12h。由肝細(xì)胞合成,攜帶視黃醇(維生素A的一種形式)。

RBP將視黃醇從肝轉(zhuǎn)運(yùn)至各種靶組織,保護(hù)其不被氧化損傷。在血漿中RBP與甲狀腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TTR)以1∶1結(jié)合,可避免小分子RBP從腎小球?yàn)V過。在靶細(xì)胞內(nèi),隨TTR-RBP復(fù)合物的降解,視黃醇被攝入細(xì)胞,失去視黃醇的RBP與TTR無親和性,無視黃醇的RBP載體蛋白被腎小球?yàn)V過,但在近曲小管幾乎全部被重吸收分解,正常人尿中RBP排量極少。

檢測方法有免疫比濁法、酶聯(lián)免疫法、放射免疫法等。

參考區(qū)間:成年人,男36~56mg/L;女26.7~57.9mg/L。

臨床意義:血清RBP增高見于腎小球損傷,如慢性腎疾病、糖尿病腎病和重金屬損傷性腎病。降低見于急性時相反應(yīng)、肝病和蛋白質(zhì)營養(yǎng)不良。尿液RBP排泄量增加可反映腎小管功能損害,是一項(xiàng)靈敏的生物化學(xué)指標(biāo)。

6.β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG) 分子量約11.8k D,由99~100個氨基酸組成的單鏈多肽,分子內(nèi)含一對二硫鍵,不含糖,是人類白細(xì)胞抗原(HLA)的β鏈(輕鏈)。主要由淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生,存在于各種有核細(xì)胞的細(xì)胞膜上。

β2-MG以相對穩(wěn)定的速率合成并從細(xì)胞膜上釋放,可從腎小球自由濾過,99.9%被近端腎小管上皮細(xì)胞重吸收并降解,故正常情況下血清濃度較穩(wěn)定,由尿排出的量極低。但在淋巴細(xì)胞增多性疾病或腫瘤時,β2-MG大量釋放入血。

測定方法有放射免疫法、酶聯(lián)免疫法、免疫比濁法、化學(xué)發(fā)光法等。

參考區(qū)間:1.28~1.95mg/L。

臨床意義:血清β2-MG升高反映腎小球?yàn)V過能力下降,見于急性腎炎、腎衰竭等。尿β2-MG是近端腎小管受損非常靈敏和特異的指標(biāo)(見第10章第三節(jié))。血、尿β2-MG均升高見于尿毒癥、腎病綜合征、腎移植排異反應(yīng)、惡性腫瘤如慢性淋巴細(xì)胞性白血病等。

7.觸珠蛋白(haptoglobin,Hp) 又稱結(jié)合珠蛋白。分子量85~400k D,含糖量12%,p I 4.1,半衰期約2d,電泳時位于α2球蛋白區(qū)帶,為α2β2四聚體,主要在肝合成。

觸珠蛋白的主要功能是與紅細(xì)胞釋放的游離血紅蛋白(hemoglobin,Hb)結(jié)合,每分子觸珠蛋白可結(jié)合兩分子血紅蛋白,觸珠蛋白-血紅蛋白復(fù)合物幾分鐘內(nèi)被運(yùn)輸至肝網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)迅速降解,其氨基酸和鐵可被機(jī)體再利用。觸珠蛋白的這種功能可以防止血紅蛋白從腎丟失而為機(jī)體保留鐵,并避免血紅蛋白對腎的損害。觸珠蛋白-血紅蛋白的結(jié)合不可逆,觸珠蛋白不能被重復(fù)利用,故溶血性疾病時含量急劇下降,血漿濃度一般在1周內(nèi)再生而恢復(fù)正常。同時,觸珠蛋白-血紅蛋白復(fù)合物是一種高效的過氧化物酶,能將多型核白細(xì)胞吞噬過程中產(chǎn)生的過氧化物水解,防止脂類發(fā)生超氧化作用。觸珠蛋白還是需鐵細(xì)菌如大腸埃希菌的抑菌劑,可能是阻止了需鐵細(xì)菌對血紅蛋白鐵的利用。

檢測方法主要有免疫透射比濁法和放射免疫擴(kuò)散法,觸珠蛋白亞型采用等電聚焦電泳等。

參考區(qū)間:成年人0.5~2.2g/L,新生兒為成年人的10%~20%。

臨床意義如下。

(1)血漿觸珠蛋白增高:燒傷、感染、組織壞死或惡性腫瘤等,于反應(yīng)開始后4~6d升高,病情控制2周后恢復(fù)正常。腎病綜合征及某些腸道疾病常伴有血漿清蛋白丟失,此時肝內(nèi)觸珠蛋白代償性合成增加,血漿觸珠蛋白含量升高。某些激素如皮質(zhì)激素和雄性激素也可使觸珠蛋白合成增加,血漿含量升高。

(2)血漿觸珠蛋白降低:各種血管內(nèi)溶血性疾病,如輸血反應(yīng)、溶血性貧血、瘧疾、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥(蠶豆病)、傳染性單核細(xì)胞增多癥等,因觸珠蛋白大量結(jié)合血紅蛋白而被降解,觸珠蛋白降低的程度與病情輕重一致,甚至低到測不到的程度。觸珠蛋白降低可作為輕度溶血的一項(xiàng)敏感診斷指標(biāo)。嚴(yán)重肝病患者由于蛋白質(zhì)合成能力下降,血漿觸珠蛋白含量也下降。雌激素減少觸珠蛋白的合成,使血漿觸珠蛋白含量降低。

8.α2-巨球蛋白(α2-macroglobulin,α2-MG或AMG) 分子量約720k D,由4個相同的亞基組成,是血漿中分子量最大的蛋白質(zhì),含糖量約為8%,pI 5.4,半衰期約為5d。AMG由肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞與單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)合成,占血漿總蛋白的8%~10%。

α2-MG屬于硫酯鍵血漿蛋白質(zhì)家族,含有內(nèi)環(huán)硫酯鍵,能與多種離子和分子結(jié)合,特別是能結(jié)合并抑制各種蛋白質(zhì)水解酶如纖維蛋白溶酶、胃蛋白酶、糜蛋白酶、胰蛋白酶及組織蛋白酶D等。α2-MG具有選擇性保護(hù)某些蛋白酶活性的作用。α2-MG與酶結(jié)合成復(fù)合物,酶的活性雖未失活,但導(dǎo)致酶不易作用于大分子底物而不能發(fā)揮催化作用。當(dāng)?shù)孜餅樾》肿恿康鞍踪|(zhì)時,能被α2-MG蛋白酶復(fù)合物催化水解。

檢測方法主要采用免疫比濁法和放射免疫擴(kuò)散法。

參考區(qū)間:1.31~2.93g/L。

臨床意義:血漿清蛋白減低或低清蛋白血癥,尤其腎病綜合征,α2-MG含量顯著增高,可能是一種代償性保持血漿膠體滲透壓的反應(yīng)。α2-MG增高還見于慢性腎炎、糖尿病、肝病、自身免疫性疾病等。嬰幼兒和兒童血漿α2-MG含量為成年人的2~3倍,可能是一種保護(hù)機(jī)制。α2-MG降低常見于嚴(yán)重的急性胰腺炎和進(jìn)展型前列腺癌治療前等。

9.銅藍(lán)蛋白(ceruloplasmin,CER或CP) 分子量平均約132k D,由1046個氨基酸殘基組成的單鏈多肽,是一種含銅的α2-球蛋白,含糖量8%~9.5%,pI 4.4,半衰期4.5d。每分子含6~8個銅原子,因含銅而呈藍(lán)色,故名銅藍(lán)蛋白。由肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成。

CER主要參與氧化還原反應(yīng),具有鐵氧化酶作用,可將Fe2+氧化為Fe3+,Fe3+再結(jié)合到轉(zhuǎn)鐵蛋白上,使鐵不具有毒性,從而調(diào)節(jié)鐵的轉(zhuǎn)運(yùn)、利用;CER還具有抗氧化作用,能抑制膜脂質(zhì)的氧化。

檢測方法主要采用免疫比濁法、放射免疫擴(kuò)散法等。

參考區(qū)間:0.21~0.53g/L。

臨床意義:測定血漿中CER常用于輔助診斷肝豆?fàn)詈俗冃?。肝豆?fàn)詈俗冃允且环N常染色體隱性遺傳病,患者血漿CER含量明顯下降,但游離銅增加。CER屬急性時相反應(yīng)蛋白,在感染、創(chuàng)傷和腫瘤時升高,急性損傷4~20d達(dá)到高峰。營養(yǎng)不良、嚴(yán)重肝病及腎病綜合征時常降低。妊娠、口服雌激素類藥物其含量明顯增加。

10.轉(zhuǎn)鐵蛋白(transferrin,TRF或Tf) 分子量約79.6k D,含糖約6%,pI為5.5~5.9,半衰期約7d,電泳位于β區(qū)帶。由肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成,是血漿中主要的含鐵蛋白。

TRF能可逆性結(jié)合多價陽離子,如鐵、銅、鋅等。每一分子TRF可結(jié)合2個Fe3+。從小腸進(jìn)入血液的Fe2+被CER氧化成Fe3+,再與TRF結(jié)合。各種細(xì)胞表面都有TRF受體,此受體對TRF-Fe3+復(fù)合物比對游離TRF親和力更高,復(fù)合物易被攝入細(xì)胞。大部分Fe3+運(yùn)輸?shù)焦撬?用于血紅蛋白合成;小部分運(yùn)輸至組織細(xì)胞,用于合成肌紅蛋白、細(xì)胞色素、鐵蛋白等。血漿TRF濃度受食物鐵量的影響,缺鐵時TRF升高,鐵劑治療后恢復(fù)正常。

常用測定方法有放射免疫法和散射免疫比濁法,也可通過測定血清總鐵求得TRF含量。

參考區(qū)間:28.6~51.9μmol/L。

臨床意義:測定TRF可用于貧血的鑒別診斷和療效監(jiān)測。缺鐵性貧血時TRF升高,再生障礙性貧血TRF正常或降低。TRF屬于負(fù)性急性時相反應(yīng)蛋白,在炎癥、創(chuàng)傷、腫瘤時下降。慢性肝病、營養(yǎng)不良、蛋白質(zhì)丟失性疾病血清TRF降低。妊娠、口服避孕藥、注射雌激素類藥物可使TRF升高。

11.C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein,CRP) 分子量115~140k D,含少量的糖或不含糖, p I 6.2,半衰期約19h,電泳時在γ區(qū)帶,有時可延伸到β區(qū)帶。主要由肝合成,是第一個被認(rèn)定的急性時相反應(yīng)蛋白。

在鈣離子存在下,CRP不僅可結(jié)合多種細(xì)菌、真菌及原蟲等多糖物質(zhì),還可以結(jié)合卵磷脂和核酸,結(jié)合后的復(fù)合體對補(bǔ)體系統(tǒng)有激活作用,引發(fā)對入侵病原體的免疫調(diào)節(jié)和吞噬作用,表現(xiàn)為炎癥反應(yīng)。CRP也能識別和結(jié)合由損傷組織釋放的內(nèi)源性毒性物質(zhì),然后將其去毒或從血液中清除,同時CRP自身降解。

主要測定方法有免疫濁度法、ELISA法、放射免疫法等。

參考區(qū)間:0.068~8.2mg/L。

臨床意義:CRP是目前臨床上應(yīng)用最多的急性時相反應(yīng)蛋白。在急性心肌梗死、感染、創(chuàng)傷、炎癥、外科手術(shù)、腫瘤浸潤等,血液CRP濃度于6~12h內(nèi)迅速上升,甚至可達(dá)正常的2000倍。風(fēng)濕病急性期和活動期CRP升高。手術(shù)后如果CRP不下降或再次升高,提示可能并發(fā)感染或有血栓形成?？捎糜诩?xì)菌和病毒感染的鑒別診斷,病毒感染CRP多正常。自身免疫性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE),CRP僅輕度升高或不升高,有助于鑒別診斷。CRP明顯升高提示病情活動,臨床常以CRP維持在10mg/L以下為治療目標(biāo)。

超敏CRP(hs-CRP)可作為心血管疾病的獨(dú)立危險因子。超敏CRP與普通CRP只是從靈敏度上區(qū)分,采用超敏感檢測技術(shù),準(zhǔn)確檢測低濃度CRP,是區(qū)分低水平炎癥狀態(tài)的靈敏指標(biāo)。作為心血管疾病危險因子的標(biāo)記:<1.0mg/L為低風(fēng)險性,1.0~3.0mg/L為中度危險性,>3.0mg/L為高危險性。