【實驗?zāi)康摹?/p>

1．掌握EDTA滴定法測定血清鈣的原理和方法。

2．了解血清鈣測定的臨床意義。

【實驗原理】

在堿性溶液中，鈣紅呈藍(lán)色，與鈣結(jié)合生成絡(luò)合物呈紫紅色。但加入與鈣結(jié)合力更強(qiáng)的EDTA時，則可與之奪取鈣形成無色的EDTA鈣鹽，同時使鈣紅游離，則溶液顏色由紫紅色變藍(lán)。

血清加堿加指示劑鈣紅后，因鈣紅與血清鈣結(jié)合，故溶液呈紫紅色；然后用EDTA滴定，可用標(biāo)準(zhǔn)鈣液滴定測知。本法較靈敏，須作空白滴定消除試劑本身之影響。

【實驗器材】

烤箱；分析天平；吸量管；錐形瓶；血清。

【實驗試劑】

1．1．25mol／L KOH液　使用新配者較好。

2．鈣指示劑　0．1%鈣紅液，冰箱中保存可用1個月。用新配者效力更好。

3．EDTA液

（1）儲存液：乙二胺四乙酸二鈉鹽（EDTANa2）450mg，用蒸餾水溶成100ml。

（2）應(yīng)用液：儲存液用蒸餾水稀釋10倍。

4．10mg%鈣標(biāo)準(zhǔn)液　稱取分析純的CaCO3先在110℃烘箱中干燥到恒重、約需12h，精確稱量124．8mg，加水約20ml及0．5NHCl　3ml，徐徐加溫到60℃使之溶解。冷卻后加水成500ml混勻。

【實驗方法】

1．空白滴定　水1．1ml加1．25NKOH　0．5ml，再加鈣紅液一滴混勻，立即用EDTA滴定恰到紫紅色變藍(lán)色為止。記下所用EDTA的ml數(shù)（B）。

2．標(biāo)準(zhǔn)滴定　鈣標(biāo)準(zhǔn)液0．1ml，水1ml，加KOH以下等操作同上。記滴定毫升數(shù)（S）。

3．檢品滴定　血清0．10ml，水1ml，其他操作同上。記滴定毫升數(shù)（U）。

4．計算

血清總鈣mg%＝（U－B）×0．01／（S－B）×100／0．1＝（U－B）／（S－B）×10

血清總鈣mEq／L＝血清總鈣（mg%）×0．5

【注意事項】

1．鈣紅在強(qiáng)堿溶液中不穩(wěn)定，故應(yīng)在加堿、加指示劑后，立即進(jìn)行滴定。時間過長則顯著影響滴定終點的觀察。

2．滴定所用刻度吸管應(yīng)準(zhǔn)確。最好用微量滴定法。滴定接近終末點時，要每次加半滴或更少量，并要及時切實搖勻。力求精確掌握終點、避免滴過。

3．應(yīng)用新鮮血清，否則終點不明顯。

4．本試驗中要切實注意器材干凈，配制試劑及試驗中應(yīng)用雙蒸餾水或無離子水。

5．電解質(zhì)濃度常用兩種表示方法：mg／dl及mEq／L。換算關(guān)系如下：

mEq／L＝mg／dl×10÷當(dāng)量＝（mg／dl×10×原子價）／原子量

mg／dl＝mEq／L÷10×當(dāng)量＝（mEq／L×原子量）÷（10×原子價）

例如鈣的換算：mEq／L＝mg／dl×10×2÷40＝mg／dl×0．5

mg／dl＝mEq／L×40÷10÷2＝mEq／L×2

【臨床意義】

正常參考值：成人血清總鈣濃度為9～11mg／dl或4．5～5．5mEq／L，小兒略高于成人為10～12mg／dl。

1．血鈣降低　常見于鈣及維生素D吸收不良、甲狀旁腺功能減低。

2．血鈣增高　見于甲狀旁腺增生或腫瘤、服用多量維生素D等。

（石少慧）