常見問(wèn)題及解決方法
1.細(xì)胞退變 通常是由于涂片固定不及時(shí),使細(xì)胞在干燥過(guò)程中氧化退變;或由于樣本送檢不及時(shí),涂片前細(xì)胞已變性、自溶。解決方法:收到樣本后要盡早制片,并保證涂片在潮干狀態(tài)下固定或選擇液基制片法;及時(shí)送檢樣本,不能及時(shí)送檢時(shí)按9∶1的比例加入濃甲醛液(9份樣本加1份濃甲醛)或95%乙醇等固定細(xì)胞。
2.細(xì)胞脫落 涂片上水分太多、細(xì)胞量太多或玻片不干凈等均可導(dǎo)致涂片浸入95%乙醇固定時(shí)或染色的過(guò)程中大量細(xì)胞脫落。解決方法:離心后要把試管內(nèi)的液體全部吸干,玻片要干凈,涂片要薄而均勻。
3.細(xì)胞量少 宜用細(xì)胞離心機(jī)制片或1ml尖底離心管二次離心處理。
4.紅細(xì)胞太多 離心后吸取上層沉淀物,加入乙醇冰醋酸液(25%乙醇95ml+冰醋酸5ml),振蕩后再離心,之后吸取沉淀物制片。
5.細(xì)胞收縮 涂片上液體太多,干燥后細(xì)胞容易收縮。解決方法:離心后要把試管內(nèi)的液體全部吸干;其次,選擇細(xì)胞收縮較小的固定液。
6.結(jié)晶 一是蘇木素結(jié)晶,呈不規(guī)則形狀。解決方法:一是及時(shí)過(guò)濾或更換蘇木素染色液;二是點(diǎn)狀結(jié)晶,成片或成簇分布,有時(shí)在細(xì)胞核上方,此為空氣存留造成的結(jié)晶假象。預(yù)防方法:封片時(shí),不要一次性從二甲苯中取出太多的涂片,宜根據(jù)當(dāng)時(shí)的空氣濕度、溫度及個(gè)人封片速度,邊取邊封,一般每次取3~5張為宜。
7.涂片上的水珠 由于脫水不干凈或封片環(huán)境太潮濕所造成。解決方法:重新脫水,再次封片。注意:特別要保證涂片在低濃度乙醇中的時(shí)間足夠,脫水不干凈的原因多是樣本在低濃度乙醇內(nèi)停留時(shí)間太短造成。
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