三、其他凝集技術(shù)

（一）抗球蛋白技術(shù)

1.原理　抗球蛋白參與的血凝技術(shù)由Coombs于1945年建立，故又稱為Coombs試驗(yàn)，是檢測(cè)抗紅細(xì)胞不完全抗體的一種方法。所謂不完全抗體，多半是7S的IgG類抗體，能與相應(yīng)的抗原牢固結(jié)合，但在一般條件下不出現(xiàn)可見反應(yīng)。Coombs利用抗球蛋白抗體作為第二抗體，連接與紅細(xì)胞表面抗原結(jié)合的特異抗體，使紅細(xì)胞凝集。

2.技術(shù)類型與應(yīng)用　根據(jù)試驗(yàn)原理不同分為直接Coombs試驗(yàn)和間接Coombs試驗(yàn)，其基本原理如圖6-6。

圖6-6　抗球蛋白試驗(yàn)原理示意

（1）直接Coombs試驗(yàn)　為直接檢測(cè)紅細(xì)胞表面有無(wú)不完全抗體的試驗(yàn)?；颊唧w內(nèi)抗紅細(xì)胞抗原的不完全抗體與紅細(xì)胞表面抗原結(jié)合形成致敏紅細(xì)胞，但不完全抗體不能使致敏紅細(xì)胞互相連接而凝集。當(dāng)加入抗球蛋白血清（完全抗體）時(shí)，便與紅細(xì)胞表面的不完全抗體結(jié)合，在致敏紅細(xì)胞之間搭橋，出現(xiàn)凝集現(xiàn)象。本試驗(yàn)可用玻片法做定性測(cè)定，也可用試管做半定量分析，主要用于新生兒溶血癥、輸血反應(yīng)、自身免疫溶血性貧血等疾病的檢測(cè)。

（2）間接Coombs試驗(yàn)　即用已知的不完全抗體檢測(cè)受檢紅細(xì)胞上相應(yīng)的抗原，或用已知紅細(xì)胞抗原檢測(cè)待測(cè)血清中相應(yīng)的不完全抗體。將受檢血清與具有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞反應(yīng)，若受檢血清中含有相應(yīng)的不完全抗體，紅細(xì)胞被致敏，再加入抗球蛋白血清就可出現(xiàn)可見的紅細(xì)胞凝集。Coombs試驗(yàn)還可采用專一特異性的抗球蛋白血清，如抗IgG、抗IgA或抗IgM以及抗補(bǔ)體血清等，用來(lái)分析結(jié)合于紅細(xì)胞上不完全抗體的類別。

本試驗(yàn)是一種極為敏感的檢查不完全抗體的方法，也是Rh血型物質(zhì)檢出的確證試驗(yàn)。凡酶法或其他方法檢測(cè)紅細(xì)胞為Rh^-時(shí)，必須用本法證實(shí)，以排除弱陽(yáng)性。本試驗(yàn)操作繁瑣，受條件影響大，如溫度、時(shí)間、離子強(qiáng)度、離心速度等均會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。間接Coombs試驗(yàn)多用于檢測(cè)母體抗-Rh抗體，以便及早發(fā)現(xiàn)和避免新生兒溶血的發(fā)生。此外也可用于檢測(cè)輸血、血制品、器官移植所致的免疫性血型抗體以及交叉配血。

（二）協(xié)同凝集技術(shù)

金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁成分中的A蛋白能與人及多種哺乳動(dòng)物（豬、兔、羊、鼠等）血清中的IgG類抗體的Fc段結(jié)合。IgG的Fc段與SPA結(jié)合后，兩個(gè)Fab段暴露在葡萄球菌表面，仍保持其抗體活性和特異性，當(dāng)其與特異性抗原相遇時(shí)，可出現(xiàn)凝集現(xiàn)象。在此凝集反應(yīng)中，金黃色葡萄球菌菌體為IgG抗體的載體。

思考題

1.歸納常用凝集技術(shù)的類型及其應(yīng)用。

2.根據(jù)試管凝集的結(jié)果，一份免疫血清的效價(jià)是1∶320，另一份是1∶1 280，哪一份血清中的抗體含量高?請(qǐng)分析血清效價(jià)的高低與待測(cè)抗體含量的關(guān)系。

（張其霞）