壽星寶對(duì)腦組織核酸及蛋白質(zhì)代謝的影響

壽星寶(SXB)顆粒劑是在對(duì)老年證候?qū)W調(diào)查的基礎(chǔ)上,研制的針對(duì)老年氣虛陰虧血瘀特點(diǎn)選擇具有益氣養(yǎng)陰活血功效的黃芪、沙參、三七等中藥而組成的復(fù)方,臨床用以延緩衰老,改善老化癥狀,其在對(duì)腦組織蛋白質(zhì)及核酸代謝的影響方面,我們作了以下研究。

一、材料與方法

1.動(dòng)物選擇、分組與處理 選2月齡昆明種雄性小白鼠8只和16月齡雄性小白鼠40只,由安徽省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究所提供,分為以下6組:①青年對(duì)照組,即8只2月齡小鼠,每日灌胃生理鹽水1次,劑量為0.40ml/20g體重。②老年對(duì)照組,8只16月雄性小白鼠,每日灌胃等量生理鹽水1次,即0.40ml/20g體重;③老年低劑量組,8只16月雄性小白鼠,每日灌胃壽星寶23.2mg/20g體重,1次,相當(dāng)于臨床常規(guī)用量;④老年中劑量組,8只16月雄性小白鼠,每日灌胃壽星寶209mg/20g體重,1次,相當(dāng)于臨床常規(guī)用量的9倍;⑤老年高劑量組,8只16月雄性小白鼠,每日灌胃壽星寶418mg/20g體重,1次,相當(dāng)于臨床常規(guī)用量的18倍;⑥還精煎對(duì)照組,8只16月雄性小白鼠,每日灌胃還精煎0.40mg/20g體重,1次,相當(dāng)于臨床常規(guī)用量的8倍。

2.放射性同位素選擇與標(biāo)記方法 選3 HTdR(氚標(biāo)記胸腺嘧啶核苷)、³

HUR(氚標(biāo)記尿嘧啶核苷)、³ HLeu(氚標(biāo)記亮氨酸),購(gòu)自中國(guó)原子能科學(xué)研究所和上海原子核研究所,放射性濃度分別為1mci/ml、0.8mci/ml、1mci/ml,閃爍液配方用PPO3.0g,POPOP0.5g,萘60g加二氧六環(huán)至500ml,避光保存。實(shí)驗(yàn)前小鼠禁食12h,稱(chēng)重后,腹腔注射3 HLeu4uic/10g,4小時(shí)后處死小鼠,迅速取出腦組織,在濾紙上吸去所附血液及水分,再用精密扭力天平稱(chēng)取腦組織,用10倍體積重蒸餾水制成腦勻漿,加入三氯醋酸使勻漿含三氯醋酸10%,離心(1000×g,4℃),5min后沉淀,用5%三氯醋酸洗2次重新懸浮在原體積的5%三氯醋酸中,水浴煮沸20分鐘,冷卻至室溫。離心(1000×g,4℃)5min,取上清液測(cè)定DNA(Rowland法分離提取,二苯胺法測(cè)定),RNA(Oricinol法)含量和3HTdR,³ HUR摻入DNA、RNA的放射性,沉淀部分分別用5%三氯醋酸和乙醚各洗2次,然后溶解在0.1mmol/LNaOH溶液中測(cè)定蛋白質(zhì)含量(Lowry法),和3HLeu摻入蛋白質(zhì)的放射性,結(jié)果為dpm/mg組織。

二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

詳見(jiàn)表1、表2。

表1 壽星寶對(duì)腦組織核酸和蛋白質(zhì)合成代謝的影響(x±s)

注:與老年對(duì)照組比較:*P<0.05,**P<0.01;與還精煎組比較:#P<0.05。

由表1可見(jiàn),與青年對(duì)照組比較,老年小鼠腦組織DNA、RNA和PRO含量明顯降低(P<0.01),SXB高中低劑量組均能顯著促進(jìn)小鼠腦組織RNA和PRO的生物合成,三組間療效有顯著差異(P< 0.05或0.01),還精煎也可促進(jìn)其合成,但其作用與SXB三劑量組相比稍遜(P<0.05)。SXB和還精煎對(duì)DNA的合成代謝無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表2 壽星寶對(duì)腦組織核酸、蛋白質(zhì)含量的影響(x±s)

注:與老年對(duì)照組比較:*P<0.05,**P<0.01;與還精煎組比較:#P<0.05。

由表2可見(jiàn),與青年對(duì)照組比較,老年小鼠腦組織DNA、RNA和PRO合成代謝明顯降低(P<0.05或0.01),SXB高、中、低劑量組均能促進(jìn)小鼠腦組織RNA和PRO的含量,部分指標(biāo)趨近于青年組水平(P<0.05或0.01),與還精煎組比較,上述各項(xiàng)指標(biāo)均優(yōu)于還精煎組(P<0.05)。

三、討論

核酸是生物遺傳的重要物質(zhì)基礎(chǔ),它能貯存、復(fù)制和傳遞遺傳信息,并控制著蛋白質(zhì)的合成,而蛋白質(zhì)與一切生命活動(dòng)密切相關(guān)。已有材料證明:伴隨著衰老,體內(nèi)組織核酸、蛋白質(zhì)也發(fā)生變化,其合成一般隨增齡而降低,組織中的相應(yīng)核酸和蛋白質(zhì)含量下降。因此,測(cè)定組織中的蛋白質(zhì)及核酸的合成能力及其含量有助于從分子水平上判斷衰老過(guò)程,了解衰老的內(nèi)在變化情況,也是觀察藥物對(duì)衰老過(guò)程影響的重要指標(biāo)。經(jīng)以上研究證明,壽星寶能夠促進(jìn)老年小鼠腦組織RNA、蛋白質(zhì)的生物合成,提高老年小鼠腦中RNA、蛋白質(zhì)含量,說(shuō)明壽星寶對(duì)核酸、蛋白質(zhì)的代謝有整體調(diào)節(jié)作用,這是其用于防治老年病,延緩衰老的內(nèi)在基礎(chǔ)。