八、尿蛋白定性與半定量檢驗

（一）實驗?zāi)康?/p>

了解蛋白質(zhì)沉淀反應(yīng)及變性的實踐意義，掌握臨床常規(guī)定性檢驗?zāi)虻鞍椎姆椒ā?/p>

（二）實驗原理

正常人尿中只含微量蛋白質(zhì)，不能用臨床常規(guī)方法測定出來，用臨床常規(guī)方法能檢查出蛋白質(zhì)的尿叫做蛋白尿?；寄I臟?。ㄈ缁寄I小球腎炎、腎盂腎炎）的人往往有蛋白尿，因而尿中蛋白質(zhì)的檢查在臨床上具有重要的診斷意義。

（三）實驗藥品

1．2％醋酸溶液；

2．20％磺基水楊酸溶液；

3．pH蛋白試紙。

（四）實驗方法

1．加熱醋酸法

尿中的蛋白質(zhì)加熱變性后溶解度降低，因此可以被沉淀出來，加入醋酸使尿液呈弱酸性后，若沉淀消失，表示沉淀物質(zhì)是磷酸鹽；如沉淀不消失，反而更明顯，則表示尿中有蛋白質(zhì)。有時，煮沸后雖不渾濁，但加酸后渾濁出現(xiàn)，也表示有蛋白質(zhì)。

取尿液3mL置于試管中，加熱至沸騰（試管應(yīng)在火焰上移動，嚴(yán)防尿液噴出）。觀察有無沉淀產(chǎn)生。若產(chǎn)生沉淀，則加入2％醋酸數(shù)滴使其顯酸性，然后觀察沉淀情況。按表2-8記錄結(jié)果。

表2-8　尿蛋白的半定量測量

2．磺基水楊酸法

利用有機酸沉淀蛋白質(zhì)，是臨床常用的方法。此法較“加熱醋酸法”更為靈敏。尿中蛋白質(zhì)濃度為0.0015％，即可檢出。

（1）取尿液約3mL加入試管中；

（2）加入20％磺基水楊酸8～10滴，如出現(xiàn)沉淀，表示尿中有蛋白質(zhì)存在。參考上表，按沉淀多少記錄結(jié)果。

3．試紙法

蛋白質(zhì)與有機染料（如溴酚籃）的離子結(jié)合，可改變?nèi)玖系念伾?。使上述染料附著在濾紙上面制成蛋白試紙。當(dāng)它接觸含有蛋白質(zhì)的溶液時，因蛋白質(zhì)含量不同，試紙可以由黃色變成黃綠色、綠色或藍綠色，可根據(jù)顏色估計蛋白質(zhì)的量。

（1）本試紙供檢查尿pH值及蛋白定性和半定量之用，其淡黃色部分供檢查pH值用。

（2）將本試紙浸入被檢尿中后立即取出。約10s鐘后，在自然光或白光下，將所呈現(xiàn)的顏色和色版比較。

（3）強堿性尿的pH值在8以上者，尿蛋白呈假陽性反應(yīng)，可滴加稀醋酸校正后再測定。

（4）黃膽尿、濃縮尿及血尿等異常著色的標(biāo)本，可影響判定。

（5）蛋白試紙應(yīng)存于陰涼干燥處，其帶色部分不可用手接觸。

（五）實驗記錄