上述途徑培育得到的植株，必須經(jīng)過嚴(yán)格地鑒定，證明確實無病毒存在，才可以提供給生產(chǎn)應(yīng)用。病毒檢測，是確定草莓感染病毒種類和危害程度的重要技術(shù)手段。通過專門的病毒檢測途徑，確定草莓的栽培植株是否帶有病毒、所帶的病毒種類以及病毒的積累、危害程度等，對于選擇無病毒原種苗、確定栽培草莓的病毒病危害情況，以及提出相應(yīng)的防治措施，都具有重要的意義。

常見的草莓病毒病檢測方法，有指示植物檢測法、血清學(xué)檢測法、分子生物學(xué)檢測法以及電鏡檢測法。

指示植物，指的是對某種或某幾種病毒及類似病原物敏感，并且能較快顯現(xiàn)出特有癥狀的植物。檢測草莓病毒病常用的指示植物有野生草莓的兩種類群，一種是森林草莓（F.vesca），另一種是深紅草莓（F.virginiana）。目前國際上檢測草莓病毒病通用的，是森林草莓中的EMC、Apline、UC₄、UC₅、UC₆，以及森林草莓中的UC₁₁、UC₁₂。其中，以EMC、Apline、UC₄、UC₅應(yīng)用較多。

（1）檢測病毒指示植物的種類及效果。

在幾種常用的草莓病毒檢測指示植物中，不同的指示植物有各自不同的檢測病毒種類，對同種病毒顯現(xiàn)出的癥狀也往往有明顯的差異。

1）EMC。檢測范圍廣泛，有較大的實用價值。由于它本身常常潛帶潛隱病毒A，而易與其他病毒復(fù)合侵染，使顯現(xiàn)的癥狀更加清晰。所以是草莓斑駁病毒、輕型黃邊病毒及潛隱病毒C理想的檢測指示植物。但它在夏季高溫季節(jié)葉片易出現(xiàn)斑點，因而影響對斑駁病毒的癥狀確定。

2）Apline。對蚜蟲傳播病毒有很好的診斷效果，而常被用在草莓病毒的蚜蟲傳染實驗中。對檢測草莓斑駁病毒、鑲脈病毒，皺縮病毒及輕型黃邊病毒等，均有較敏感的癥狀反應(yīng)。

3）UC₄。對斑駁病毒、皺縮病毒和輕型黃邊病毒，有較好的檢測效果。但不能檢測鑲脈病毒和潛隱病毒。

4）UC₅。對多種病毒敏感，對潛隱病毒尤為敏感，對卷葉病毒是唯一敏感的指示植物。該植物耐病毒侵染，適合保存病毒，而且長勢旺，葉柄粗壯，在小葉嫁接中容易成活。

5）UC₆。在檢測草莓鑲脈病毒中明顯優(yōu)于其他指示植物。而對輕型黃邊病毒是無癥寄主，可用作保存輕型黃邊病毒。

6）UC₁₁。對皺縮病毒特別敏感，很容易顯現(xiàn)癥狀。

7）UC₁₂。既是檢測鑲脈病毒最好的指示植物，也是深紅草莓中對擬輕型黃邊病毒唯一敏感的指示植物。

各種病毒在指示植物上雖有不同的典型癥狀，但在實踐中，同一株草莓有多種病毒復(fù)合侵染，造成某種指示植物常有多種癥狀反應(yīng)，使得癥狀的變化很大。因此，為了很好地明確病毒種類，采用了成套應(yīng)用指示植物的做法，常將UC₄、UC₅、UC₆和UC₁₀這四種指示植物同時應(yīng)用，并進行比較分析，從而保證了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。在常用的指示植物中，UC₅對多種草莓病毒的敏感性都比較高，而且其生長勢強，葉柄粗，易嫁接成活，而作為檢測草莓病毒比較理想的指示植物。

（2）草莓病毒病小葉嫁接檢測方法。

1）檢測材料準(zhǔn)備。在嫁接接種前1.5～2個月，將預(yù)用指示植物單株盆栽，栽后置于溫、濕度及光照控制較好的溫室中，加強管理并注意防治病蟲害，促使指示植物苗生長健壯、組織充實。在嫁接接種當(dāng)天，從待檢測病毒的草莓植株上剪取完整的成熟葉片，剪后放入裝有清水的燒杯中，保持嫁接葉片濕潤、新鮮。注意標(biāo)明待檢株標(biāo)號。

2）嫁接接種。先剪去待檢株葉片的左右兩片小葉，用中央小葉并帶有1.0～1.5厘米長的小葉柄，將葉柄下部用鋒利的刀片削成楔形作為接穗，準(zhǔn)備向指示植物苗上嫁接。選生長健壯的指示植物葉片，除去中央小葉，在保留兩側(cè)小葉的兩個葉柄間向下縱切1.5～2.0厘米長的切口，而后把待檢接穗迅速地接入切口中，用塑料薄膜帶包扎嫁接口。每株指示植物苗可同時接數(shù)片同株待檢株的葉片，以便進行檢測癥狀的印證。為了確保嫁接葉片成活，嫁接后要把整株盆栽罩上塑料罩，以利于保溫和保濕。

3）癥狀觀察。小葉嫁接后秋季經(jīng)14～20天，春、冬季經(jīng)25～30天，接入的小葉不萎蔫，不枯死，即表明嫁接成活。這時可剪去未嫁接的老葉，繼續(xù)加強嫁接苗的管理，定期觀察新長出葉片上的癥狀表現(xiàn)。發(fā)病調(diào)查一般應(yīng)連續(xù)進行1.5～2個月。

4）主要病毒的癥狀表現(xiàn)。癥狀出現(xiàn)的時間，草莓斑駁病毒的癥狀往往顯現(xiàn)最早，一般在嫁接成活后7～14天即有癥狀表現(xiàn)；其次是草莓鑲脈病毒和輕型黃邊病毒，兩者顯現(xiàn)癥狀的時間分別為15～30天和24～37天；草莓皺縮病毒顯現(xiàn)癥狀最晚，要在嫁接成活后39～57天才表現(xiàn)出來。

在我國已經(jīng)調(diào)查明確的四種蚜蟲傳播病毒，它們的最佳指示植物及主要癥狀表現(xiàn)見表1。

表1 四種蚜蟲傳播草莓病毒的檢測指示植物及主要癥狀

病毒復(fù)合侵染的癥狀表現(xiàn)為：當(dāng)斑駁病毒與輕型黃邊病毒復(fù)合侵染時，幼葉褪綠并卷曲成杯狀，葉柄縮短，植株矮化。斑駁病毒與皺縮病毒復(fù)合侵染時，表現(xiàn)出明顯的皺縮癥狀。斑駁病毒與鑲脈病毒復(fù)合侵染時，兩種病毒都表現(xiàn)癥狀，但斑駁癥狀占優(yōu)勢。

植物病毒是由蛋白質(zhì)和核酸組成的核蛋白，因而是一種較好的抗原，給動物注射后會產(chǎn)生抗體，抗體存在于血清之中稱為抗血清。不同病毒產(chǎn)生的抗血清有各自的特異性。用已知抗血清可以鑒定未知病毒的種類。這種抗血清就是高度專一性的試劑，這種方法特異性高，測定速度快，一般幾小時甚至幾分鐘就可以完成。所以抗血清法成為植物病毒鑒定中最有用的方法之一?？寡彖b定法要進行抗原的制備（包括病毒的繁殖，病葉研磨和粗汁液澄清等），抗血清的采收，分離等。血清可分裝到小玻璃瓶中，貯存在-15～-25℃的冰凍條件下。測定時，把稀釋的抗血清與未知的病毒植物在小試管內(nèi)混合，這一反應(yīng)導(dǎo)致形成可見的沉淀。然后根據(jù)沉淀反應(yīng)來鑒定病毒。

在草莓的病毒檢測中，傳統(tǒng)的方法是采用指示植物法進行生物學(xué)檢測。這對確定病毒的侵染性和檢測病毒的實用性，都有重要意義。但是，這種方法總共需要較長時間，有時還需反復(fù)驗證，特別是在檢測環(huán)境條件不能保證時，很容易造成檢測結(jié)果不準(zhǔn)確，近年建立并應(yīng)用了血清學(xué)檢測方法以后，縮短了檢測時間，也保證了檢測的準(zhǔn)確性，但是仍存在著有些病毒的抗血清難以制備，病毒含量低時難以檢測，以及植株體內(nèi)常存在著某些干擾物質(zhì)影響檢測準(zhǔn)確性等缺點。特別是對那些沒有外殼蛋白的病原核糖核酸，如類病毒，無法用血清學(xué)方法進行檢測。近年在很多植物的病毒檢測中，研究并開始應(yīng)用了分子生物學(xué)檢測方法，在檢測病毒的靈敏度、特異性反應(yīng)及檢測速度等方面，都克服了血清學(xué)方法的很多不足，逐步形成了一條新的檢測途徑?，F(xiàn)在有三種分子生物學(xué)方法檢測草莓病毒。

（1）雙鏈RNA法。草莓在受RNA病毒侵染的植物體內(nèi)，有相應(yīng)復(fù)制形式的雙鏈RNA存在，而在健康植株中未發(fā)現(xiàn)病毒的dsRNA。

（2）核酸分子雜交檢測法。用互補DNA檢測草莓單鏈RNA病毒的方法，又稱DNA分子雜交法。

（3）聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測法。一種體外快速擴增病毒核酸序列并加以檢測的技術(shù)。

借助電子顯微鏡能分辨0.5微米大小的病毒顆粒。這樣可以直接觀察病毒，檢查出有無病毒存在，了解病毒顆粒的大小、形狀和結(jié)構(gòu)，又可以鑒定病毒的種類。這是一種較為先進的方法，但需一定的設(shè)備和技術(shù)。

由于電子的穿透力很低，制品必須薄到10～100微米，通常制成厚20微米左右的薄片，置于銅載網(wǎng)上，才能在電子顯微鏡下觀察到。