三疣梭子蟹的主要生長(zhǎng)環(huán)境是海水，經(jīng)?；顒?dòng)在30m左右的沙質(zhì)海底，它可以在13～38的鹽度中生存，其中最適合的鹽度為20～35。在繁殖交配的季節(jié)，會(huì)洄游到河口或者離海岸較近的淺海港的海灣附近進(jìn)行繁殖，此為生殖洄游（戴愛(ài)云等，1977）。三疣梭子蟹在世界范圍主要分布于東亞，在我國(guó)主要分布在遼寧、山東半島和東南沿海地區(qū)，是中國(guó)重要的漁業(yè)資源（戴愛(ài)云等，1986）。

鹽度是一種與滲透壓極其相關(guān)的環(huán)境因子，也是三疣梭子蟹生存環(huán)境中一個(gè)非常重要的水質(zhì)因子，對(duì)三疣梭子蟹的生長(zhǎng)、呼吸代謝、免疫防御、存活都有著非常重要的影響（周雙林等，2001）。另外，我國(guó)長(zhǎng)江口、黃河口近海尚有幾十萬(wàn)畝低鹽養(yǎng)殖池塘未利用，因此將三疣梭子蟹遺傳育種工作與水質(zhì)環(huán)境（鹽度）結(jié)合，進(jìn)行耐低鹽品種的培育顯得十分重要。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)低鹽脅迫對(duì)各家系進(jìn)行抗逆實(shí)驗(yàn)，比較各家系耐低鹽的能力，選育出耐低鹽能力強(qiáng)的家系。之后通過(guò)連續(xù)選育提高家系內(nèi)三疣梭子蟹耐低鹽的能力，為培育三疣梭子蟹耐低鹽品系奠定基礎(chǔ)。

實(shí)驗(yàn)所用三疣梭子蟹（80日齡）為中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所經(jīng)過(guò)群體和家系選育出的“黃選1號(hào)”和10個(gè)家系（J1，J2，J3，J4，J5，J6，J7，J8，J9，J10），實(shí)驗(yàn)于2011年7月27日在山東省昌邑市海豐水產(chǎn)養(yǎng)殖有限責(zé)任公司進(jìn)行，正式實(shí)驗(yàn)前于養(yǎng)殖車(chē)間暫養(yǎng)72 h，暫養(yǎng)期間連續(xù)充氣，每天定時(shí)投喂藍(lán)蛤，換水清污，暫養(yǎng)期間淘汰掉活力不強(qiáng)的個(gè)體。

半致死低鹽脅迫實(shí)驗(yàn)：隨機(jī)選取大小一致的健康三疣梭子蟹（“黃選1號(hào)” ）。實(shí)驗(yàn)共設(shè)5組，鹽度分別為35.0（對(duì)照組）、15.0、13.0、11.0、9.0，每組3個(gè)平行，每個(gè)平行30只三疣梭子蟹。實(shí)驗(yàn)期間正常投喂，連續(xù)充氣，保持恒溫；分別于24.48.72　h記錄死亡情況，及時(shí)取出死亡個(gè)體。每個(gè)實(shí)驗(yàn)組于72 h隨機(jī)選取3只三疣梭子蟹取樣（鰓和肝胰腺），固定于Davidson溶液，24 h后移入70%的乙醇長(zhǎng)久保存，用于制作切片。根據(jù)半致死脅迫實(shí)驗(yàn)確定脅迫鹽度。正式實(shí)驗(yàn)設(shè)置為10組，分別為10個(gè)三疣梭子蟹家系：J1，J2，J3，J4，J5，J6，J7，J8，J9，J10。每組含3個(gè)平行，一個(gè)對(duì)照，依據(jù)芮菊生（1980）的方法對(duì)固定樣品進(jìn)行處理。將固定樣品用酒精系列脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，LeicaRM2145型切片機(jī)切片，切片厚度4～6 μm。Olympus光學(xué)顯微鏡下觀察并拍攝照片。