衣原體感染性疾病
衣原體是人類疾病最常見病原體群之一,主要有沙眼衣原體(Chlamydia trachomarls,Ct)、肺炎衣原體(Chlamydia pneumoniae,Cpn)和鸚鵡熱衣原體(Chlamydia psittaci,Cps)等。由于衣原體在專性細(xì)胞內(nèi)寄生,在無生命培養(yǎng)基中不能生長,因此對衣原體感染的病原學(xué)診斷有一定的難度。
(一)傳染檢查方法
衣原體感染傳統(tǒng)檢查方法存在著其優(yōu)缺點。
1.分離培養(yǎng)法 雞胚和傳代腫瘤細(xì)胞株(如McCoy、Hep-2、Hela229、H292等)分離培養(yǎng)衣原體可獲得較高的特異性,因此分離培養(yǎng)法曾被認(rèn)為是診斷衣原體感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”。盡管人們不斷改良分離培養(yǎng)條件,如變換不同的細(xì)胞株、細(xì)胞株經(jīng)放線菌處理、標(biāo)本接種后離心等等,但在實際工作中分離培養(yǎng)法的靈敏度仍顯不足,且由于各實驗室采用不同的細(xì)胞株、不同的步驟,因而該法所得的結(jié)果缺乏橫向比較價值。當(dāng)前,分離培養(yǎng)不適用于臨床,而多用于科研。
2.酶標(biāo)檢測法 操作簡單且易于自動化,但衣原體的免疫原性差,以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)的檢測技術(shù)優(yōu)勢無法體現(xiàn)。1999年,美國CDC系統(tǒng)評價了各廠商生產(chǎn)的Ct免疫檢測試劑盒的特異度和靈敏度,與培養(yǎng)法相比,盡管特異度在99.6%~99.8%,但靈敏度Syva DFA為74.5%、Syva EIA為71.7%、Sanofi EIA為66.8%、Abbott EIA為61.9%,即衣原體感染的免疫法檢測靈敏度僅在61.9%~74.5%。
(二)分子診斷方法
近年來,人們一直在探索靈敏、特異和簡便的衣原體感染檢查技術(shù),其中分析衣原體DNA的方法正在建立。
衣原體感染的分子診斷技術(shù)中已有基因探針雜交、PCR、巢式PCR、LCR、TMA等方法。其中基因探針雜交和連接酶鏈反應(yīng)(ligase chain reaction,LCR)單獨使用靈敏度不足,宜與PCR聯(lián)合應(yīng)用。巢式PCR不僅特異性與靈敏度均占優(yōu)勢,而且由于無須增添任何設(shè)備,能開展PCR檢測的單位均可實施,是較為適合的方法。
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