實驗四　腸道標本的細菌學檢驗

一、腸道標本中常見的病原體

在腸道標本中可以發(fā)現的微生物和寄生蟲種類很多，分為內源性和外源性。內源性的包括正常菌群的各種厭氧菌、大腸埃希菌、變形桿菌等；外源性的大都是致病性的，涉及細菌、真菌、病毒、寄生蟲等幾乎所有病原性生物種類。常見的病原體有沙門菌屬、志賀菌屬、大腸埃希菌屬、霍亂弧菌、副溶血性弧菌、彎曲菌、小腸結腸炎耶爾森菌、梭狀芽胞桿菌、結核分枝桿菌、金黃色葡萄球菌、艱難梭菌、幽門螺桿菌（胃及十二指腸）等。

腸道標本的檢驗，除考慮常見的病原體外，應該考慮內源性感染的可能性。

二、腸道標本一般細菌檢驗程序

腸道標本一般細菌檢驗程序如圖3－4所示。

圖3－4　腸道標本的一般細菌學檢驗程序

三、注意事項

1．腸道內存在大量的正常菌群，除非為了正常菌群的調查和鑒定，一般分離可疑致病菌應使用選擇性平板。

2．最好采集急性期和抗生素使用前的糞便標本，進行床邊接種。懷疑沙門菌感染時，應在發(fā)病2周后采集。

3．除懷疑霍亂弧菌、結核分枝桿菌和菌群失調引起的腹瀉外，糞便標本一般不做涂片檢查。在以糖類發(fā)酵為鑒別依據的培養(yǎng)基上，發(fā)酵型菌落進行氧化酶試驗時會出現假陰性。在選擇性平板上挑取菌落時，應使用接種針從菌落中心挑取，而不應使用接種環(huán)刮取菌落。

4．沙門菌屬容易丟失鞭毛抗原，此時要通過誘導使鞭毛恢復，才能鑒定。

四、病例分析

1．患者，男，8歲，出現嚴重腹部疼痛，大便次數不斷增加，且多次便血，伴發(fā)熱、嘔吐，到醫(yī)院急診，檢查有溶血性貧血及血小板減少等溶血性尿毒綜合征。

（1）以上癥狀提示最可能的病原菌是？

（2）應及時進行什么常規(guī)的微生物學檢查？

2．患者，男，67歲，取其腹瀉便標本，在堿性蛋白胨水標本中37℃增菌培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6～8h，接種在TCBS平板37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)16～18h，可見黃色菌落、染色鏡檢見G－彎曲桿菌、單端一鞭毛。在4號瓊脂上可見灰褐色菌落。

（1）最可能的病原菌是什么？

（2）為明確診斷需做哪些微生物學檢查？

3．患者，女，34歲，惡心、嘔吐，腹部絞痛、發(fā)熱、大量水樣瀉。糞便標本查到可發(fā)酵乳糖的革蘭陰性桿菌，此菌在伊紅—美藍瓊脂上呈綠色。

（1）最可能由哪種病原體引起？

4．患者，男，6歲，因出現低熱、頭痛、惡心、寒戰(zhàn)、嘔吐、腹瀉住院，取糞便標本進行過夜培養(yǎng)，查到革蘭陰性桿菌，該菌有動力，不發(fā)酵乳糖，硫化氫試驗陽性。

（1）以上癥狀提示最可能的病原菌是？

（2）為進一步確診，應首先做什么檢查？

5．患者，男，32歲。因急性腹痛2天，膿血便3天，以膿為主來就診，大便每天10余次至數十次，有明顯里急后重感，體溫38℃，血壓正常，白細胞增高，未見阿米巴原蟲。

（1）可初步診斷為哪種疾病？

（2）采用哪種方法能進行快速診斷？

6．患者，男，30歲。病人前一天晚上在朋友處吃了海鮮，第二天突然發(fā)熱，心動過速，腹部絞痛，彌漫性腹部壓痛，稀水樣便，無脫水征象。經糞便培養(yǎng)，在糞便中檢出多形核白細胞，糞便在高鹽培養(yǎng)基上分離出弧形或逗點狀細菌，該菌神奈川（Kanagawa）試驗陽性。

（1）最可能由哪種病原體引起？

（2）采用哪種方法能進行快速診斷？