實(shí)驗(yàn)十五　血清總甘油三酯測定（GPO－PAP法）

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求

1．了解血清中甘油三酯測定在人體營養(yǎng)學(xué)上的意義及其生理學(xué)上的重要性。

2．掌握血清中甘油三酯測定方法及722型分光光度計(jì)或半自動(dòng)生化分析儀的使用方法。

二、實(shí)驗(yàn)原理

紫色醌亞胺色澤強(qiáng)度與甘油三酯含量成比例，在546nm波長處比色可求得TG含量。

三、實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

1．本實(shí)驗(yàn)所用儀器

（1）AT－648自動(dòng)生化分析儀；

（2）四孔恒溫水浴鍋。

2．分組及儀器　2人一組，每組儀器包括：

（1）試管架1個(gè)；

（2）2ml試管10個(gè)；

（3）10μl微量加樣器1個(gè)；

（4）1ml移液管1個(gè)；

（5）2ml移液管2個(gè)；

（6）洗耳球1個(gè)；

（7）搪瓷盤1個(gè)；

（8）微量加樣滴頭；

（9）吸水紙。

3．試劑

（1）甘油激酶　　　　　　　≥2kU／L

（2）脂蛋白酯酶　　　　　　≥3kU／L

（3）甘油磷酸氧化酶　　　　≥3kU／L

（4）過氧化物酶　　　　　　≥2kU／L

（5）ATP　　　　　　　　　 ≥0．5mmol／L

（6）TOOS　　　　　　　　　≥1mmol／L

（7）Good’s緩沖液　　　　 pH　7．0

（8）4－氨基安替吡啉　　　 ≥0．5mmol／L

（9）穩(wěn)定劑　　　　　　　　適量

（10）生理鹽水　　　　　　 適量

四、實(shí)驗(yàn)方法與步驟

1．于一系列試管中，按下表加入各溶液

表15－1　系列反應(yīng)管中各管所加溶液

2．混合，置37℃水浴保溫5min。

3．于波長546nm以空白校零，讀取各管吸光度（A）

五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

六、實(shí)驗(yàn)報(bào)告

參照《營養(yǎng)學(xué)》、《生物化學(xué)》原理分析。

七、注意事項(xiàng)

1．試劑為空白對(duì)照；

2．每組樣品做2～3個(gè)平行；

3．正常參考范圍：0．565～1．695mmol／L（50～150mg／dl）。