五、酶的專一性
(一)實驗原理
酶的催化作用具有高度的專一性。本實驗以唾液淀粉酶和蔗糖酶對淀粉和蔗糖的催化作用為例,來說明酶的專一性。
淀粉和蔗糖無還原性,唾液淀粉酶水解淀粉生成有還原性的麥芽糖,但不能催化蔗糖的水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解產生還原性葡萄糖和果糖,但不能催化淀粉的水解。用班氏(Benedict)試劑檢查糖的還原性。
(二)實驗藥品、實驗設備
1.2%蔗糖溶液;
2.溶于0.3%氯化鈉的1%淀粉溶液(現(xiàn)用現(xiàn)配);
3.稀釋200倍的新鮮唾液;
4.蔗糖酶溶液:將鮮酵母用水洗滌2~3次(離心法),然后放在濾紙上自然干燥。取干酵母100g,置于乳缽內,加適量蒸餾水及少量細沙,用力研磨,提取約1h,再加蒸餾水使總體積約為原體積的10倍。離心,將上清液保存于冰箱中備用。
5.班氏(Benedict)試劑:無水硫酸銅1.74g溶于100mL熱水中,冷卻后稀釋至150mL。取檸檬酸鈉173g,無水碳酸鈉100g和蒸餾水600mL,加熱,溶解后冷卻并加水至850mL,再加入冷卻的150mL硫酸銅溶液。本試劑可長久保存。
6.恒溫水浴,沸水浴,試管及試管架。
(三)實驗方法
1.淀粉酶的專一性
分別在6支試管中,按表3-4所示順序和劑量加入試劑,觀察各試管發(fā)生的現(xiàn)象,并解釋實驗結果(提示:唾液除含淀粉酶外還含有少量麥芽糖酶)。
表3-4 淀粉酶的專一性實驗
2.蔗糖酶的專一性
分別在6支試管中,按表3-5所示順序和劑量加入試劑,觀察各試管發(fā)生的現(xiàn)象,并解釋實驗結果。
表3-5 蔗糖酶的專一性
(四)實驗記錄
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