實驗實訓五 植物呼吸強度的測定
一、實訓目標
學會小籃子法測定植物呼吸強度的原理及操作方法。
二、實訓原理
測定呼吸作用,一般測定呼吸過程消耗的O2量,或放出的CO2量。本實驗用小籃子法測定呼吸過程中釋放的CO2量。植物進行呼吸時放出CO2,計算一定的植物樣品在單位時間內(nèi)放出CO2的量,即為該樣品的呼吸速率。
利用Ba(OH)2溶液吸收呼吸過程中釋放的CO2,試驗結束后,用草酸溶液滴定殘留的Ba(OH)2,從空白和樣品兩者消耗草酸溶液之差,即可計算出呼吸過程中釋放的CO2量。
三、實訓材料、試劑與儀器
1.材料
萌發(fā)的小麥種子。
2.試劑
0.05mol/L Ba(OH)2溶液、0.1%(g/mL)麝香草酚酞酒精溶液、1/44mol/L草酸溶液。
3.儀器
500mL廣口瓶、酸式滴定管、尼龍網(wǎng)制小籃。
四、操作要點
(1)取500mL廣口瓶一個,瓶口用打有三孔的橡皮塞塞緊,一孔插一盛堿石灰的干燥管,使呼吸過程中進入的空氣無CO2,一孔插溫度計,另一孔直徑約1cm,用一橡皮塞塞緊,供滴定時用。瓶塞下面掛一網(wǎng)狀小籃,用以盛實驗材料。
(2)稱取萌發(fā)的小麥種子20g,裝于小籃內(nèi),將小籃掛在廣口瓶內(nèi),同時將0.05 mol/L Ba(OH)2溶液15mL加入廣口瓶內(nèi),立即塞緊瓶塞,防止漏氣。每10min左右,輕輕搖動廣口瓶,破壞溶液表面BaCO3薄膜,以利于對CO2的吸收。
(3)1h后,小心打開瓶塞,迅速取出小籃,加入2滴指示劑,立即重新塞緊瓶塞。然后拔出小橡皮塞,將滴定管插入小孔中,用1/44mol/L草酸溶液滴定,直到紫紅色變成無色為止。記錄滴定所耗用草酸溶液的體積。
(4)另取用沸水徹底煮死的種子,做同樣測定,以此作為對照。
(5)計算:
式中,V0為煮死的種子所耗用草酸溶液的體積(mL),V1為發(fā)芽的種子所耗用草酸溶液的體積(mL)。由于草酸濃度為1/44mol/L,1mL草酸溶液相當于1mg CO2。
五、問題與討論
對照實驗為什么要用沸水徹底煮死的種子?
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