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        血漿組織型纖溶酶原活化劑的檢測(cè)

        時(shí)間:2023-06-30 百科知識(shí) 版權(quán)反饋
        【摘要】:血漿纖溶酶原活化劑具有將纖維蛋白酶原分解為纖維蛋白酶、激活纖溶系統(tǒng)的生理作用。纖溶系統(tǒng)的主要成分是纖溶酶原,它是一種無(wú)活性的酶原,轉(zhuǎn)變?yōu)橛谢钚缘拿负?,參與纖維蛋白與各種細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的降解?!⊙獫{組織纖溶酶原活化劑活性檢測(cè)檢測(cè),發(fā)色底物法:血漿優(yōu)球蛋白部分含有t-PA及全部凝血因子,但不含PAI。

        血漿纖溶酶原活化劑(plasminogen activator,PA)具有將纖維蛋白酶原分解為纖維蛋白酶、激活纖溶系統(tǒng)的生理作用。最重要的是組織型纖溶酶原激活物(tissue plasminogen activator,t-PA),它誘導(dǎo)循環(huán)纖維蛋白的凝血塊溶解,另外還有尿激酶型纖溶酶原激活物,通過(guò)與特殊的細(xì)胞受體結(jié)合,引起與細(xì)胞結(jié)合的纖維蛋白原活化。纖溶系統(tǒng)的主要成分是纖溶酶原,它是一種無(wú)活性的酶原,轉(zhuǎn)變?yōu)橛谢钚缘拿负?,參與纖維蛋白與各種細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的降解。t-PA最早發(fā)現(xiàn)于循環(huán)中,可以誘導(dǎo)纖維蛋白凝塊降解;t-PA從血管內(nèi)皮持續(xù)釋放,這是靜脈阻塞、高強(qiáng)度的體力活動(dòng)或作用于血管的藥物,如兒茶酚胺類刺激的結(jié)果。它們會(huì)使t-PA在幾分鐘內(nèi)迅速升高。由于t-PA快速的肝臟清除率和其有效地與PAI-1形成無(wú)活性的復(fù)合物,在循環(huán)中的半衰期僅為5min。與其他止血酶相比較,t-PA不以無(wú)活性的酶原形式釋放,而是以有活性的蛋白酶形式釋放,對(duì)循環(huán)血漿中游離的纖溶酶原的親和力很低。

        (一)血漿組織型纖溶酶原活化劑活性檢測(cè)

        【原理】 血漿組織纖溶酶原活化劑活性檢測(cè)(tissue plasminogen activator activity,t-PA:A)檢測(cè),發(fā)色底物法:血漿優(yōu)球蛋白部分含有t-PA及全部凝血因子,但不含PAI。受檢血漿加入過(guò)量纖溶酶原和纖維蛋白共價(jià)物,血漿中的t-PA吸附于纖維蛋白上,并使纖溶酶原變成纖溶酶,纖溶酶使發(fā)色底物S-2251釋放出PNA而顯色,顯色的深淺與受檢血漿中t-PA的含量呈正相關(guān)。方法學(xué)略。

        【參考值】 300~600U/ml。

        【臨床意義】 t-PA隨年齡的增加而增高,隨劇烈運(yùn)動(dòng)、應(yīng)急反應(yīng)而增高,因此在檢測(cè)時(shí)要充分考慮這些因素。t-PA活性測(cè)定較利用免疫方法測(cè)定抗原含量要準(zhǔn)確,但可受多種因素的影響(溶血、飲食、采血等)。另外t-PA的檢測(cè)亦可廣泛應(yīng)用于溶栓治療的監(jiān)測(cè)中,一般要求,靜脈注射t-PA 10~20min后,血漿t-PA活性或含量以達(dá)到參考值的2~3倍為最佳。

        1.增高 表明纖溶活性亢進(jìn),見于原發(fā)性纖溶和繼發(fā)性纖溶,如DIC,也見于應(yīng)用纖溶酶原激活劑類藥物。

        2.減低 表示纖溶活性減弱,見于高凝狀態(tài)和血栓性疾病。另外也見于高脂血癥、手術(shù)損傷及口服避孕藥。

        (二)血漿組織型纖溶酶原活化劑抗原檢測(cè)

        【原理】 血漿組織型纖溶酶原活化劑抗原(tissue plasminogen activator antigen,t-PA:Ag)測(cè)定,ELISA法:用純化的多克隆或單克隆抗t-PA抗體包被在固相載體上溫浴。然后加入受檢樣本,其中的t-PA抗原與固相載體上的抗體形成復(fù)合物,該復(fù)合物可與過(guò)氧化物酶標(biāo)記的二抗起抗原抗體結(jié)合反應(yīng),形成的多重復(fù)合物可使鄰苯二胺呈色,其深淺與受檢標(biāo)本中的t-PA抗原含量成正比。方法學(xué)略。

        【參考值】 1.5~10.5μg/L。

        【臨床意義】 同t-PA:A測(cè)定,但與t-PA抗原含量增高相反,抗原含量降低往往是不明顯的,其中主要原因是因檢測(cè)中使用的抗體質(zhì)量不高,檢測(cè)內(nèi)容包含了游離型t-PA和復(fù)合型t-PA(Fg-t-PA-PLG)的檢測(cè),也可能與血中的嗜異性抗體、類風(fēng)濕因子有交叉反應(yīng)。

        【問(wèn)題和注釋】 血液采集t-PA的測(cè)定時(shí)間應(yīng)該定于早晨8:00~10:00,在采血前病人至少應(yīng)先休息20min,這是因?yàn)轶w力活動(dòng)的增加會(huì)導(dǎo)致t-PA釋放增加。

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