常規(guī)染色技術(shù)(染色)
蘇木素-伊紅染色簡(jiǎn)稱HE染色,是最常用的染色方法,蘇木素是一種堿性染料,可將細(xì)胞核和細(xì)胞內(nèi)核糖體染成藍(lán)紫色,伊紅是一種酸性染料,能將細(xì)胞質(zhì)染成紅色或淡紅色。HE染色可以顯示腎小球的細(xì)胞增生、炎細(xì)胞浸潤(rùn)。還能很好的顯示腎小管上皮細(xì)胞的損傷和腎間質(zhì)水腫情況。
(一)需要試劑
①蘇木素染液;②1%鹽酸乙醇液;③氨水;④1%伊紅液。
(二)具體染色步驟
1.切片常規(guī)脫蠟入水。
2.蘇木素染細(xì)胞核1~2min,水洗。
3.入1%鹽酸乙醇分化數(shù)秒,水洗。
4.氨水返藍(lán)數(shù)秒。
5.流水沖洗,鏡下觀察細(xì)胞核成藍(lán)色。
6.1%伊紅染數(shù)秒,水洗。
7.梯度乙醇脫水,二甲苯透明,樹膠封片。
染色結(jié)果:胞核呈藍(lán)色,胞漿呈紅色,紅細(xì)胞呈橘紅色,其他成分呈深淺不同紅色(圖3-5)。
(三)注意事項(xiàng)
1.組織切片的脫蠟步驟應(yīng)徹底,否則組織無(wú)法著色,影響觀察。
2.伊紅染色的時(shí)間需嚴(yán)格控制。過長(zhǎng)胞漿染色紅色過深。
3.染色后的組織切片要將組織四周的污染物痕跡擦掉。
圖3-5 HE染色(×400)
參考文獻(xiàn)
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