血中的己糖主要是葡萄糖，可與蛋白質(zhì)發(fā)生緩慢的不可逆的非酶促反應(yīng)，形成糖化蛋白。糖化作用可發(fā)生在血紅蛋白、清蛋白、晶狀體蛋白、基膜蛋白、膠原蛋白等，蛋白質(zhì)的糖化可引起蛋白質(zhì)的變性，激活巨噬細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)，使低密度脂蛋白的清除受損，增加血小板的黏附性，促使糖尿病各種并發(fā)癥的發(fā)生，糖尿病并發(fā)癥主要表現(xiàn)在大小血管病變，以眼、心、腦、腎諸器官受累最嚴(yán)重，并可發(fā)生心、腎功能不全和神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙。糖化蛋白的濃度與糖尿病合并的血管病變呈正相關(guān)，近年來糖化血紅蛋白正日益受到臨床的高度重視。血糖易受飲食、活動、藥物影響而經(jīng)常波動，因此隨機血糖只能反映取血瞬間的血糖水平，不能反映一段時間內(nèi)的血糖情況。而糖化血紅蛋白（glycosy-lated hemoglobin，GHb）可以作為糖尿病控制與否的監(jiān)測指標(biāo)，與血糖測定配合檢測，能夠更好地評價病人的糖代謝狀況，同時可用此指標(biāo)估計血管并發(fā)癥發(fā)生的危險度。

糖化血紅蛋白是紅細(xì)胞血紅蛋白的某些特殊分子部位和己糖（特別是葡萄糖）經(jīng)過緩慢、連續(xù)而不可逆的非酶促反應(yīng)結(jié)合而形成的產(chǎn)物，糖化血紅蛋白合成的速率與血糖的濃度成正比。成人紅細(xì)胞的血紅蛋白包括HbA1（占90%以上）、HbA2（占2．5%左右）和HbF（占1．5%左右）。HbA1中的部分血紅蛋白與己糖結(jié)合生成HbA1A（與磷酰葡萄糖結(jié)合）、HbA1B（與果糖結(jié)合）和HbA1C（與葡萄糖結(jié)合）。HbA1C就是通常所說的糖化血紅蛋白（GHb）。糖化血紅蛋白指的是和葡萄糖結(jié)合的血紅蛋白占全部血紅蛋白的比例。故HbA1C的測定最為準(zhǔn)確，如果測定的是全部HbA1，則其結(jié)果將比HbA1C測定高2%～4%，正常人一般為4%～6%。當(dāng)血液中葡萄糖濃度較高時，人體所形成的糖化血紅蛋白含量也會相對較高。人體內(nèi)紅細(xì)胞的壽命一般為120d，半衰期為60d，因此HbA1C的測定可反映檢測前6～10周的平均血糖水平，而與抽血時間，病人是否空腹，是否使用胰島素等因素?zé)o關(guān)。

糖化血紅蛋白的測定方法主要有兩類，一是基于糖化血紅蛋白與非糖化血紅蛋白所帶的電荷不同將二者分開，有陽離子交換層析法、電泳法和等電聚焦電泳法；二是基于血紅蛋白上糖化基團(tuán)的結(jié)構(gòu)特點，有親和層析法和單克隆抗體免疫法，使用不同的方法檢測，參考范圍也存在一定的差異。快速糖化血紅蛋白檢測儀是真正的POCT全定量檢測儀器，一般采用先進(jìn)的親和層析技術(shù)、免疫熒光技術(shù)、干式免疫層析或微粒色譜法等，儀器小巧、輕便、移動方便，操作簡單，僅需數(shù)微升末梢血或靜脈血，數(shù)分鐘即可出結(jié)果，檢測結(jié)果多以檢測出的HbAlc百分比形式顯示。并具有質(zhì)量控制系統(tǒng)。此類儀器大多為一機多用，可同時進(jìn)行CRP、HbAlc、U-Albumin、D-Dimer等多項檢測。檢測線性范圍寬，檢測CV一般＜5%。適用于各級醫(yī)院的檢驗科、內(nèi)分泌科、小兒科、腎病科、心內(nèi)科、神經(jīng)內(nèi)科等科室。

【檢測原理】　以2種檢測方法為例。

1．親和層析法　采用硼化瓊脂糖為載體，利用其與糖化血紅蛋白殘基中的葡萄糖特異結(jié)合的特性，達(dá)到分離糖化血紅蛋白的目的。

2．免疫凝集法　以Bayer DCA2000＋糖化血紅蛋白分析儀為例。①總血紅蛋白的檢測：總血紅蛋白被鐵氰化鉀氧化為高鐵血紅蛋白，之后與硫氰酸鹽形成硫氫酸高鐵血紅蛋白。最后用比色法（531nm）檢測出樣本中的總血紅蛋白濃度。②糖化血紅蛋白檢測：膠珠免疫抑制法。人工合成的凝聚劑（含多克隆的糖化血紅蛋白免疫活性結(jié)構(gòu)）引起膠珠（含糖化血紅蛋白鼠單克隆抗體）的凝集，其凝集物增強了531nm處的光散射。通過531nm的吸光度值確定光散射程度，從而確定糖化血紅蛋白的標(biāo)準(zhǔn)曲線以測定其濃度。經(jīng)分析儀自動進(jìn)行測量和計算，最后以糖化血紅蛋白百分比濃度的形式顯示結(jié)果。

【適應(yīng)證】

1．主要用于監(jiān)測糖尿病治療過程中血糖控制水平，以便調(diào)整用藥，也可估計新診斷的糖尿病患者已有高血糖的時間。

2．適用于各級醫(yī)院不同科室及門急診的快速檢測。

【標(biāo)本采集】　任何時間采集抗凝或非抗凝靜脈血或末梢血數(shù)微升。

【操作方法】　以Bayer DCA2000＋糖化血紅蛋白分析儀為例，其他各廠家儀器按儀器說明操作。

1．通過毛細(xì)管采樣器上的玻璃毛細(xì)管采集1μl全血（末梢血或靜脈血），并插入試劑盒。加有EDTA、肝素、檸檬酸鹽、氟化鈉或草酸鹽的全血樣本可在-70℃至5℃保存2周，或在25℃以下保存1周。

2．掃描試劑盒上條形碼，并插入測定儀。

3．拔掉尾部、關(guān)上門，6min后即可讀取結(jié)果。

【參考范圍】　HbAlc：4．5%～6．3%，由于試驗方法不同參考范圍有一定差異。國際衛(wèi)生組織（WHO）建議HbAlc的正常參考值為＜6．5%；臨界值為6．5%～7．5%；病理狀態(tài)時≥7．5%。糖尿病患者HbAlc≤7．0%時，說明血糖水平控制較好。

【臨床意義】　HbAlc的合成速率與紅細(xì)胞所處環(huán)境中糖的濃度成正比，HbAlc的濃度和該時間內(nèi)的平均濃度有關(guān)，不受每天葡萄糖水平變化的影響，也不受運動和飲食等因素的影響。HbAlc所占比率反映測定前2～3個月內(nèi)平均血紅蛋白水平，糖化血紅蛋白水平與紅細(xì)胞壽命及數(shù)量有關(guān)，HbAlc不能單獨用于糖尿病的診斷，但可反映糖尿病長期的控制狀況與程度。HbAlc檢測是實驗室監(jiān)測糖尿病長期控制狀況的可靠指標(biāo)。HbAlc檢測主要用于以下情況。

（1）糖尿病患者治療效果的監(jiān)測，當(dāng)控制不佳時，糖化血紅蛋白水平可高于參考范圍2倍以上，根據(jù)監(jiān)控結(jié)果臨床醫(yī)師可調(diào)整治療方案。

（2）HbAlc測定可作為研究糖尿病血管并發(fā)癥與血糖控制關(guān)系的指標(biāo)，嚴(yán)格控制血糖水平可使視神經(jīng)病變、神經(jīng)病變、心血管病變和腎病變明顯降低。HbAlc長期控制不佳易發(fā)生糖尿病血管并發(fā)癥。

（3）評估血糖每天都有明顯波動的糖尿病患者，在1983-1993年在美國和加拿大的20所醫(yī)學(xué)中心通過對1　441例1型糖尿病病人進(jìn)行的糖尿病干預(yù)和并發(fā)癥的臨床研究（diabetes control and complication，DCCT）的基礎(chǔ)上，美國糖尿病協(xié)會（ADA）提出了糖尿病治療的建議，應(yīng)將糖化血紅蛋白水平控制在7%之內(nèi)。糖尿病控制較好時可2～3個月測定一次，控制較差的患者應(yīng)增加監(jiān)測頻率。

（4）用于糖尿病患者的不同治療方法療效的評估。

【評價及注意點】

1．由于HbAlc和HbF無論用電泳法或?qū)游龇ǘ疾灰追珠_，因此HbF增高或有血紅蛋白?。℉bS、HbC、HbD）時不宜用層析法，改用單克隆抗體法較好。

2．因為糖化血紅蛋白水平是由平均血糖濃度和紅細(xì)胞壽命兩種因素決定的，所以血紅蛋白病可以影響檢測結(jié)果，因在患此類疾病時，血紅蛋白A可發(fā)生很大變化。當(dāng)紅細(xì)胞壽命延長時，檢測結(jié)果可出現(xiàn)假性升高，在出現(xiàn)溶血或失血時，可使檢測結(jié)果降低。

3．一般情況下，糖化血紅蛋白檢測可提供總血紅蛋白在7～24g／dl范圍內(nèi)的精確結(jié)果，大部分患者的糖化血紅蛋白濃度都在此范圍內(nèi)，但在病理情況下，會出現(xiàn)＜7g／dl或＞24g／dl，此種情況時可嘗試用其他方法檢測。

4．糖化血紅蛋白測定時，血液中可能存在的異常血紅蛋白對某些測定方法可產(chǎn)生干擾，按異常血紅蛋白的種類不同，可使糖化血紅蛋白產(chǎn)生假性的異常升高或降低。但親和層析法由于特異性強，不受異常血紅蛋白的干擾。

5．應(yīng)注意試劑盒儲存的溫度、濕度要求及使用的有效期限。

6．要使用儀器廠家專門提供的質(zhì)控品，以確?；炘噭┑挠行Ш筒僮髡_。

7．糖化血紅蛋白測定的標(biāo)準(zhǔn)化。美國國家糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)計劃（NGSP）于1996年形成，由執(zhí)行委員會和參考實驗室網(wǎng)絡(luò)組成，其中實驗室網(wǎng)絡(luò)包括管理核心、中心參考實驗室、參考實驗室和二級參考實驗室。所有參加NGSP活動實驗室測定結(jié)果的室間變異系數(shù)（CV）＜5%。HbAlc檢測結(jié)果與靶值的偏差＜0．8%，目前美國絕大多數(shù)實驗室報告的結(jié)果都能溯源到美國糖尿病控制及并發(fā)癥（DCCT）結(jié)果。其中90%的實驗室以HbAlc報告糖化血紅蛋白的結(jié)果。使對糖尿病及其并發(fā)癥的治療和預(yù)防工作有了統(tǒng)一的參考標(biāo)準(zhǔn)。目前，美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會（NCCLS）采納了NGSP的標(biāo)準(zhǔn)化模式。此類檢測儀中糖化血紅蛋白測定的標(biāo)準(zhǔn)化多數(shù)是按照美國DCCT和歐洲糖化血紅蛋白參考實驗室所推薦的標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行，可溯源到NGSP。如英國DREWSCIENTIFIC公司的DS1糖化血紅蛋白分析儀；挪威的NycoCaed ReaderⅡ；Bayer DCA2000＋糖化血紅蛋白分析儀等。

8．加抗凝劑或不加抗凝劑的毛細(xì)管血和靜脈血均可應(yīng)用?？鼓齽┛刹捎肊DTA、肝素、檸檬酸鹽、氟化鈉或草酸鹽等。