第二節(jié)　胃動(dòng)素測(cè)定

一、概 述

胃動(dòng)素(motilin,MTL)是由22個(gè)氨基酸組成的直鏈多肽,分子量2700,產(chǎn)生MTL的細(xì)胞密集在哺乳動(dòng)物的十二指腸近端空腸黏膜隱窩中。此外,還存在于神經(jīng)組織及垂體、下丘腦、大腦皮質(zhì)、小腦中,因此MTL也是一種腦-腸肽激素。

采用特異胃動(dòng)素抗體對(duì)人13種體液進(jìn)行系統(tǒng)分析,發(fā)現(xiàn)各體液中MTL含量梯度從高到低依次為十二指腸液、血漿、胃液、唾液、胸腔積液、腹水、血清、尿液、腦脊液、羊水、乳汁、精液、膽汁,推測(cè)MTL分泌細(xì)胞具有腔內(nèi)分泌作用。MTL主要生理作用是引發(fā)消化間期移行性運(yùn)動(dòng)綜合波(migarating motor complex,MMC)從而起腸道清道夫的作用。

二、病人準(zhǔn)備

劇烈運(yùn)動(dòng)后,MTL的濃度顯著增加;腎衰竭定期做血液透析的患者明顯高于正常人。

三、標(biāo)本采集

1.采集時(shí)間 空腹靜脈采血2ml,置于含30μl 10%EDTA二鈉和30μl抑肽酶塑料管中混勻,立即送檢。

2.標(biāo)本保存 盡快4℃分離血漿并檢測(cè),或于-20℃以下保存,為避免血漿中冷凝蛋白對(duì)測(cè)定干擾,測(cè)定時(shí)血漿復(fù)融后,混勻,4℃離心取上清液測(cè)定。

四、試驗(yàn)方法及正常參考范圍

酶聯(lián)免疫吸附法:采用雙抗體兩步夾心原理。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本加入到預(yù)先包被人MTL單克隆抗體透明酶標(biāo)包被板中,溫育足夠時(shí)間后,洗滌除去未結(jié)合的成分,再加入酶標(biāo)工作液,溫育足夠時(shí)間后,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過(guò)氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中人MTL的濃度呈正相關(guān),450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值,計(jì)算樣本中人MTL含量。

正常參考范圍 據(jù)資料記載,測(cè)定43例獻(xiàn)血員血漿胃動(dòng)素濃度為326pg/ml±58pg/ml。

五、臨床意義

在腹瀉、便秘、各類(lèi)癌腫未治者,胃腸癌術(shù)前、術(shù)后,糖尿病患者的空腹血漿胃動(dòng)素濃度均存在不同程度的升高,尤其消化道腫瘤患者血漿胃動(dòng)素100%顯著升高。