1.總體要求　EQA的組織應(yīng)從實(shí)際出發(fā)，由小到大，先在較小的范圍內(nèi)進(jìn)行，取得經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)，再擴(kuò)大到全地區(qū)或全國。EQA的程序設(shè)計(jì)主要包括以下幾個(gè)方面：①確定EQA計(jì)劃，按照計(jì)劃定期發(fā)放EQA樣本并制定相關(guān)表格，要求參加單位逐項(xiàng)填寫；②確定回報(bào)結(jié)果的量值單位和表示方法并通知參加室間質(zhì)評的各個(gè)實(shí)驗(yàn)室；③按規(guī)定日期進(jìn)行測定，并要求在指定的日期前將結(jié)果報(bào)送統(tǒng)計(jì)單位，逾期未報(bào)者不參加統(tǒng)計(jì)，回報(bào)結(jié)果的格式要求簡潔清楚；④要求參與EQA的實(shí)驗(yàn)室在測定EQA樣本時(shí)必須要使用同常規(guī)檢測樣本完全相同的操作流程進(jìn)行測定；⑤對測定方法、試劑和儀器等進(jìn)行歸納總結(jié)；⑥對參與EQA的實(shí)驗(yàn)室作出評價(jià)；⑦EQA的報(bào)告應(yīng)迅速及時(shí)。

2.對EQA樣本的要求

(1)為減少基質(zhì)效應(yīng)，要求EQA樣本與采自臨床患者的標(biāo)本的基質(zhì)盡量一致。例如，臨床標(biāo)本為血清則EQA標(biāo)本也應(yīng)為血清；而某些臨床標(biāo)本如痰、鼻咽拭子、宮頸拭子等，EQA樣本的基質(zhì)無法做到與其一致，此時(shí)可使用生理鹽水等替代。

(2)EQA樣本的濃度與該檢測項(xiàng)目的臨床應(yīng)用相適應(yīng)。應(yīng)根據(jù)臨床上最為常見的濃度范圍及通常所采用的分析系統(tǒng)的檢測下限去決定EQA樣本的濃度，同時(shí)也應(yīng)考慮醫(yī)學(xué)決定水平的界點(diǎn)，增加EQA的實(shí)用價(jià)值。例如目前國內(nèi)HBV DNA PCR檢測試劑盒和HCV RNA PCR檢測試劑盒的測定范圍多在每毫升103或104～107拷貝數(shù)，測定下限通常在每毫升103或104拷貝數(shù)，因此在設(shè)計(jì)質(zhì)評樣本時(shí)，就不要使用低于每毫升103或104拷貝數(shù)的樣本，但如設(shè)定過高的樣本濃度也脫離了臨床的實(shí)際需求，起不到應(yīng)有質(zhì)評的作用。

(3)樣本在運(yùn)輸過程中的穩(wěn)定性。EQA樣本通常需要一個(gè)郵寄的過程，如在一個(gè)小范圍內(nèi)進(jìn)行室間評價(jià)，可以采用液體質(zhì)控血清。但參與全國范圍EQA的實(shí)驗(yàn)室分布在不同地區(qū)，有些相對偏遠(yuǎn)的地區(qū)即使使用快遞郵寄也需要較長的時(shí)間，故目前一般要求質(zhì)評樣本能在常溫下穩(wěn)定10d以上，這時(shí)液體質(zhì)控血清往往不能滿足要求。目前衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心開展的全國HBV DNA和HCV RNA擴(kuò)增檢驗(yàn)的EQA樣本均為凍干品，可確保室溫下郵寄的穩(wěn)定性。凍干血清具有含量準(zhǔn)確，均一性好及成分穩(wěn)定的特點(diǎn)，但使用時(shí)應(yīng)注意全部溶解，注意避免強(qiáng)光照射。

(4)樣本的傳染危險(xiǎn)性。與室內(nèi)質(zhì)控品相同，EQA樣本應(yīng)當(dāng)經(jīng)過滅活處理，消除已知的病原體的傳染危險(xiǎn)性。

3.組合設(shè)計(jì)原則　用于病原體核酸如HBV DNA、HCV RNA等的擴(kuò)增檢測EQA樣本的組合設(shè)計(jì)原則是：每次質(zhì)評樣本數(shù)可為5～8份，包括1～2份強(qiáng)陽性、1～2份弱陽性、1～2份陰性及2～3份中等陽性(可為同一樣本)，強(qiáng)陽性樣本的功能是定性檢測時(shí)可觀察參評實(shí)驗(yàn)室對陽性標(biāo)本的基本測定能力，在定量測定時(shí)可用于觀察特定檢測方法與特定分析系統(tǒng)條件下對接近方法測定范圍上限的樣本測定的準(zhǔn)確度；弱陽性樣本的功能在定性測定時(shí)觀察參評實(shí)驗(yàn)室由于標(biāo)本中病原體濃度較低所致的假陰性情況，在定量測定則是觀察其所用測定方法及測定操作對接近方法測定范圍下限的樣本測定的準(zhǔn)確性；2～3份中等陽性的同一樣本檢測則主要是為了來考量實(shí)驗(yàn)室測定的重復(fù)性；陰性樣本是為了觀察參評實(shí)驗(yàn)室因?yàn)閿U(kuò)增產(chǎn)物和(或)操作所致的“污染”發(fā)生。上述各類樣本可在包括于一次EQA之內(nèi)也可根據(jù)需要分開進(jìn)行。

4.質(zhì)評樣本靶值的確定　臨床核酸和基因擴(kuò)增檢驗(yàn)室間質(zhì)評的靶值在定性測定時(shí)應(yīng)為明確的陰性或陽性，并采用當(dāng)時(shí)多家較好的試劑盒進(jìn)行確認(rèn)。目前定量測定調(diào)查樣本的定值方法主要有：①使用可靠的決定性方法或參考方法定值(公認(rèn)的定量方法如bDNA和COBAS Amplicor等，以國家或國標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)物進(jìn)行溯源)；②采用生產(chǎn)質(zhì)控血清時(shí)加入純物質(zhì)定值，即血清先經(jīng)透析除去欲測成分，再加入定量的純物質(zhì)；③幾個(gè)參考實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法測定，取均值作為該血清的定值；④使用參考實(shí)驗(yàn)室報(bào)告結(jié)果的均值為質(zhì)控血清的定值。在EQA實(shí)施過程中，理論上參加的實(shí)驗(yàn)室越多，所得結(jié)果的分布越趨向常態(tài)分布，均值就越接近真值；實(shí)際情況也恰恰如此，參考實(shí)驗(yàn)室所得數(shù)值往往和各實(shí)驗(yàn)室的回報(bào)結(jié)果的修正均值(剔除超出均值±3S以外的數(shù)據(jù)后算得的均值)相似。