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        清醒動物直接測壓法

        時間:2023-03-16 理論教育 版權反饋
        【摘要】:術后30min動物蘇醒,獨籠飼養(yǎng)36h后可連接測壓系統(tǒng)進行實驗。先將動脈導管內(nèi)PVP溶液清除,換入肝素化生理鹽水。動脈導管經(jīng)一連接管連上轉(zhuǎn)動裝置,連接管外由彈簧鋼絲保護。動物可以自由攝食和飲水。壓縮后數(shù)據(jù)以平均值和標準差表示。

        主要用于大鼠,也可用于狗等動物。

        (一)簡易清醒自由活動大鼠血壓測定技術

        1.操作步驟?、賹Ч苤谱鳎褐谱鲃用}導管時,取PE10聚乙烯管6cm,一端插入PE50聚乙烯管,深度約7mm,并在PE50外均勻加熱粘接,使粘接處形成一膨大隆起。為了防止加熱時將PE10管腔粘連,事先用E-1弦穿入管內(nèi)待粘好后再緩慢將弦拉出。制作靜脈導管時,取人體硅橡膠管1cm放入氯仿中,待其變軟后,套在PE50外。②手術操作:大鼠用地西泮5mg/kg加氯胺酮50mg/kg腹腔內(nèi)麻醉。在頭頂中央剪一2mm長的皮膚小口,將大鼠仰臥固定在手術板上,手術區(qū)剪毛,沿股動脈走向切開皮膚,切口上緣達腹股溝,長約3cm,用血管鉗分離皮下組織,暴露股動脈、股靜脈,用小彎鑷和小彎血管鉗輕輕將股動脈分離,自股動脈下方穿過兩根0號絲線,一根在遠心端將動脈結扎,另一根備用。動脈導管PE50端由金屬引針經(jīng)背部皮下從頭頂部剪口引出,用塑料注射器將導管內(nèi)充滿肝素200U/ml的等滲葡萄糖液,用小鑷子的柄端將股動脈提起以阻斷血流,用眼科剪剪一小口,將動脈導管PE10端緩慢插入動脈,放下鑷子,此時,可見動脈導管內(nèi)的血流有節(jié)律地緩慢向注射器推進(因塑料針筒阻力大),繼續(xù)將導管插入至腹主動脈。因腹主動脈壓力較大,往導管內(nèi)推注少許液體松手時血液即刻又將導管充盈,證明導管已插好,用近心端這根備用線將股動脈結扎在導管上。為了防止動物在接記錄系統(tǒng)時將導管拉出,在導管膨大隆起處穿一根線將導管固定在腿部肌肉上。導管內(nèi)換上PVP溶液,用大頭針封口,縫合切口。按常規(guī)分離頸外靜脈或股靜脈,插上靜脈導管以備給藥用,將導管用引針經(jīng)皮下從頭頂部剪口引出與動脈導管一起用馬鞍固定在項部。術后30min動物蘇醒,獨籠飼養(yǎng)36h后可連接測壓系統(tǒng)進行實驗。③連接測壓系統(tǒng):將動物連接測壓系統(tǒng)(圖7-4)。先將動脈導管內(nèi)PVP溶液清除,換入肝素化生理鹽水。動脈導管經(jīng)一連接管連上轉(zhuǎn)動裝置,連接管外由彈簧鋼絲保護。轉(zhuǎn)動裝置可以隨動物活動而旋轉(zhuǎn),并保證液體流動通暢。在轉(zhuǎn)動裝置與壓力換能器之間有一灌注三通管連接恒速推注器。經(jīng)此灌注裝置持續(xù)向動脈導管內(nèi)輸注(每小時0.5ml)肝素化(2.5×103 U/L)等滲葡萄糖液。④記錄血壓:采用生理記錄儀記錄血壓。

        2.注意事項與評價?、賱用}插管的選擇:開始采用國外類似方法,選用直接從腹主動脈插管,此法需打開腹腔,手術視野較大,動脈與靜脈不易分開,易引起出血,故成功率低(約50%)。1990年后改用從股動脈插入腹主動脈的方法,優(yōu)點:不需要打開腹腔,手術創(chuàng)傷小,動物恢復快;手術簡便,易掌握;手術成功率高,可達80%以上。②給藥途徑:如不采用靜脈給藥,則不行靜脈插管,但灌胃、腹腔注射等給藥操作可影響即時血壓記錄。為了滿足口服藥物實驗需要,準確測定經(jīng)胃給藥的時效關系,可預先造胃瘺,將導管一端插入胃內(nèi),另一端用引針經(jīng)皮下從頭頂部剪口引出與動脈導管一起用馬鞍固定,以備給藥用。③為防止導管凝血,實驗過程中一定要向動脈導管內(nèi)恒速輸注肝素化等滲葡萄糖液。④實驗環(huán)境:動物連接到測壓系統(tǒng)后,至少適應4h再開始記錄。動物置放在透明的有機玻璃圓筒內(nèi),圓筒放在通風的木制柜內(nèi)。動物可以自由攝食和飲水。實驗室恒濕恒溫(溫度:23±1℃)、光照自動控制(8:00~20:00)燈亮,其余時間燈滅,即一天中明暗時間比為(12h∶12h)。⑤此法的優(yōu)點:動物為清醒狀態(tài),活動不受限制;可進行急性實驗和慢性實驗,但慢性實驗維持時間有限。

        圖7-4 清醒自由活動大鼠測壓系統(tǒng)

        (二)計算機化清醒自由活動大鼠血壓測定技術

        與上述方法不同之處是本法采用安裝專門程序的計算機記錄血壓(圖7-4),這樣可長時間連續(xù)監(jiān)測血壓,并快速取得實驗結果。方法如下。

        (1)采樣、記錄和儲存:壓力信號經(jīng)換能器轉(zhuǎn)換為電信號,再經(jīng)放大器輸入計算機。多以250Hz的頻率采樣,即每4ms采樣一次,若大鼠心率以每秒6次計,則對每個心動周期的動脈壓波形取41~42個點,已能較真實地反映動脈血壓波形。在采樣的同時進行實時計算,計算出每個心動周期的5個參數(shù):收縮壓、舒張壓、心動周期、射血面積和下降斜率。并將這5個參數(shù)值存放到硬盤內(nèi)。采樣的間斷率在1%以內(nèi)。采樣及實時計算程序以80286匯編語言編寫,大大提高了取得結果的速度。

        (2)數(shù)據(jù)處理和結果分析:首先是整理數(shù)據(jù),包括查閱、修正、打印、圖形顯示和壓縮等。主要是壓縮,可以根據(jù)需要將記錄中任一段時間內(nèi)數(shù)據(jù)按任選的倍數(shù)壓縮。壓縮后數(shù)據(jù)以平均值和標準差表示。對壓縮后的數(shù)據(jù),可進一步壓縮。實時記錄的大量一次數(shù)據(jù)存在硬盤上,壓縮后的二次數(shù)據(jù)可以存在軟盤上長期保存。結果分析包括統(tǒng)計分析、信號分析和藥物效應計算三部分。經(jīng)過整理分析后的數(shù)據(jù)結果也可調(diào)用閱讀、繪圖、打印等程序,把數(shù)據(jù)或曲線打印在紙上供分析和保存。

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