微循環(huán)血流的觀察
【實驗?zāi)康摹?用顯微鏡觀察蛙腸系膜的小動脈、毛細(xì)血管和小靜脈,了解其血流特點和某些因素對血管舒縮活動的影響。
【實驗原理】 微循環(huán)是指微動脈和微靜脈之間的血液循環(huán)。組成微循環(huán)的血管壁薄,血流緩慢,是血液與組織之間物質(zhì)交換的主要場所。利用顯微鏡直接觀察蛙類的腸系膜微循環(huán)血流的特征。小動脈內(nèi)血流較快,不均勻,有時可見脈搏樣波動,能分辨出軸流與壁流;小靜脈內(nèi)流速較慢,但比毛細(xì)血管中的血流快,沒有脈搏樣波動,看不到壁流。
【實驗用品】 蛙或蟾蜍、顯微鏡,蛙類手術(shù)器械、蛙板、1ml注射器、大頭針、大燒杯、棉球、20%氨基甲酸乙酯、3%乳酸、0.01%組胺、0.01%去甲腎上腺素、任氏液。
【實驗步驟】
1.手術(shù)操作
(1)麻醉:用20%氨基甲酸乙酯溶液(2mg/g)進(jìn)行皮下淋巴囊注射,10~15min后蛙進(jìn)入麻醉狀態(tài),將蛙固定在蛙板上。
(2)腸系膜標(biāo)本制備:在蛙腹部旁側(cè)剪開腹壁,拉出一段小腸,將腸系膜展開用大頭針固定在蛙板上。
2.觀察項目
(1)低倍鏡觀察:觀察區(qū)分出小動脈、小靜脈和毛細(xì)血管,觀察其中血流速度的特征及血細(xì)胞在血管內(nèi)的流動情況。
(2)高倍鏡觀察:觀察各種血管的血流狀況和血細(xì)胞形態(tài)。
1)滴加3%乳酸2~3滴,觀察血管有何變化?觀察后用任氏液沖洗。
2)滴加0.01%去甲腎上腺素1滴,觀察血管及血流的變化,觀察后用任氏液沖洗。
3)滴加0.01%組織胺1滴,觀察血管有何變化。
【注意事項】
1.麻醉不可過深。
2.展開、固定腸系膜時,牽拉不可太緊,以免損傷腸系膜或阻斷血流。
3.隨時滴加任氏液,防止腸系膜干燥。
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