【目的與要求】

（1）掌握疏松結(jié)締組織的結(jié)構(gòu)。

（2）了解致密結(jié)締組織的結(jié)構(gòu)。

（3）掌握人外周血涂片中紅細(xì)胞及各類白細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)及正常值。

（4）熟悉透明軟骨和骨的微細(xì)結(jié)構(gòu)。

（5）掌握各種血細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)及正常值。

【教學(xué)重點(diǎn)】

（1）疏松結(jié)締組織的結(jié)構(gòu)。

（2）透明軟骨的微細(xì)結(jié)構(gòu)。

（3）各類血細(xì)胞的形態(tài)。

【教學(xué)難點(diǎn)】

（1）成纖維細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的區(qū)別。

（2）掌握骨密質(zhì)的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，各種骨板和骨細(xì)胞的排列方式。

（3）嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞的辨認(rèn)。

【預(yù)習(xí)提要】

1．疏松結(jié)締組織

（1）特點(diǎn)：①細(xì)胞少，但種類多；②細(xì)胞外基質(zhì)多，纖維排列稀疏，；③無極性。

（2）組成：由七種細(xì)胞（成纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、漿細(xì)胞、肥大細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、未分化的間充質(zhì)細(xì)胞及白細(xì)胞）、三種纖維（膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維）和基質(zhì)組成。

（3）分布：廣泛分布于器官之間、組織之間以及細(xì)胞之間。

（4）功能：連接、防御、保護(hù)、營養(yǎng)和修復(fù)等功能。

2．致密結(jié)締組織

細(xì)胞種類少，主要為成纖維細(xì)胞；基質(zhì)少，纖維成分多，排列緊密，依據(jù)纖維排列規(guī)則與否分為規(guī)則致密結(jié)締組織和不規(guī)則致密結(jié)締組織；具有支持、連接和保護(hù)等功能。

3．軟骨組織

軟骨組織由軟骨細(xì)胞和軟骨基質(zhì)構(gòu)成，無血管，營養(yǎng)由軟骨膜的血管供給。軟骨由軟骨組織和軟骨膜構(gòu)成，由依據(jù)軟骨基質(zhì)中所含纖維種類不同，軟骨分為透明軟骨、彈性軟骨和纖維軟骨。

4．骨組織

骨組織是骨的主要結(jié)構(gòu)，由細(xì)胞和鈣化的細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成；骨組織的細(xì)胞包括骨祖細(xì)胞、成骨細(xì)胞、骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞。長骨由骨松質(zhì)、骨密質(zhì)、骨膜等結(jié)構(gòu)組成。

5．血液

（1）組成：由血漿和血細(xì)胞組成，血細(xì)胞分紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板。

（2）血細(xì)胞的正常值：紅細(xì)胞 男性：（4．0～5．5）×1012/L（400萬～550萬/mm3），女性：（3．5～5．0）×1012/L（350萬～500萬/mm3）；白細(xì)胞（4～10）×109/L（4千～1萬/mm3）；血小板（100～300）×109/L（10萬～30萬/mm3）。

（3）血細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)及功能：①紅細(xì)胞：呈雙凹圓盤狀，無細(xì)胞核和細(xì)胞器，胞質(zhì)內(nèi)充滿血紅蛋白。其主要功能是運(yùn)輸O2和CO2；②中性粒細(xì)胞：呈圓球形，直徑10－12 μm，核桿狀或分2－5葉。胞質(zhì)含許多細(xì)小顆粒。主要功能是有很強(qiáng)的吞噬作用；③嗜酸性粒細(xì)胞：直徑12－14μm，呈八字形分2葉，胞質(zhì)充滿粗大、分布均勻的嗜酸性顆粒。其主要功能是抑制變態(tài)（過敏）反應(yīng)，殺滅寄生蟲；④嗜堿性粒細(xì)胞：直徑10－12μm，核分葉或S形。胞質(zhì)內(nèi)含有大、小不等，分布不均的嗜堿性顆粒。主要功能是參與變態(tài)反應(yīng)；⑤單核細(xì)胞：直徑14－20μm，核呈腎形、馬蹄形或扭曲不規(guī)則形，著色較淺。具有強(qiáng)大的吞噬功能。⑥淋巴細(xì)胞：直徑6～16μm，胞質(zhì)少，強(qiáng)嗜堿性，核圓染色深。其主要功能是參與免疫應(yīng)答；⑦血小板：呈雙凸圓盤狀結(jié)構(gòu)，中央部（紫藍(lán)色）為顆粒區(qū)；周邊部（淺藍(lán)色）為透明區(qū)。其主要功能是參與止血和凝血。

【實(shí)驗(yàn)內(nèi)容】

（一）疏松結(jié)締組織（鋪片）

【取材】 兔皮下組織。

【染色】 HE方法染色（活體注射苔盼藍(lán)入腹腔）

1．肉眼觀察

標(biāo)本形狀不規(guī)則。由于標(biāo)本的不同部位厚薄不勻，故顏色深淺不一。

2．低倍鏡觀察

將標(biāo)本仔細(xì)瀏覽一遍，可見各處均有染成紅色的纖維，吻合成網(wǎng)狀。各種細(xì)胞在低倍鏡下不易分辯，僅見大小不等，染色深淺不一的細(xì)胞核。間隙為基質(zhì)所在部位。選擇組織鋪展薄的部位觀察纖維成分，厚的部位觀察細(xì)胞成分。

3．高倍鏡觀察

注意分辨兩種纖維和兩種細(xì)胞，見圖3－1、圖3－2。

（1）膠原纖維：數(shù)量多，染成粉紅色，呈波浪狀。

圖3－1 高倍鏡下疏松結(jié)締組織鋪片

（2）彈性纖維：數(shù)量少，細(xì)而有分支，染成亮紅色。

（3）成纖維細(xì)胞：細(xì)胞體大有突起，細(xì)胞邊緣不清楚，胞質(zhì)弱嗜堿性，核較大呈卵圓形，染色淺。

（4）巨噬細(xì)胞：細(xì)胞呈圓形、卵圓形或不規(guī)則形，邊界較清楚，胞質(zhì)嗜酸性，內(nèi)含大小不等的藍(lán)色苔盼藍(lán)顆粒和空泡。核較小、染色較深。

（5）基質(zhì)：纖維和細(xì)胞之間充滿基質(zhì)（已溶解）。

（二）肥大細(xì)胞（示教）

【取材】 兔皮下組織鋪片。

【染色】 乙醇硫堇法。

圖3－2 高倍鏡下結(jié)締組織中的細(xì)胞

E嗜酸性粒細(xì)胞，F(xiàn)成纖維細(xì)胞，L淋巴細(xì)胞， M巨噬細(xì)胞，P漿細(xì)胞

高倍鏡觀察：細(xì)胞成群分布于小血管附近，呈圓形或卵圓形；核小，圓或卵圓形，居中，著色淺，胞質(zhì)內(nèi)充滿了粗大的嗜堿性顆粒，呈紫藍(lán)色。

（三）不規(guī)則的致密結(jié)締組織

【取材】 人體的掌皮。

【染色】 HE方法染色。

1．肉眼觀察

染成紫紅色的為復(fù)層鱗狀上皮，其深面著紅色是致密結(jié)締組織，為皮膚的真皮。

2．低倍鏡觀察

纖維被染成紅色，排列緊密，細(xì)胞少，纖維與細(xì)胞之間的空隙也少。

3．高倍鏡觀察

大量的膠原纖維，粗而密，排列方向不一，故有橫切、縱切和斜切等斷面，其間彈性纖維不易區(qū)分。細(xì)胞少，散在于纖維之間，核染色深，胞質(zhì)甚少，細(xì)胞類型難以分辨（圖3－3）。

圖3－3 高倍鏡下真皮結(jié)構(gòu)

L疏松結(jié)締組織；D不規(guī)則致密結(jié)締組織

（四）透明軟骨

【取材】 人氣管橫切面。

【染色】 HE方法染色。

1．肉眼觀察

標(biāo)本為氣管橫切面，管壁內(nèi)呈淺藍(lán)色“C”形或半弧形結(jié)構(gòu)是透明軟骨。

2．低倍鏡觀察（從軟骨周圍向中間進(jìn)行觀察）

（1）軟骨膜：包在軟骨周圍，為致密結(jié)締組織（圖3－4三角形所示）。

（2）軟骨細(xì)胞：位于軟骨陷窩內(nèi)。邊緣的細(xì)胞小，較幼稚，呈扁橢圓形，漸向中央逐步變大成熟，呈圓形或橢圓形，并常見2～4個(gè)軟骨細(xì)胞成群分布，即同源群細(xì)胞。

（3）軟骨間質(zhì)：呈均質(zhì)狀，其間的膠原原纖維較細(xì)，且與基質(zhì)折光率相同，故在切片中不易顯示?；|(zhì)染色視含硫酸軟骨素的多少而異含量越多，嗜堿性越強(qiáng)，含量越少，染色越淺，甚至為嗜酸性。

3．高倍鏡觀察

將軟骨中央部至高倍鏡下觀察，軟骨細(xì)胞在生活狀態(tài)下充滿于陷窩內(nèi)，切片中軟骨細(xì)胞常因固定后收縮，其周圍顯一透亮間隙（圖3－4箭頭所示）。陷窩周圍的基質(zhì)染色較深，呈強(qiáng)嗜堿性，稱軟骨囊。被包埋在基質(zhì)中的膠原纖維細(xì)而少，折光率與基質(zhì)相同，故纖維成分分辨不出來。

圖3－4 人氣管橫切面結(jié)構(gòu)圖

↑ 陷窩；△ 軟骨膜

（五）骨磨片

【取材】 兔長骨。

【染色】 硫堇染色。

1．肉眼觀察

標(biāo)本為淡黃色四方形小塊。

2．低倍鏡觀察

（1）外環(huán)骨板：位于骨干表面，為數(shù)層或十?dāng)?shù)層排列整齊的骨板（有的磨片沒有）。

（2）內(nèi)環(huán)骨板：位于骨髓腔面．為數(shù)層與骨髓腔面平行排列不完整的骨板（圖3－5白色三角形所示）。

（3）骨單位（Osteon）：位于內(nèi)外環(huán)骨板之間，由中央管（哈佛氏管，圖3－5箭頭所示）和同心圓排列的哈佛氏骨板組成，在中央管之間的橫行管道即為穿通管（?？寺瞎埽?/p>

（4）間骨板：在哈佛氏系統(tǒng)之間，可以看到一些排列不規(guī)則的骨板即間骨板，由骨單位被吸收后殘留的骨板構(gòu)成（圖3－6星號(hào)所示）。

圖3－5 長骨干橫切面

↑中央管，▲穿通管，△內(nèi)環(huán)骨板

圖3－6 骨單位

↑中央管，★間骨板

3．高倍鏡觀察

在圖3－7所示骨板之間，可見黑色小點(diǎn)（磨片留下的沉渣）即骨陷窩，為骨細(xì)胞所在位置，從骨陷窩發(fā)出許多放射狀微細(xì)突起（黑色細(xì)線狀），即骨小管，為骨細(xì)胞突起所在部位，相鄰骨陷窩之間骨小管彼此相互連通。

圖3－7 高倍鏡下骨單位橫切面結(jié)構(gòu)圖

（六）血涂片的觀察

【取材】 人類外周血液涂片。

【染色】 Giemsa或Wright染色。

1．肉眼觀察

標(biāo)本的血涂片呈一很薄的“血膜”，一端平直（后端），另一端呈圓弧形（前端）故整體呈舌形。將血膜面朝上置于低倍鏡下觀察。

2．低倍鏡觀察

移動(dòng)玻片，找到涂片較薄處觀察，可見大量圓形的血細(xì)胞，紅細(xì)胞數(shù)量最多，布滿整個(gè)視野，分散或成串分布，染成淺紅色；染成紫藍(lán)色小點(diǎn)為白細(xì)胞的細(xì)胞胞核，白細(xì)胞數(shù)量較少。選擇血膜較薄、細(xì)胞分布均勻且白細(xì)胞相對(duì)較多處，轉(zhuǎn)換高倍鏡進(jìn)一步觀察。

3．高倍鏡觀察

通過圖3－8，圖3－9所示，經(jīng)微調(diào)節(jié)器確認(rèn)低倍鏡下看到的細(xì)胞（以白細(xì)胞為佳），以保證血涂片的血膜面朝上。仔細(xì)觀察各類血細(xì)胞在高倍鏡下的形態(tài)特點(diǎn)。

（1）紅細(xì)胞：細(xì)胞小而圓，無核，胞質(zhì)由于含有血紅蛋白而呈嗜酸性（橘紅色，圖3－8），細(xì)胞中央著色較淺是因?yàn)榧t細(xì)胞為雙面凹的圓盤形，中央部較薄之故（注意紅細(xì)胞有疊鏈現(xiàn)象）。

（2）中性粒細(xì)胞：細(xì)胞圓形或卵圓形，比紅細(xì)胞大，胞質(zhì)呈淡紅色，其中可見淡紫紅色的細(xì)小顆粒。細(xì)胞核形態(tài)多樣，核分2－5葉不等，不分葉的核稱桿狀核（核分葉多少能說明什么？）

（3）嗜酸性粒細(xì)胞：數(shù)量較少，較中性粒細(xì)胞大，胞質(zhì)內(nèi)充滿粗大、分布均勻的鮮紅或橘紅色顆粒。核形態(tài)較飽滿，以2～3葉多見，染成藍(lán)色。

圖3－8 人類外周血涂片圖像

（Wright染色）

（4）嗜堿性粒細(xì)胞：數(shù)量少不易找到，細(xì)胞大小與中性粒細(xì)胞相近。胞質(zhì)內(nèi)可見分布不均、形態(tài)不規(guī)則、大小不等的藍(lán)色顆粒。核分葉呈“S”形或不規(guī)則形，著色淺。

（5）淋巴細(xì)胞：胞體大小不等，以小淋巴細(xì)胞為多，其直徑與紅細(xì)胞相似。核呈圓形，染成深藍(lán)色。胞質(zhì)少，呈一窄帶圍繞核，染成蔚藍(lán)色，有時(shí)含少量紫紅色的嗜天青顆粒。

（6）單核細(xì)胞：體積大，圓或卵圓形；核呈腎形、馬蹄鐵形或不規(guī)則形，染色質(zhì)顆粒細(xì)而松散，故染色較淺；胞質(zhì)較多，染成灰藍(lán)色，內(nèi)含較多細(xì)小的嗜天青顆粒。

（7）血小板：體積最小，成群分布于血細(xì)胞之間，呈不規(guī)則形，中央含紫色顆粒。

圖3－9 五種白細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)比較

（Wright染色）

【實(shí)驗(yàn)報(bào)告】

繪出疏松結(jié)締組織和各種血細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)圖。

【思考題】

（1）與上皮組織比較，疏松結(jié)締組織有哪些共同結(jié)構(gòu)特點(diǎn)？

（2）光鏡下分辨疏松結(jié)締組織和致密結(jié)締組織的主要區(qū)別點(diǎn)是什么？

（3）試述透明軟骨的組織結(jié)構(gòu)，為什么在此片中看不到纖維？

（4）血液有形成分包括哪些？

（5）試述各類血細(xì)胞的數(shù)量、大小、形態(tài)結(jié)構(gòu)及功能。

作業(yè)欄

作業(yè)欄